天津市自然科学基金(05YFJMJC03900)
- 作品数：3 被引量：7H指数：1
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- 加亚嘉西科逆转录病毒研究进展
- 2009年
- 从加亚嘉西科逆转录病毒（JSRV）的基因组、JSRV的致瘤信号传导途径、JSRV与宿主共进化方面综述了JSRV的研究进展。JSRV引起的羊肺腺瘤（SPA）与人的细支气管肺泡癌（BAc）极相似，通过对SPA的研究，不仅为BAC早期诊断及预防该病提出新方法，而且为揭示BAC的分子发病机制及探索其基因治疗提供新思路。
- 杜文才朱泽张晶李咏梅李伟霞
- 关键词：绵羊肺腺瘤病进化
- HSV-1的microRNA-LAT基因修饰人骨髓间充质干细胞的体外研究被引量：1
- 2008年
- 人骨髓间充质干细胞(HMSCs)具有强大的多向分化潜能,能为组织移植和体外基因传递载体.单纯疱疹病毒1型(HSV-1)不仅具有嗜神经元性,而且对HMSCs也具有很强亲嗜性,可作为HMSCs的基因修饰载体,主要通过其自身携带的microRNA-LAT发挥抑制凋亡作用.本研究构建针对microRNA-LAT的特异性茎环结构的逆转录引物,并用特殊探针的real-time RT-PCR方法检测HMSCs细胞质中成熟microRNA-LAT的相对定量水平.采用顺铂诱导对照法观察HSV-1对HMSCs的作用.通过观察HMSCs细胞形态和流式细胞仪检测细胞凋亡率,评测HSV-1引起的HMSCs抗凋亡功能;同时采用RNAi方法,化学合成TGF-β信号传导通路中SMAD3及TGF-β1靶点的siRNA和microRNA-LAT siRNA.从基因mRNA,microRNA和蛋白质水平,分别采用RT-PCR,real-time RT-PCR和Western blotting方法,检测HMSCs中microRNA-LAT和SMAD3及TGF-β1表达水平及其相互关系.结果表明,与单纯顺铂诱导对照组相比,HSV-1组和microRNA-LAT组HMSCs凋亡细胞数减少,细胞凋亡率降低(P<0.05),具有抗凋亡作用;在TGF-β信号传导通路中,HSV-1组和microRNA-LAT组TGF-β1与SMAD3靶点基因在mRNA水平及蛋白水平的表达量均观察到一定程度降低,且降低水平与采用RNAi法的SMAD3组和TGF-β1组相类似.Real-time RT-PCR结果显示,与空白对照组相比,顺铂组HMSCs细胞质中成熟microRNA-LAT mRNA水平有所降低(P<0.05).据此,HSV-1及其microRNA-LAT可敲除SMAD3和TGF-β1基因,下调TGF-β信号传导通路表达而对顺铂诱导的HMSCs凋亡有拮抗作用.本研究结果证明,HSV-1自身携带的microRNA-LAT对HMSCs细胞TGF-β信号传导通路中的SMAD3和TGF-β1具有精细调节和基因修饰作用,使HMSCs具有抗凋亡功能,并且HSV-1可作为针对HMSCs的特殊基因修饰候选载体.
- 张晶李咏梅杜文才李光明李伟霞朱泽
- 关键词：人骨髓间充质干细胞单纯疱疹病毒基因调节抗凋亡
- 内源性与外源性加亚嘉西科逆转录病毒基因组序列分析被引量：6
- 2008年
- 目的:确定内蒙古JSRV-NM病毒株在逆转录病毒与宿主共进化史上的地位。方法:从我国内蒙古羊种绵羊肺腺瘤病羊肺组织标本中分离出exJSRV-NM株。PCR方法扩增出exJSRV-NM和enJSRV-NM株全长cDNA并进行全基因组测序。应用DNAstar软件对JSRV-NM基因组上的U3、ENV、GAG/POL核苷酸序列进行分析。结果:克隆的exJSRV-NM株和enJSRV-NM株全基因全长分别为7462bp和7430bp。序列分析表明,exJSRV-NM株序列与Gen-Bank上收录的南非代表株基因组和JSRV21核苷酸全序相比其同源性分别为93.3%和99.2%。enJSRV-NM株序列与GenBank上收录的enJS56A1相比其同源性为94.8%。结论:我国内蒙古羊种所携带的JSRV-NM在逆转录病毒与宿主共进化史上属于古老型。
- 杜文才李咏梅朱泽张晶李伟霞Mohd Zamri-Saad
- 关键词：逆转录病毒科基因绵羊
