四川省卫生厅科研基金(080197)
- 作品数：6 被引量：52H指数：3
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- 相关机构：泸州医学院附属医院荆州市中心医院广元市第一人民医院更多>>
- 发文基金：四川省卫生厅科研基金四川省重点科学建设项目更多>>
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- 肝纤维化相关细胞因子双重RNA干扰质粒的构建及转染肝星状细胞研究被引量：1
- 2012年
- 目的构建以大鼠CTGF和TIMP-1基因为靶点的双重RNA干扰表达载体质粒,以检测其转染肝星状细胞的效率。方法筛选出对CTGF和TIMP-1基因最有效的RNA干扰靶位,各设计1对含有短发夹结构的RNA干扰靶点序列,分别克隆到质粒载体psiRNA-DUO-GFPzeo,构建含目的靶基因片段的重组质粒载体psiRNA-GFP-CT-GF、psiRNA-GFP-TIMP-1和psiRNA-GFP-Com(含有CTGF和TIMP-1),进行酶切和测序鉴定。将构建成功的重组质粒psiRNA-GFP-CTGF、psiRNA-GFP-TIMP-1和psiRNA-GFP-Com转染大鼠肝星状细胞,在荧光显微镜下观察质粒转染情况,用流式细胞仪检测转染效率。结果酶切与测序结果提示重组质粒psiRNA-GFP-CTGF、psiR-NA-GFP-TIMP-1和psiRNA-GFP-Com成功构建;成功将重组质粒psiRNA-GFP-CTGF、psiRNA-GFP-TIMP-1和psiRNA-GFP-Com转染肝星状细胞,在24小时,空质粒组、CTGF组、TIMP-1组和CTGF+TIMP-1组转染效率分别为15±2%、13±1%、15±1%和14±2%,均低于质粒psiRNA-GFP-Com转染组(Com组,20±2%,P<0.05);在48小时,空质粒组、CTGF组、TIMP-1组和CTGF+TIMP-1组转染效率分别为10±2%、9±1%、8±2%和10±1%,均低于Com组的15±2%(P<0.05)。结论成功构建靶向大鼠CTGF和TIMP-1最有效的RNA干扰靶位的双重RNA干扰表达质粒,能转染至肝星状细胞,并且psiRNA-GFP-Com转染效率最高。
- 蒋玉凤周德江张建军黄飞史小玲
- 关键词：RNA干扰质粒载体结缔组织生长因子金属蛋白酶组织抑制因子-1肝星状细胞
- 乳果糖和益生菌治疗轻微型肝性脑病的对照研究被引量：15
- 2013年
- 目的探讨乳果糖和益生菌治疗轻微型肝性脑病(minimal hepatic encephalopathy,MHE)的疗效。方法患有MHE的肝硬化患者120例,按随机数字表法分为未治疗组(A组,仅接受肝硬化标准治疗)、乳果糖组(B组,每天2次30～60ml乳果糖)和益生菌组(C组,每天2次益生菌110亿菌落单位),共治疗1月,比较三组治疗效果、不良反应及血氨水平。结果 MHE改善情况:A组4例(10%)、B组13例(35%)、C组12例(30%),与A组比较,B、C组患者MHE显著改善(χ2=6.639,P=0.036),而B、C组间疗效差异无统计学意义(χ2=0.058,P=0.809)。A、B和C组分别有7、1、2例患者因显性肝性脑病住院,B、C组显性肝性脑病发生率显著低于A组(χ2=6.707,P=0.035)。A组的动脉血氨水平与B、C组比较差异有统计学意义(F=18.47,P=0.000),而B、C组间血氨差异无统计学意义(q=-1.627,P=0.111)。结论乳果糖、益生菌均能够显著改善肝硬化患者MHE的病情,并能预防显性肝性脑病的发生。
- 赵新华冯琦章静蒋玉凤
- 关键词：乳果糖益生菌轻微型肝性脑病
- 两种不同肝纤维化相关细胞因子shRNA重组质粒的构建被引量：2
- 2011年
- 目的构建以大鼠结缔组织生长因子(CTGF)和金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)基因为靶点的短发夹RNA(shRNA)表达质粒。方法根据前期筛选出的对CTGF和TIMP-1基因最有效的RNA干扰靶位,各设计一对有短发夹结构的RNA干扰(RNAi)靶点序列,退火形成双链DNA,克隆到质粒载体psiRNA-h7SKGFPzeo;构建重组质粒载体psiRNA-GFP-CTGF和psiRNA-GFP-TIMP-1,并进行酶切与测序鉴定。结果酶切与序列测定均提示重组质粒psiRNA-GFP-CTGF和psiRNA-GFP-TIMP-1构建成功。结论成功构建靶向大鼠CTGF和TIMP-1最有效的RNAi靶位的shRNA表达质粒,为进一步探索肝纤维化基因治疗的新途径打下了实验基础。
