江苏省高校高新技术产业发展项目(BG2003311)
- 作品数：10 被引量：229H指数：8
- 相关作者：陆兆新别小妹吕凤霞沈娟黄现青更多>>
- 相关机构：南京农业大学更多>>
- 发文基金：江苏省高校高新技术产业发展项目更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程农业科学更多>>
- 淀粉液化芽孢杆菌抗菌脂肽发酵培养基及发酵条件的优化被引量：67
- 2008年
- 【目的】提高淀粉液化芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)发酵产脂肽类抗菌物质的产量。【方法】采用Plackett-Burman Design对影响B.amyloliquefaciens ES-2-4产脂肽类抗菌物质产量的13个因子进行筛选,在筛选结果的基础上,再运用Uniform Design(均匀设计)对关键因子的最佳水平范围进行研究,通过回归方程求解得到最高产量时各关键因子的最优组合。【结果】影响抗菌物质产量的关键因子为葡萄糖、L-谷氨酸钠、转速和温度;获得最佳产量时关键因子的最优组合为:葡萄糖(42g·L-1)、L-谷氨酸钠(14g·L-1)、温度(27℃)、转速(200r/min),在此条件下,产量从优化前的4.84g·L-1提高到了6.76g·L-1,增长了39.7%。【结论】B.amyloliquefaciens ES-2-4抗菌脂肽发酵培养基筛选与优化的过程中,采用Plackett-Burman Design和Uniform Design相结合的方法,效果显著,经济有效。
- 方传记陆兆新孙力军别小妹吕凤霞黄现青
- 关键词：发酵均匀设计
- N^+注入诱变芽孢杆菌选育高产抗菌物质菌株被引量：14
- 2006年
- 本研究通过N+注入芽孢杆菌选育高产抗菌物质菌株。注入N+的能量为25keV,剂量为50×2.6×1013、80×2.6×1013、100×2.6×1013、120×2.6×1013和150×2.6×1013N+/m2。结果表明最佳的注入剂量为50×2.6×1013N+/m2,选育出了1株高产菌株(Bacillus subtilisfmbJ224),其抗菌物质产量是出发菌株的1.96倍,经传代培养,其高产性能稳定。同时通过对该菌株的发酵特性研究,发现其产抗菌物质的模式为延滞合成型。
- 沈娟别小妹陆兆新吕凤霞朱筱玉
- 关键词：芽孢杆菌抗菌物质突变体
- 利用16S rDNA序列分析鉴定一株产抗菌物质的微生物菌株被引量：42
- 2006年
- 从桃子上分离纯化得到1株产抗菌物质的菌株,命名为fmb3菌,通过抑菌实验发现该菌对革兰氏阳性菌蜡样芽孢杆菌、革兰氏阴性菌大肠埃希菌和真菌扩展青霉等3种常见食品病原菌具有显著的抑菌效果。利用16SrDNA分析对该菌作了系统进化鉴定,首先提取fmb3菌基因组DNA,根据不同种属的细菌的16SrDNA序列两端的保守性设计通用引物,对fmb3菌16SrDNA片断进行PCR扩增,对扩增得到的目标片段测序,并且利用NCBIBLAST对测序结果进行比对,构建系统进化树进行分析,初步确定该菌属于枯草芽孢杆菌。
- 别小妹陆兆新房耀维曾泉吕凤霞袁勇军
- 关键词：抗菌物质枯草芽孢杆菌系统发育分析
- Bacillus subtilis fmbR抗菌物质的分离和鉴定被引量：28
- 2006年
- 【目的】对Bacillus subtilis fmbR产生的抗菌物质进行分离和鉴定研究,以确定抗菌物质的组成和结构。【方法】采用HPLC和TLC层析对Bacillus subtilis fmbR抗菌物质进行分离纯化,通过ESI-MS和MALDI-MS分析对抗菌物质的组成和结构进行初步鉴定。【结果】HPLC层析表明了Bacillus subtilis fmbR抗菌物质含有保留时间与surfactin相似的成分。TLC层析和原位酸解证明了Bacillus subtilis fmbR抗菌物质含有闭合肽键类的物质,其中之一为相对迁移率Rf与标样surfactin相近的组分。采用ESI-MS分析检测到Bacillus subtilis fmbR抗菌物质含有分子量与surfactinA相同的m/z1009.1、m/z1023.2和m/z1037.0等3种同系物;通过MALDI-MS分析获得[M+H]+为m/z 3403.95抗菌物质,该物质分子量与Bacillus subtilis 168产生的细菌素subtilosin的m/z3403.3相同。【结论】Bacillus subtilis fmbR抗菌物质由C13～C15的3种surfactinA同系物和一种羊毛硫抗生素subtilosin组成。
- 别小妹陆兆新吕凤霞赵海珍杨胜远孙力军
- 关键词：SUBTILIS抗菌物质
- Bacillussp.fmbJ224发酵产新型抗菌肽培养基的优化研究被引量：22
- 2005年
