新疆生产建设兵团博士基金(2011BB009)
- 作品数：9 被引量：51H指数：4
- 相关作者：倪永清周红邓梅王俊钢顾燕玲更多>>
- 相关机构：石河子大学新疆农垦科学院中国科学院更多>>
- 发文基金：新疆生产建设兵团博士基金国家自然科学基金兵团青年科技创新资金专项更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程农业科学环境科学与工程生物学更多>>
- 新疆不同地域发酵乳品中Lactobacillus多样性的研究被引量：3
- 2016年
- 利用MRS,M17等5种不同培养基从12份采自新疆北部伊犁、博乐、塔城、阿勒泰地区牧民家庭传统方法制作的乳品中分离乳酸菌,并进行了生理生化表型特征鉴定。对这些乳酸菌进行16Sr RNA基因序列的测序,构建系统发育树,初步建立其属水平的进化地位,再利用乳杆菌种间特异性引物对其进行种水平的鉴定和分类。共分离164株疑似乳酸菌,大部分菌株对温度适应性较强。以杆菌为主,系统发育表明:样品中乳酸菌主要有7个属,其中Lactobacillus(78株)、Carrobacterium(3株)、Weissella(1株)、Lactococcus(22株)、Enterococcus(47株)、Streptococcus(8株)、Vagococcus(5株)。种特性扩增显示乳杆菌存在种水平的差异。主要有4个种。利用牛津杯从样品中筛选出了10株对大肠杆菌(Escherichia coli)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)均具有明显抑制作用的乳杆菌,为乳酸菌作为生物型防腐剂应用到食品工业中奠定基础。
- 倪亚雯兰国伟杨尚娇倪永清
- 关键词：乳杆菌多样性系统发育PCR
- 耐低温肠球菌Enterococcus sp.MB2-1产细菌素的生物学特性被引量：5
- 2013年
- 从新疆阿勒泰地区额尔齐斯河流域冷水鱼肠道筛选到一株产细菌素的菌株MB2-1，牛津杯法实验显示该菌株抑制革兰氏阳性菌李斯特氏菌（Listeria monocytogenes）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）以及革兰氏阴性菌大肠杆菌（Escherichia coli）的生长。通过形态学和16S rRNA基因序列同源性分析初步鉴定该菌株隶属于Enterococcus属。菌株Enterococcus sp. MB2-1的最适生长温度在24℃左右，属于耐冷菌。细菌素MB2-1对胃蛋白酶、胰蛋白酶及尿素敏感，过氧化氢酶、Triton X-100、SDS、吐温-80、NaCl和EDTA处理抑菌活性保持稳定，该细菌素具有良好的pH值稳定性（3.0～9.0）和热稳定性（100℃、60min），但在121℃、20min处理后抑菌活性消失。在菌株生长9h后发现抑菌活性，并且在生长稳定期检测到最高抑菌活性。
- 邓梅王俊钢高阳倪永清
- 关键词：肠球菌细菌素RRNA基因抑菌活性
- 新疆阿勒泰和温泉县冷水鱼肠道产低温蛋白酶菌株的筛选及其酶学性质的研究被引量：1
- 2013年
