国家自然科学基金(30360044)
- 作品数：2 被引量：4H指数：2
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- 相关机构：新疆农业科学院新疆农业大学南京工业大学更多>>
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- 高温中性蛋白酶基因的克隆、表达及验证研究被引量：2
- 2008年
- 对地衣芽孢杆菌XJT9503高温中性蛋白酶基因进行了克隆、测序及表达研究。以高温中性蛋白酶产生菌地衣芽孢杆菌XJT9503基因组DNA为模板,通过PCR扩增,获得特异性片段。经测序分析,其具有一个942 bp的蛋白酶完整阅读框。通过表达载体构建,获得质粒pPL-tnp,并转化至蛋白酶缺失受体菌枯草芽孢杆菌AB97013,经表达验证其蛋白酶最适作用温度和pH与出发菌相符。证明研究获得了高温中性蛋白酶基因及表达质粒pPL-tnp,并正确表达。
- 茆军王玮张志东谢玉清罗淑萍
- 关键词：高温中性蛋白酶克隆地衣芽孢杆菌枯草芽孢杆菌
- 高温中性蛋白酶基因的克隆及毕赤酵母表达研究被引量：2
- 2009年
- 对地衣芽孢杆菌XJT9503高温中性蛋白酶进行了克隆,并在毕赤酵母中进行了表达。以高温中性蛋白酶产生菌地衣芽孢杆菌XJT9503基因组DNA为模板,通过PCR扩增,获得高温中性蛋白酶(Tnp)基因的特异性片段,大小约为1 kb。通过EcoRI、NotI双酶切后,将该基因连入毕赤表达载体pPIC9K,并整合到毕赤酵母SMD1168基因组中,构建的基因工程菌,进行甲醇诱导表达。结果表明,基因工程菌发酵72 h,有最大酶活,为19 U/mL;酶的最适作用温度为65℃,与原始酶的最适作用温度相符。证明研究成功克隆了高温中性蛋白酶基因,并在毕赤酵母中正确表达。
- 王玮张志东茆军王涛谢玉清唐琦勇
- 关键词：高温中性蛋白酶毕赤酵母克隆