- 采用Plackett_Burman设计(Plackett_BurmanDesign,PB)法,对影响Bacillussp.fmbJ224产新型抗菌肽的17个因素进行了筛选。结果表明:影响该菌发酵产新型抗菌肽的主要培养基成分为葡萄糖、NH4NO3、谷氨酸、CaCl2、MnSO4。在此基础上,再采用响应曲面法(ResponseSurfaceMethodology,RSM)对其5个显著因子的最佳水平范围进行研究。通过对二次多项回归方程求解得知,在上述自变量分别为葡萄糖8·13g/L、NH4NO36·14g/L、谷氨酸4·2g/L、CaCl23·98mg/L、MnSO44·87mg/L时,新型抗菌肽的产量从1304·21μg/mL提高到了1487·58μg/mL。
- 沈娟陆兆新别小妹吕凤霞黄现青
- 关键词：BACILLUSPLACKETT-BURMAN设计
- Bacillus subtilis fmbJ脂肽类抗菌物质的分离和鉴定被引量：29
- 2006年
- 对BacillussubtilisfmbJ脂肽类抗菌物质的分离和鉴定进行了系统研究。通过HPLC层析确定BacillussubtilisfmbJ抗菌物质由多种组分构成,其中含有保留时间与surfactin相似的成分。通过TLC层析和原位酸解确定BacillussubtilisfmbJ抗菌物质含有两个具有闭合肽键类的物质,其中之一为迁移率Rf与标样surfactin非常相近的组分。通过ESI-MS分析检测到BacillussubtilisfmbJ抗菌物质含有分子量与fengicin相同的m/z1449.9、m/z1463.8、m/z1477.8、m/z1491.9和m/z1505.9五种同系物,和分子量与surfactin相同的m/z1008.8、m/z1022.8和m/z1036.8三种同系物。
- 别小妹吕凤霞陆兆新黄现青沈娟
- 关键词：BACILLUSSUBTILIS脂肽纯化
- 影响枯草芽孢杆菌fmbR菌株抗菌物质提取的主要因子被引量：23
- 2005年
- 应用P lackett-Burm an Design对枯草芽孢杆菌fmbR菌株抗菌物质提取的主要影响因子(甲醇、乙醇、丙醇、正丁醇、pH值和时间)进行了研究。JMP软件分析结果表明:影响抗菌物质提取的关键因素为乙醇(P<0.000 1)、正丁醇(P<0.000 1)、pH值(P=0.002 5)和时间(P=0.008 3)。在实验范围内,乙醇、正丁醇和时间对抗菌物质提取总量有显著正效应,pH值与抗菌物质提取总量呈显著负相关。抗菌物质提取总量最高预测值可达21.82 mg.100 mL-1,其概率为99.79%。
- 别小妹陆兆新
- 关键词：枯草芽孢杆菌抗菌物质
- Bacillus sp. fmbJ224发酵产新型抗菌肽发酵条件的优化研究被引量：5
- 2010年
- 采用响应面方法对Bacillussp.fmbJ224发酵产新型抗菌肽发酵条件进行了优化。首先采用Plackett-Burman设计(Plackett-Burman Design,PB)法,对影响Bacillus sp.fmbJ224产抗菌肽的6个发酵外部条件进行了筛选。结果表明:影响深层该菌发酵产抗菌肽的主要因子为温度、装液量、发酵时间。在此基础上,然后用Box-Boken设计及响应面分析法确定关键因子的最佳水平及交互作用。通过对二次多项回归方程求解得知,在上述自变量分别为温度33.08℃,装液量为71.93ml,发酵时间为43.45h时抗菌肽的含量提高了199.19μg/mL。
- 沈娟陆兆新别小妹吕凤霞
- 关键词：BACILLUS
- 枯草芽孢杆菌fmbR抗菌物质稳定性研究被引量：20
- 2006年
- 枯草芽孢杆菌fmbR能够产生抗菌物质,对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌具显著的抑菌效果。本文研究了该抗菌物质对温度、pH和三种蛋白酶(胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、胃蛋白酶)的稳定性。研究结果表明:抗菌物质在pH7.0下,在20～120℃的范围内,抑菌活性不发生变化;此外在室温下,pH处理在2.0～12.0范围内抗菌物质保持稳定,抑菌活性不受影响。结果还表明:抗菌物质对胃蛋白酶的作用表现出很高的稳定性,而胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶能够在一定条件下将抗菌物质降解。
- 别小妹吕凤霞陆兆新王冬立
- 关键词：抗菌物质温度PH蛋白酶稳定性
- 低能N^+离子注入选育抗菌脂肽高产菌及其发酵的研究被引量：6
- 2006年
- 采用了低能N+离子注入技术,以淀粉液化芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)ES-2为出发菌株,进行诱变选育抗菌脂肽高产菌株。研究了不同注入剂量对存活率和正突变率的影响,并获得一株抗菌脂肽高产菌,命名为淀粉液化芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens)ES-2-4。与原始菌株相比,脂肽含量提高了15.2%。此外,对突变株的发酵特性进行了初步研究。结果表明:突变株(B.amyloliquefaciens)ES-2-4的延滞期短,稳定期长,脂肽产量高,其发酵性能有利于脂肽的大规模生产。
- 方传记陆兆新孙力军吕凤霞别小妹
- 关键词：离子注入脂肽诱变选育发酵
