国家自然科学基金(39770335)
- 作品数：15 被引量：46H指数：4
- 相关作者：陈幸华张曦彭贤贵刘林孔佩艳更多>>
- 相关机构：第三军医大学新桥医院中国人民解放军南京军区军事医学研究所解放军324医院更多>>
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- 人淋巴细胞白血病细胞黏附介导耐药模型构建初探被引量：1
- 2006年
- 目的构建白血病细胞黏附介导耐药(celladhesionmediateddrugresistance,CAM-DR)模型,从一新的角度研究白血病细胞耐药机制。方法采用人淋巴细胞白血病Jurkat细胞株与经60Co射线照射后的白血病骨髓基质细胞贴壁层共培养构建CAM-DR模型,应用扫描电镜从形态及结构对该模型进行鉴定;MTT法测定柔红霉素(daunorubicin,DNR)在Jurkat细胞中的IC50及运用流式细胞仪检测DNR在Jurkat细胞内的储积浓度及分布;AnnexinⅤ-FITC/PI双参数法流式细胞仪定量Jurkat细胞凋亡率。结果Jurkat细胞与骨髓基质细胞共培养24h,即观察到Jurkat细胞通过伪足黏附于骨髓基质细胞层,部分Jurkat细胞通过伪足龛于骨髓基质细胞融合所形成的“网眼”中,培养48h时可见部分Jurkat细胞移行到骨髓基质细胞层下,包裹于骨髓基质细胞层内,并可见Jurkat细胞呈巢状龛于骨髓基质细胞“网眼”中。该模型未影响DNR在Jurkat细胞中的蓄积及分布,但显著抑制了DNR诱导Jurkat细胞的凋亡及Jurkat细胞对DNR的反应性。结论成功构建了CAM-DR模型,从一新的角度为进一步研究白血病细胞耐药机制奠定了基础。
- 陈幸华张诚张曦高蕾王吉刚孔佩艳彭贤贵李忠俊
- 关键词：耐药共培养
- 新型白血病骨髓基质细胞黏附介导耐药模型构建的探索性研究被引量：4
- 2007年
- 目的以急性淋巴细胞白血病(ALL)患者骨髓基质细胞(BMSC)构建白血病细胞黏附介导耐药(CAM-DR)模型,从一新的角度探讨 CAM-DR 在白血病细胞耐药中的作用。方法采用人淋巴细胞白血病 Jurkat 细胞株与经^(60)Co 射线照射后的 ALL 骨髓基质细胞贴壁层共培养构建 CAM-DR模型,应用扫描电镜从形态及结构对该模型进行鉴定;四甲基偶氮唑盐比色法(MTF 法)和流式细胞仪分别测定柔红霉素(DNR)对 Jurkat 细胞的细胞毒作用、DNR 在 Jurkat 细胞中的储积浓度及分布。结果扫描电镜结果显示 CAM-DR 模型中 Jurkat 细胞通过伪足黏附于骨髓基质细胞层,或移行到骨髓基质细胞层下,并可见 Jurkat 细胞呈巢状龛于骨髓基质细胞"网眼"中。流式细胞结果显示该模型并末影响 DNR 在 Jurkat 细胞中的蓄积及药物的分布,但显著抑制了 Jurkat 细胞对 DNR 的反应性。结论成功构建了以白血病 BMSC 为基础的 CAM-DR 模型,为进一步研究白血病细胞耐药机制奠定了理论和实验基础。
- 陈幸华高蕾张曦王吉刚张诚彭贤贵李忠俊曾东风刘耀司英健
- 关键词：白血病骨髓基质细胞多药耐药细胞黏附
- VCAM-1修饰人脐血基质细胞扩增移植重建造血微环境功能的研究被引量：3
- 2002年
- 陈幸华张曦刘林孔佩艳彭贤贵
- 关键词：人脐血基质细胞造血微环境造血功能重建
- 外周血干细胞移植患者骨髓基质细胞形态学改变的观察被引量：4
- 2004年
- 目的 :进一步探讨外周血干细胞移植后患者骨髓造血微环境损伤的机理。方法 :采用光镜、扫描电镜和透射电镜观察外周血干细胞移植患者在单纯化疗或放化疗结合预处理前后骨髓基质细胞的形态变化。结果 :①光镜和扫描电镜 :与预处理前骨髓基质细胞相比 ,单化组和放化组出现不同特征的形态学变化 ;②透射电镜观察 :放化组骨髓基质细胞的内质网扩张 ,线粒体基质变淡 ,嵴消失 ;单化组基质细胞的线粒体重度退行性变 ,结构紊乱。结论
- 张曦王苹陈幸华彭贤贵刘林孔佩艳刘红张怡王庆余
- 关键词：外周血干细胞移植骨髓基质细胞形态学
- 外周血干细胞移植患者骨髓基质细胞粘附功能的变化被引量：11
- 2003年
