广州市科技计划项目(2003J1-C0171)
- 作品数：3 被引量：17H指数：2
- 相关作者：王宏唐勇向军俭黄红亮靳英杰更多>>
- 相关机构：暨南大学解放军第458医院更多>>
- 发文基金：广州市科技计划项目国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组人源抗HBsAg Fab的糖基化分析被引量：3
- 2005年
- 目的:分析重组人源抗HBsAgFab的糖基化。方法:应用PAS糖染色法和经酶切糖苷酶H去糖基后,用MALDI-TOF-MS质谱仪对重组人源抗HBsAgFab的糖基化进行分析。结果:PAS染色法的结果显示,毕赤酵母(Pichiapastoris)表达的重组人源抗HBsAgFab呈淡红色。用质谱仪测定P.pastoris表达的经内切糖苷酶H去糖基后的重组人源抗HBsAgFab的相对分子质量(Mr),从50678.49降低到49245,相差1433.49(约相当于少了8个甘露糖基)。结论:P.pastoris表达的重组人源抗HBsAgFab,为一种具有生物活性的低糖基化的蛋白,为深入研究其性质及功能奠定了基础。
- 邓宁向军俭唐勇王宏粟宽源
- 关键词：HBSAGFAB糖基化毕赤酵母
- 人bFGF单克隆抗体的制备及MabF7对黑色素瘤B16的体外抗瘤效应被引量：12
- 2008年
- 目的:制备抗人碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)单克隆抗体,并探讨其体外对黑色素瘤细胞B16的抗肿瘤效应。方法:以rhbFGF免疫Balb/C小鼠,用杂交瘤技术制备单克隆抗体;间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞株,测定腹水型单抗的效价及其Ig亚类;用RT-PCR、细胞免疫组化和双抗体夹心等方法检测黑色素瘤B16细胞中bFGF的表达;用MTT法检测单抗MabF7对B16细胞的体外抑瘤效应;用流式细胞术及DNA琼脂糖电泳技术检测细胞凋亡。结果:共获得19株稳定分泌抗bFGF单抗的杂交瘤细胞株;ELISA效价>105;除MabF8、MabF9为IgG2a外,其余为IgG1;黑色素瘤细胞B16中有bFGFmRNA及其蛋白的表达,且可在细胞培养液中检测到bFGF;经蛋白A纯化的MabF7对B16细胞的抑制作用呈剂量及时间累计效应,抑制率为(39±4.12)%,P<0.01。流式细胞术结果显示,随抗体浓度增加及作用时间延长,肿瘤细胞在G1期前出现明显的亚二倍体期;DNA电泳结果显示,抗体作用后的细胞DNA呈明显的梯度条带。结论:MabF7具有体外抑制黑色素瘤B16细胞增殖作用,其机制与诱导细胞凋亡有关。
- 向军俭靳英杰黄红亮王宏杨红宇唐勇
- 关键词：成纤维细胞生长因子碱性抗体单克隆黑色素瘤
- 硫代bFGF寡核苷酸抑制HepG2和Hep2细胞的增殖被引量：2
- 2008年
- 目的探讨硫代修饰对bFGF寡核苷酸抑制HepG2和Hep2细胞增殖的影响。方法设计、合成bFGF寡核苷酸,聚乙烯亚胺(jetPEI)介导其转染入HepG2和Hep2细胞,荧光显微镜观察其在细胞中的定位,流式细胞仪分析转染效率,MTT法检测细胞增殖。结果bFGF反/正义硫代寡核苷酸被jetPEI介导高效转染入细胞内,主要位于细胞核。反/正义硫代寡核苷酸均呈剂量时间依赖地抑制细胞增殖,相同剂量时正硫代寡核苷酸的抑制效率高于反义硫代寡核苷酸。相应非修饰反义寡核苷酸较其互补正义链能更有效抑制两种细胞增殖。核苷酸突变明显降低反义硫代寡核苷酸对细胞抑制,并不影响正义硫代寡核苷酸的细胞抑制率。反义硫代寡核苷酸明显降低细胞中bFGF表达。结论硫代修饰bFGF反义寡核苷酸在细胞内特异性结合核酸以反义机制抑制肿瘤细胞增殖,正义寡核苷酸则因硫代修饰于细胞内以非核酸特异性机制抑制肿瘤细胞增殖。
- 黄红亮向军俭唐勇王宏邓宁靳英杰
- 关键词：BFGF
