国家自然科学基金(30901606)
- 作品数：13 被引量：42H指数：4
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- 丙戊酸钠协同顺铂对HO8910细胞杀伤作用机制研究
- 2011年
- 目的:探讨丙戊酸钠(VPA)协同顺铂(DDP)对人卵巢癌HO8910细胞的杀伤作用及机制。方法:以1μg/m l DDP联合3mmol/L VPA处理细胞,MTT法检测细胞生长抑制率;光镜下观察药物作用下各组细胞形态学的改变;流式细胞术检测细胞周期阻滞情况;RT-PCR法检测p53、p21 mRNA水平表达的改变;W estern blot法检测Ac-H3、p53、p21、Cyclin D1蛋白水平表达的改变。结果:(1)VPA能明显抑制HO8910细胞生长,且呈剂量和时间依赖性,VPA+DDP处理组抑制率高于DDP处理组,组间差异有统计学意义(P<0.05);(2)光镜下观察细胞形态,可见VPA处理组细胞体积缩小呈长梭型,胞膜皱缩,贴壁不良,VPA+DDP组改变更明显;(3)VPA阻滞卵巢癌HO8910细胞周期于G0/G1期,VPA+DDP组S期细胞明显减少;(4)VPA及VPA联合DDP均能够明显提高卵巢癌HO8910细胞组蛋白H3的乙酰化水平,上调p53、p21 mRNA及蛋白表达水平,降低CyclinD1蛋白的表达水平,组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:VPA能够协同DDP杀伤卵巢癌细胞HO8910;其作用机制可能与VPA提高组蛋白乙酰化水平,上调p53、p21基因表达和下调Cyclin D1表达,引发细胞周期阻滞有关。
- 张丽娜马杰曹振平李彩荣冯定庆赵卫东
- 关键词：卵巢肿瘤丙戊酸钠顺铂细胞周期
- 新生鼠卵巢中卵泡膜干细胞的分离培养及鉴定
- 2012年
- 目的分离、培养、鉴定小鼠卵巢组织中的卵泡膜干细胞。方法取2～4 d新生鼠卵巢组织,胶原酶、胰蛋白酶联合消化获得单个细胞悬液,GSM-K无血清培养基培养细胞观察细胞球形成;RT-PCR法检测膜基因Ptch1和透明带基因Zp1、Zp2、Zp3的表达,免疫荧光法检测干细胞标记物碱性磷酸酶(AKP)、Oct4、膜细胞标记物Gli3与颗粒细胞标记物FSHR的表达;体外诱导分化,RT-PCR法检测分化标记物Gli2,油红O染色后观察。结果 GSM-K中培养2 d形成细胞球;Ptch1、AKP、Oct4和Gli3表达阳性,不表达Zp1、Zp2、Zp3和FSHR;诱导分化后,Gli2表达,油红O染色阳性。结论新生鼠卵巢组织中存在卵泡膜干细胞,且具有分化潜能。
- 刘然冯定庆宣恒华凌斌
- 关键词：卵巢分化
- Piwil2基因表达诱导NIH3T3细胞恶性转化被引量：4
- 2013年
- 目的通过建立稳定表达外源Piwil2基因的NIH3T3细胞,初步探讨Piwil2基因对NIH3T3细胞生物学特性的调控作用。方法通过脂质体介导的方法和G418的筛选,建立稳定表达Piwil2基因的NIH3T3细胞株,之后利用细胞集落形成实验、细胞增殖实验、细胞周期分析和裸鼠成瘤实验,观察Piwil2基因表达对NIH3T3细胞的生物学特性的影响。结果建立了稳定过表达Piwil2基因的NIH3T3细胞株。与对照组空白载体细胞系相比,过表达Piwil2基因的NIH3T3细胞增殖和集落形成能力增强;细胞周期G0/G1期减少、S期明显升高;接种裸鼠后形成的肿瘤体积显著大于对照组。结论 Piwil2基因在NIH3T3细胞中稳定表达具有诱导正常NIH3T3细胞发生恶性转化的重要生物功能。
- 李跃波冯定庆凌斌程敏
- 关键词：基因表达3T3细胞
- piRNA与PIWI蛋白家族功能的研究进展
- 2013年
- 生物体中的RNA可以分为编码RNA和非编码RNA两大类,非编码RNA中存在许多小分子RNA,它们组成了细胞中的RNA调控网络。近年来在哺乳动物的睾丸内发现了一种新型的非编码小分子RNA-piRNA,这种小分子RNA与Argonaute家族中的PIWI蛋白成员相结合才能发挥调控作用。两者共同参与基因表达和调控、蛋白质翻译、配子发生等生物学过程,对生物的生长发育产生了深远的影响。该文对piRNA和PIWI蛋白的结构、特性以及相互作用进行综述。
- 李跃波冯定庆凌斌
- 关键词：小分子RNA
- 曲古菌素A联合全反式维甲酸对宫颈癌HeLa细胞株杀伤机制的研究被引量：1
- 2012年