- 蒋玉凤刘加群张建军孙华丽黄飞
- 关键词：金属蛋白酶类RNA干扰质粒肝纤维化
- 腹腔镜下胆总管探查一期缝合治疗肝外胆管结石的安全性研究被引量：29
- 2015年
- 目的探究腹腔镜下胆总管探查(LCBDE)一期缝合治疗肝外胆管结石的安全性,总结该方法的临床经验。方法收集并回顾性分析该院2009年7月-2013年7月共178例患者行腹腔镜胆总管探查术的临床资料,比较胆总管探查术后一期缝合(缝合组)与T管引流(引流组)的安全性、可行性及适用范围。结果缝合组患者的手术时间、术后补液量、术后住院时间均低于引流组,差异具有显著性(P<0.05)。而术中出血量、引流管拔除时间、胃肠通气时间的差异无显著性(P>0.05)。两组患者的术后残余结石、复发结石和术后胆漏发生的差异无显著性(P>0.05)。结论腹腔镜胆总管取石术后一期缝合是安全、可行的。
- 周皓岚付英黄涛
- 关键词：腹腔镜胆结石一期缝合T管引流
- 现代医学对肝纤维化防治的研究进展被引量：2
- 2013年
- 各种致病因子作用于肝组织后,激活肝星状细胞,胶原分泌增多,细胞外基质的合成增多,以至胶原纤维出现大量沉积,最终发展为肝纤维化。近年来肝纤维化已成为国内外医学,生物学研究的热点之一,并取得了显著的成就,大量临床研究表明肝纤维化在一定程度上是可以逆转的。本文就肝纤维化的基因治疗、干细胞治疗及传统药物防治的研究进展进行了综述。
- 李娜蒋玉凤张建军
- 关键词：肝纤维化基因治疗干细胞治疗
- 结缔组织生长因子和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1shRNA表达质粒对肝星状细胞细胞因子表达及细胞外基质分泌的影响被引量：3
- 2012年
- 目的研究结缔组织生长因子（CTGF）和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）的短发夹RNA（shRNA）表达质粒分别及共转染肝星状细胞（Hsc）对CTGF、TIMP-1、I型前胶原（PCI）mRNA表达及细胞外基质（ECM）分泌的影响。方法筛选并成功构建靶向大鼠CTGF和T1MP-1有效RNA干扰靶位的shRNA表达质粒，分别及共转染转化生长因子B1刺激活化的大鼠HSC-T6细胞，荧光定量PCR检测各组细胞中CTGF、TIMP-1、PCImRNA的表达；放射免疫法分析细胞上清液中Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、透明质酸（HA）和层黏连蛋白（LN）的含量。组间比较采取方差分析；多组间两两比较采用SNK-q检验。结果CTGFshRNA转染和双质粒共转染HSC-T6的CTGFmRNA相对表达量分别为0．59±0．03、0．62±0．01，与空白对照组、CTGFshRNA转染组的1和1．00±0．07比较，CTGFmRNA表达量均明显下降，F=66．515，P值均〈0．05，差异有统计学意义；而TIMP-1shRNA组和双质粒共转染组的TIMP-1mRNA相对表达量分别为0．66±0．04、0．68±0．03，与空白对照组、CTGFshRNA转染组的1和1．05±0．03比较，TIMP-1mRNA表达量均明显下降，F=83．835，P值均〈0．05，差异有统计学意义;CTGF shRNA转染、TIMP-1shRNA转染和共转染组的PCImRNA相对表达量分别为0．55±0．02、0．57±0．02和0．41±0．01与空白对照组的1比较，PCI mRNA表达量均明显下降，F=709．905，P值均〈0．05，差异有统计学意义,双质粒联合转染对CTGF、TIMP-1、PCI的mRNA表达量抑制作用优于单质粒转染。CTGFshRNA转染、CTGFshRNA转染和双质粒共转染组的PCⅢ含量分别为（78．02±6．50）ng／ml、（79．03±5．47）ng／ml、（53．91±4．01）ng／ml，与空白对照组的（113．79±15．88）比较，PCⅢ含量均明显下降，P值均〈0．05，差异有统计学意义；CTGFshRNA转染、CTGFshRNA转染和双质粒共转染组的HA含量分别为（127．36±8．33）ng／ml、（116．55�
- 蒋玉凤孙华丽张建军黄飞刘加群
- 关键词：短发夹RNA结缔组织生长因子