- [目的]从50株冷水鱼肠道产蛋白酶菌株中筛选优良产酶菌株,并研究其酶学性质,为高效低温蛋白酶技术的研发奠定基础。[方法]对比脱脂乳平板初筛结果确定供试菌株,对选定菌株进行表型及16S rRNA/26S rRNA序列同源性分析,确定产酶菌株的进化地位。用Folin酚显色法复筛,并研究最佳产酶菌株所产蛋白酶的酶学性质。[结果]从6株供试菌株中筛选出一株高产酶菌株P-D-10,初步鉴定隶属于Pseudomonas。酶学性质的初步研究显示,P-D-10产生的蛋白酶最适反应pH在8.5左右;在0～60℃均有催化活性;具有10和40℃2个最适酶活温度;热稳定性较差,在70℃水浴10 min后剩余酶活力仅为20.14%。除了Tween-80对该酶酶活力有促进作用外,其他金属离子、还原剂、表面活性剂和金属离子螯合剂对该酶酶活力均有不同程度的抑制作用。[结论]筛选获得的高产酶菌株P-D-10隶属于Pseudomonas,是一株具有研究与应用潜力的产低温蛋白酶菌株。
- 张建荣倪永清
- 关键词：冷水鱼肠道微生物低温蛋白酶酶学特征
- 新疆冷水鱼肠道中耐低温乳杆菌的分离筛选及其遗传差异分析被引量：1
- 2013年
- 乳杆菌能够维持肠道内正常菌群的平衡,而来源于动物肠道的乳杆菌更容易在肠道内生长繁殖,所以分离冷水鱼肠道内的低温乳杆菌具有重要的应用价值。利用MRS、M17、改良番茄和乳杆菌选择性琼脂培养基4种培养基,从6种不同的冷水鱼肠道以及粘膜中分离筛选出耐低温的乳杆菌20株。通过一些生理生化试验初步确定疑似乳杆菌菌株24株,并测定其最适生长温度,其中有7株为嗜冷菌,17株为耐冷菌。根据16Sr RNA基因序列构建系统发育树可知,20株菌隶属Lactobacillius spp.,其他4株分别隶属Clostridium spp.和Pseudomoncs spp.。
- 马媛王俊钢周红邓梅任士菊倪永清
- 新疆额尔齐斯河流域冷水鱼肠道耐低温乳酸菌的分离筛选及其遗传差异被引量：10
- 2013年
- 【目的】从新疆阿勒泰地区额尔齐斯河流域冷水鱼肠道中分离耐低温的乳酸菌,挖掘乳酸菌的物种和遗传多样性,为低温乳酸菌生物技术研发提供优良菌种。【方法】利用MRS、Elliker两种不同培养基从9种冷水鱼肠道中,分离筛选出耐低温菌,测定细菌最适生长温度并进行常规生理生化实验。根据16S rRNA基因序列初步确定耐低温菌的系统进化地位,并采用BOX、(GTG)5、ERIC三种不同的引物进行rep-PCR,对16S rRNA基因高度同源性的菌株进一步区分。【结果】分离得到78株耐冷菌,最终确定有24株为耐低温乳酸菌,菌株的最适生长温度在15-24℃之间。系统发育分析结果表明:24株耐低温乳酸菌隶属于6个属,其中肉杆菌属(Carnobacterium)3株,乳球菌属(Lactococcus)9株,肠球菌属(Enterococcus)7株,环丝菌属(Brochothrix)1株,魏斯氏菌属(Weissella)2株,链球菌属(Streptococcus)2株。指纹图谱聚类分析树状图显示乳球菌属(Lactococcus)和肠球菌属(Enterococcus)存在种及菌株水平上的遗传差异,前者包括4个种,后者2个种。【结论】新疆额尔齐斯河流域冷水鱼肠道中分离的耐低温乳酸菌以球菌为主,没分离到常见的乳杆菌,需进一步完善分离培养的方法,深入挖掘和研究其物种多样性和遗传多样性。
- 高阳王俊钢顾燕玲邓梅周红倪永清
- 冷水鱼肠道抑菌活性乳酸菌的筛选及其生理特性分析被引量：10
- 2014年
- 利用牛津杯法对分离自冷水鱼肠道的24株乳酸菌进行筛选,得到具有明显抑菌活性的乳酸菌9株,基于菌株的16S rDNA基因序列进行系统发育分析,6株属于Lactococcus属,3株属于Enterococcus属。对9株乳酸菌发酵上清液进行抑菌成分分析和蛋白质性质实验,结果表明,9株乳酸菌的发酵上清液经排除酸和过氧化氢干扰后,对李斯特菌仍具有不同程度的抑制作用;有机酸的产生对实验菌株MHY3-2和MD-2抑菌活性的干扰影响较大,而菌株MB2-1和MD-1受有机酸干扰影响较小,且经排除酸和过氧化氢后的乳酸菌对李斯特菌的抑菌效果最为显著;分析发酵上清液中抑菌物质的蛋白质性质,发现除菌株MB2-2和MD-1对胰蛋白酶表现不敏感外,其余实验菌株发酵上清液经胃蛋白酶和胰蛋白酶处理后均失去抑菌活性,结果表明,实验菌株的发酵上清液中的抑菌物质具有蛋白质的性质,抑菌组分中可能存在类细菌素或细菌素组分。此外,对9株乳酸菌的抗生素耐药性进行初步分析,结果显示,所有实验菌株对氨苄西林、万古霉素、红霉素、氯霉素、环丙沙星和诺氟沙星均表现敏感,为冷水鱼肠道乳酸菌资源的开发利用奠定基础。
