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广西壮族自治区自然科学基金(0991258)

作品数:2 被引量:5H指数:1
相关作者:苏何玲朱华莫之婧刘永明陈莉更多>>
相关机构:桂林医学院更多>>
发文基金:国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 2篇医药卫生

主题

  • 1篇胰岛
  • 1篇胰岛素
  • 1篇胰岛素分泌
  • 1篇真核
  • 1篇真核表达
  • 1篇真核表达载体
  • 1篇磷酸酯酶
  • 1篇磷脂酶A1
  • 1篇磷脂酸
  • 1篇克隆
  • 1篇基因
  • 1篇基因表达
  • 1篇核表达
  • 1篇A1
  • 1篇MIN6细胞

机构

  • 2篇桂林医学院

作者

  • 2篇刘青波
  • 2篇陈莉
  • 2篇刘永明
  • 2篇莫之婧
  • 2篇朱华
  • 2篇苏何玲
  • 1篇班亚珂
  • 1篇于婕
  • 1篇李康智
  • 1篇胡春萍

传媒

  • 2篇中国现代医学...

年份

  • 1篇2013
  • 1篇2011
2 条 记 录,以下是 1-2
排序方式:
人亲磷脂酸磷脂酶A1基因的克隆与序列分析及真核表达载体的构建
2013年
目的克隆人亲磷脂酸磷脂酶A1(PA-PLA1)基因,分析该酶基因及其蛋白质的序列特征并构建PA-PLA1基因真核表达载体,为该酶生理功能的研究提供实验依据。方法从人的肾脏组织中提取总RNA,逆转录制备cDNA。扩增人PA-PLA1基因并克隆测序。以Vector NTI 8.0、DNASTAR、ORF finder分析所克隆的人PA-PLA1基因及其蛋白质序列。构建真核表达载体pcDNA3.1-PA-PLA1,测序证实后转染小鼠分泌胰岛素细胞株MIN6,以Western blotting检测PA-PLA1蛋白的表达水平。结果人PA-PLA1基因mRNA全长为2 923 bp,编码区长2 238 bp,编码1个由745个氨基酸残基组成的蛋白多肽。序列比对表明所克隆的人PA-PLA1基因与牛PA-PLA1基因同源,并与KIAA0725p和p125基因高度相似,三者在脂肪酶家族中形成亚家族,但KIAA0725p蛋白和p125蛋白具有常见的脂肪酶活性中心保守序列GX-S-XG,而PA-PLA1的该序列为SX-S-XG。真核表达载体pcDNA3.1-PA-PLA1构建正确并在所转染的MIN6细胞中过表达PA-PLA1蛋白。结论 PA-PLA1、KIAA0725p蛋白和p125蛋白在脂肪酶家族中形成亚家族,但PA-PLA1具有独特的脂肪酶活性中心保守序列SX-S-XG。所构建的PA-PLA1基因真核表达载体能在MIN6细胞中过表达小鼠PA-PLA1蛋白。该研究结果将为PA-PLA1生理功能的研究提供实验依据。
班亚珂苏何玲朱华莫之婧刘青波陈莉刘永明
关键词:克隆真核表达载体
MIN6细胞中亲磷酸酯酶A1基因表达与胰岛素分泌关系的初步研究被引量:5
2011年
目的研究亲磷酸酯酶A1(PA-PLA1)基因在小鼠分泌胰岛素细胞株M IN 6中的表达及其与胰岛素分泌的关系。方法对M IN 6细胞进行不同浓度和不同时间的葡萄糖刺激胰岛素分泌的实验,酶联免疫吸附法测定细胞上清液中胰岛素分泌量,实时荧光定量PC R检测相应条件下PA-PLA1 m R N A的表达水平,线性相关分析PA-PLA1 m R N A表达水平与胰岛素分泌的相关性。结果在一定葡萄糖浓度范围内,PA-PLA1m R N A水平随着葡萄糖浓度的升高和刺激时间的延长而升高,并与细胞胰岛素分泌量呈明显的正相关。不同葡萄糖浓度和不同刺激时间的PA-PLA1 m R N A水平与胰岛素水平的相关系数r分别为0.89(P<0.01)和0.98(P<0.01)。结论小鼠分泌胰岛素细胞株M IN 6中PA-PLA1基因的表达与胰岛素分泌之间具有高度的正相关性。
于婕苏何玲莫之婧刘青波陈莉朱华胡春萍李康智刘永明
关键词:基因表达胰岛素分泌
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