- 目的 :探讨骨髓基质细胞在外周血干细胞移植 (PBSCT)预处理前后粘附功能的改变。 方法 :采用细胞粘附试验和细胞粘附阻断试验 ,观察 2 1例PBSCT患者经单用化疗 (单化 )或放疗、化疗 (放、化 )两种预处理方案后不同时相点骨髓基质细胞贴壁层对骨髓单个核细胞粘附能力的影响。 结果 :基质细胞贴壁层对骨髓单个核细胞的粘附能力 ,放、化预处理后第 30、90天显著低于移植前 (P <0 .0 1 ) ;单化预处理后第 30天显著低于移植前 (P <0 .0 5～ 0 .0 1 )。 结论 :PBSCT患者术前预处理后骨髓基质细胞粘附功能均有不同程度的降低 ,单化组的损伤较轻 ,放、化组损伤较重。预处理对骨髓微环境基质细胞粘附功能的损伤可能是影响移植后造血和免疫功能重建的重要因素之一。
- 张曦陈幸华刘林彭贤贵孔佩艳刘红张怡高蕾钟永明王庆余
- 关键词：骨髓基质细胞细胞粘附外周血干细胞移植预处理
- 白血病骨髓基质抑制化疗药物诱导的白血病细胞凋亡被引量：1
- 2005年
- 目的探索骨髓基质细胞增强白血病细胞抗凋亡、抗药特性的可能机制。方法应用Percoll分离骨髓单个核细胞体外培养骨髓基质细胞模拟骨髓微环境功能,与白血病细胞株Jurkat细胞体外共培养。0.5μmol/LDNR处理Jurkat细胞诱导凋亡,应用AnnexinV/PI双标法流式细胞仪检测白血病细胞凋亡率。PI染色流式细胞仪检测细胞周期分布。结果0.1～2.0μmol/L浓度范围DNR作用一定时间后,Jurkat细胞发生的凋亡率随药物浓度的增加与作用时间的延长而升高。共培养后骨髓基质细胞抑制药物诱导的白血病细胞凋亡,与单独悬浮培养组比较白血病细胞凋亡率有显著降低(8.39±4.08)%比(16.02±1.00)%,P<0.05。白血病骨髓基质对白血病细胞的屏蔽效应强于正常骨髓基质细胞(白血病细胞凋亡率分别是(5.73±1.78)%比(8.39±4.08)%,P<0.05。DNR处理共培养组Jurkat细胞G0/G1期比例高于悬浮培养DNR处理组,而正常与白血病骨髓基质细胞屏蔽的白血病细胞G0/G1期阻滞现象无显著性差异(47.96±5.88)%比(39.25±3.04)%,P>0.05。结论一定浓度的DNR在体外可诱导Jurkat细胞凋亡。骨髓基质细胞抑制化疗药物诱导的白血病细胞凋亡,提示骨髓微环境在骨髓白血病细胞获得耐药、抗凋亡特性以及残留白血病形成过程中起着重要促进作用。
- 李忠俊陈幸华刘林滕本秀张曦孔佩艳王吉刚彭贤贵杨镇洲
- 关键词：白血病骨髓基质细胞凋亡骨髓微环境
- 急性白血病骨髓基质细胞对HL-60细胞增殖、分化的影响被引量：12
- 2003年
- 目的 为探讨急性白血病骨髓基质对HL 6 0细胞的影响。方法 骨髓基质与白血病细胞共培养 ,采用MTT检测基质对白血病细胞的粘附 ,流式细胞仪检测粘附的HL 6 0细胞周期 ,非特异性酯酶及过氧化物酶染色观察白血病细胞分化及绘制白血病细胞生长曲线。结果 白血病骨髓基质对HL 6 0细胞的粘附率及粘附的白血病细胞处于G0 /G1期比例均明显高于正常骨髓基质 ;正常骨髓基质对HL 6 0细胞的生长抑制作用及诱导分化作用均明显强于白血病基质。结论 急性白血病骨髓基质对HL 6 0细胞的增殖、分化作用均存在异常。
- 付相建王苹彭贤贵张曦孔佩艳刘林刘红王庆余陈幸华
- 关键词：白血病急性骨髓基质细胞分化增殖
- 急性白血病骨髓基质对残留白血病形成作用的实验研究被引量：1
- 2002年
- 陈幸华张曦刘林孔佩艳付相建彭贤贵
- 关键词：急性白血病骨髓基质残留白血病
- 造血微环境异常与白血病研究进展被引量：16
- 2002年
- 陈幸华张曦刘林孔佩艳
- 关键词：白血病骨髓基质
- 白血病骨髓基质细胞黏附对DNR在Jurkat细胞内蓄积及分布的影响
- 2005年
- 目的初步探讨细胞黏附介导耐药模型中DNR在Jurkat细胞内的蓄积浓度及分布特征。方法分离、培养骨髓基质细胞,Jurkat细胞与60Co照射的基质细胞层黏附培养,构建细胞黏附介导耐药模型,0.5μmol/L DNR作用24h,FITC-AnnexinV/PI标记后流式细胞仪定量Jurkat细胞的凋亡率及DNR在Jurkat细胞内蓄积浓度,荧光显微镜观察其荧光信号在Jurkat细胞内的分布。结果白血病基质细胞黏附组、正常基质细胞黏附组Jurkat细胞凋亡率分别为(6.05±0.54)%、(8.48±0.86)%,与悬浮对照组(25.74±6.15)%比较均相差非常显著(P<0.01),且白血病基质细胞组与正常基质细胞组间相差显著(P<0.05)。基质细胞黏附并未降低Jurkat细胞内DNR的蓄积浓度,其红色荧光信号在Jurkat细胞内仍呈均匀、弥漫性分布。结论白血病骨髓基质细胞黏附能介导Jurkat细胞耐药,但其耐药机制可能独立于药物泵出增多致细胞内药物蓄积浓度降低这一经典耐药机制。
- 王吉刚陈幸华李忠俊彭贤贵孔佩艳刘林刘红杨镇洲
- 关键词：骨髓基质细胞多药耐药