- 任士菊王俊钢周红邓梅马媛倪永清
- 关键词：抑菌活性乳酸菌生理特性
- 天山一号冰川沉积层低温脂肪酶产生菌的筛选及初步鉴定被引量：1
- 2014年
- 从新疆天山一号冰川西支尾部的底部沉积层中分离筛选出高产低温脂肪酶菌株,进行初步鉴定及产酶探讨。使用罗丹明-B、吐温80、维多利亚蓝选择培养基以及三丁酸甘油酯酶活检测板,结合棕榈酸对硝基苯酯(p-NPP)比色法,筛选出产低温脂肪酶酶活较高的菌株,研究其生长特性及常规生理生化实验,并根据16S rRNA基因序列初步确定其所属菌属。共分离筛选到5株产低温脂肪酶酶活较高的菌株,经初步鉴定其中4株为假单胞菌属(Pseudomonas sp.),1株为芽孢杆菌属(Bacillus sp.)。该芽孢杆菌属产脂肪酶的能力略高于其余菌株。分离得到的5株菌均属于耐冷菌,有较好的耐盐性,能在低温条件下发酵产酶,其中4株在36h左右达到产酶高峰,为开发冰川环境下丰富的低温酶资源奠定了基础。
- 董娟倪永清杨瑞金赵伟梁秋艳冯英慧范宇婷
- 关键词：低温脂肪酶RRNA酶活力
- 天山一号冰川底部沉积层产蛋白酶耐低温菌株的筛选及其系统发育被引量：21
- 2013年
- 【目的】通过对天山一号冰川底部沉积层耐低温菌的分离和其中产蛋白酶菌株的筛选,了解冰川微生物生理多样性和系统发育多样性,为高效低温蛋白酶生物技术的研发奠定基础。【方法】采用稀浓度的R2A、TSB平板涂布分离可培养细菌,通过脱脂乳选择性培养基筛选产蛋白酶的耐低温菌株。对分离菌株表型特征、生理生化特性、最适生长温度、耐盐性、产酶性能进行了比较,结合16S rRNA基因序列同源性分析确定产蛋白酶菌株的多样性和系统进化地位,通过BOX-PCR指纹技术分析16S rRNA基因序列高相似度的近缘菌株的遗传差异。【结果】从125株分离物中筛选到27株产蛋白酶的耐低温菌株,其中21株为适冷菌,仅6株菌为专性嗜冷菌,革兰氏阴性菌居多,假单胞菌属(Pseudomonas)菌株占40.7%。产酶菌株隶属于5个系统发育类群、9个属,其中γ-Proteobacteria、Actinobacteria、CFB(Cytophaga-Flexibacter-Bacteroides)为优势类群。【结论】天山1号冰川底部沉积层冻土中产蛋白酶的耐低温细菌多样性较丰富,本研究筛选得到的同属近缘种群较多,其产酶性状存在差异,适合开展微生物种群的生物地理学研究。
- 倪永清顾燕玲史学伟郑晓吉韩亮周红程国栋
- 关键词：蛋白酶系统发育
- 新疆乳品中乳酸菌的多样性及耐药性分析被引量：2
- 2016年
- 从新疆北部地区采集的样品中分离出103株乳酸菌并进行生理生化表型鉴定,对这些乳酸菌进行16S rRNA基因序列测序,构建系统发育树发现分离的乳酸菌主要为5个属分别为乳杆菌属、肠球菌属、乳球菌属、魏斯式菌属、明串珠菌属。采用纸片扩散法(K-B)研究不同属中不同乳酸菌对8种常见抗生素的耐药性分析。耐药性研究表明,分别有6株对链霉素、新霉素有耐药性,5株对红霉素有耐药性,7株对卡那霉素有耐药性,8株全部对萘啶酸具有耐药性,4株对万古霉素、四环素具有耐药性,2株对头孢唑肟存在耐药性。
- 聂睿于洋倪永清
- 关键词：乳酸菌多样性耐药性