- 目的探讨曲古菌素A(TSA)联合全反式维甲酸(ATRA)对宫颈癌HeLa细胞株的杀伤作用及其作用机制。方法 TSA联合ATRA或单独处理HeLa细胞,CellTiter 96AQueous法检测细胞增殖抑制情况;7-AAD荧光染色法观察细胞凋亡改变;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot法检测p21、p53、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达变化。结果 TSA联合ATRA对HeLa细胞具有明显的生长抑制作用,诱导细胞凋亡,出现核碎裂等典型凋亡改变,细胞凋亡率明显升高,与对照组和单独用药组比较,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,TSA联合ATRA组中p21、p53、活化性Caspase-3蛋白的表达显著升高(P<0.01),而Bcl-2蛋白表达显著下降(P<0.05)。结论 TSA联合ATRA在体外对HeLa细胞有明显的杀伤作用,推测其机制可能是上调p21、p53、活化性Caspase-3蛋白表达水平,下调Bcl-2蛋白表达水平有关。
- 周虎冯定庆桂云宣恒华丁玉兰赵卫东
- 关键词：曲古菌素A全反式维甲酸HELA细胞
- 组蛋白乙酰化修饰调控RAR-β2表达与宫颈病变的相关性被引量：3
- 2014年
- 目的：探讨组蛋白乙酰化修饰与RAR-β2表达及宫颈病变发生发展的关系。方法：收集正常宫颈、宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）Ⅱ-Ⅲ和宫颈鳞状细胞癌（squamous cell carcinoma，SCC）组织，分别采用免疫组织化学和WesternBlot方法检测AcH3、RAR—B：和Involucrin的表达；分析组蛋白乙酰化水平与RAR-β2表达及宫颈病变程度的关系。结果：随着宫颈病变的进展，AcH3、RAR-β2和Involucrin的表达逐渐降低，甚至缺失，组间差异有统计学意义（P〈0．05）；组蛋白乙酰化水平与RAR-β2表达呈正相关（r=0．797，P〈0．05），AcH3和RAR-β2的表达均与宫颈病变程度呈负相关[r=-0．5479（Ach3）,r=-0．585（RAR-β2），P〈0．05]。结论：组蛋白乙酰化修饰与RAR-β2表达调控有关，并可能参与宫颈癌的发生。
- 伍娇娇冯定庆田园徐汉杰李兵凌斌
- 关键词：宫颈上皮内瘤变宫颈鳞状细胞癌分化
- 体外成熟的卵母细胞胞质成熟的评价指标被引量：3
- 2012年
- 卵母细胞的体外成熟培养(in vitro maturation,IVM)是辅助生殖技术的重要过程之一。优质的IVM的卵母细胞必须是细胞核和细胞质同步成熟,以保证成功受精、胚胎正常发育乃至健康子代的出生。目前,细胞核成熟的评价标准已得到共识,而细胞质的成熟却表现复杂,尚缺乏有效的观察评价指标。近年来研究发现,卵母细胞成熟时其超微结构、一些信号分子和细胞因子均发生某些变化,这为评价细胞质成熟提供了依据。
- 宣恒华冯定庆赵卫东
- 关键词：卵母细胞体外成熟超微结构信号分子细胞因子
- 干细胞条件培养液对小鼠体外成熟卵母细胞发育潜能的影响
- 2014年
- 目的：探讨骨髓间充质干细胞（MSCs）条件培养液对小鼠体外成熟卵母细胞发育潜能的影响。方法：分离、培养小鼠MSCs,获得MSCs条件培养液;收集4~6周小鼠生发泡期（GV）卵母细胞,在MSCs条件培养液中体外成熟（IVM）;同时部分小鼠促排处理,收集体内成熟卵母细胞;体外受精（IVF）后,比较受精率、4-细胞形成率及囊胚形成率差异;Hoechst33342染色后观察内细胞团（ICM）和滋养层细胞形成情况,计数内细胞团数。结果：IVM卵母细胞IVF后的受精率、4-细胞形成率和囊胚形成率及囊胚内细胞总数与体内成熟组比较,无显著差异（P〉0.05）;IVM组各时期的胚胎形态正常,囊胚内细胞染色后的荧光图像与体内成熟组基本一致。结论：MSCs条件培养液能保持小鼠IVM卵母细胞良好的质量和发育潜能,是一种较理想的IVM培养体系。
- 宣恒华冯定庆赵卫东张玲洪名云何芳唐志霞严春聂丽娜
- 关键词：卵母细胞体外成熟体外受精胚胎
- 提高组织学与胚胎学教学效能的方法探索被引量：5
- 2012年
- 通过教学探索和实践,发现在组织学与胚胎学教学过程中紧密结合临床,增加实践机会,凸显课程的重要性和实用性,并注重教学艺术,可以激发学生的积极性和主动性,从而提高教学效能。
- 冯定庆陈晓蓉
- 关键词：组织学与胚胎学教学方法教学效能
- 间充质干细胞与肿瘤生物治疗
- 2011年
- 间充质干细胞（MSC）具有低的免疫原性和特异的组织趋向性，并且取材方便、体外扩增能力强，因而成为理想的工程细胞。修饰MSC使其表达特定的抗癌分子，或者将其作为靶向抗癌的一个载体成为近几年肿瘤生物治疗研究的热点。MSC在肿瘤生物治疗方面的应用显示着很大的潜力。
- 李彩荣凌斌
- 关键词：间充质干细胞趋化因子肿瘤生物疗法
