国家自然科学基金(30901629)
- 作品数：2 被引量：11H指数：2
- 相关作者：陶红芳方建林陈芾珩苏永忠李回军更多>>
- 相关机构：汕头大学医学院第一附属医院武汉大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小分子干扰技术缄默Survivin基因表达对Jurkat细胞凋亡和化疗敏感性的影响被引量：5
- 2012年
- 目的研究应用短发夹RNA(shRNA)技术缄默Survivin基因表达后对白血病细胞株Jurkat细胞凋亡及对化疗药物敏感性的影响。方法构建shRNA-Survivin重组质粒,电击转染至Jurkat细胞,G418筛选得到稳定表达重组质粒的细胞系,反转录(RT)-PCR检测转染细胞中Survivin mRNA表达水平变化,化疗药物长春新碱(VCR)及柔红霉素(DNR)分别作用各转染组细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定各组细胞的增殖抑制率,流式细胞术测定药物对各组细胞的凋亡效应。结果 DNA测序证实表达质粒构建成功,RT-PCR检测结果显示重组质粒能明显抑制Jurkat细胞Survivin mRNA表达,与对照组及阴性质粒转染组比较,差异均有统计学意义(Pa<0.05)。VCR及DNR作用转染细胞后,可有效抑制细胞增殖及诱导细胞凋亡,与对照组及阴性质粒转染组比较,差异均有统计学意义(Pa<0.05)。结论 Survivin基因对Jurkat细胞生长有重要作用,转染shRNA-Survivin表达质粒能有效抑制细胞Survivin mRNA表达,缄默Survivin基因表达的细胞对化疗药物的敏感性显著增高。
- 陶红芳徐之良江毅石清照夏利平陆军
- 关键词：短发夹RNA干扰急性淋巴细胞白血病化疗
- 紫杉醇下调死亡结构域沉默子表达促进白血病细胞凋亡新机制研究被引量：6
- 2014年
- 目的探讨紫杉醇诱导白血病细胞凋亡的信号途径及死亡结构域沉默子（SODD）分子靶向对紫杉醇化疗的增敏作用。方法采用Westernblot法检测紫杉醇对人急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞SODD、B细胞淋巴瘤／白血病-2基因（Bcl-2）、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶（Caspase-3）、核转录因子（NF—xB）-P65蛋白表达的影响；构建1个载体编码3条质粒表达载体的SODD小分子干扰质粒，转染至Jurkat细胞，采用碘化丙啶（PI）标记流式细胞术检测紫杉醇对细胞的凋亡诱导率。结果紫杉醇在诱导Jurkat白血病细胞凋亡过程中能显著下调SODD及Bcl-2蛋白的表达，在该凋亡过程中Caspase-3酶原逐渐被水解剪切并促进NF—xB活化表达；通过转染SODD小分子干扰质粒的Jurkat白血病细胞对紫杉醇的凋亡敏感性显著高于对照组，差异有统计学意义（F=10．35，P〈0．05）。结论紫杉醇可有效诱导白血病细胞凋亡，SODD／Bcl-2基因调控代表了一个独特的紫杉醇类诱导的细胞凋亡信号传导通路，这条通路最终通过激活Caspase-3执行，而NF—KB在这条通路中对相关凋亡基因起反应性调节作用。小分子干扰技术抑制白血病细胞SODD表达后能显著增加紫杉醇的化疗敏感性。
- 陶红芳方建林刘元生苏永忠陈芾珩李回军
- 关键词：紫杉醇分子靶向白血病
