陕西省自然科学基金(2001SM24)
- 作品数：6 被引量：93H指数：5
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- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 基因枪介导小麦遗传转化的几个重要影响因素的研究被引量：8
- 2004年
- 用基因枪将携带gus-bar双标记基因的质粒pDB1及携带RC24几丁质酶基因的质粒pARN6、pBAB3、pYAO24(pYAO24还带有npt 选择标记基因)以pARN6+pDB1、pBAB3+pDB1及pYAO24三种组合方式转入8个小麦品种的未成熟胚盾片组织,经选择培养获得转基因植株。对基因枪介导小麦遗传转化的主要影响因素,如基因型、材料、金粒制备和轰击参数进行分析,发现西农88是理想的转基因受体基因型,开花两周后的小麦幼胚为理想的轰击材料,制备子弹时合适的金粒含量为30～50μg/次,充分混匀金粒悬浮液可以减少幼胚损伤和提高转化频率。GUS染色发现以蔗糖为渗透剂所产生的蓝色斑点比以甘露醇为渗透剂所产生的蓝色斑点大。针对载体上的npt 筛选标记基因,150mg/L的硫酸卡那霉素为较理想的选择剂浓度;针对载体上的bar筛选标记基因,PPT的浓度为2mg/L易出现假阳性植株,因此应将浓度增加到3～5mg/L。
- 黄萱徐子勤郝建国李晶
- 关键词：小麦影响因素
- 猕猴桃高频直接再生体系的建立(英文)被引量：10
- 2007年
- 为了建立猕猴桃高频再生体系,以MS为基本培养基,猕猴桃(Actinidia deliciosaQinmei)茎及叶片为外植体,研究了2,4-D、6-BA和NAA在美味猕猴桃愈伤组织形成及分化过程中的作用。方差分析结果表明,6-BA能够显著促进愈伤组织形成,6-BA和NAA可以显著促进愈伤组织形成和分化,而2,4-D抑制愈伤组织形成。附加2.0 mg/L 6-BA、1.0 mg/L NAA和600 mg/L水解酪蛋白的MS培养基是茎段培养的最佳培养基,在该培养基上,以再生的无菌苗为起始材料,一个月时叶圆盘的直接再生频率达到100%,平均每个叶圆盘产生9.33个芽,其中23.21%芽高度超过0.5 cm。
- 田娜徐子勤何近刚
- 关键词：高频美味猕猴桃
- 几种匍匐翦股颖成熟胚愈伤组织诱导及植株再生被引量：8
- 2006年
- 利用成熟种子作为外植体,分析了2,4-D对匍匐翦股颖胚性愈伤组织诱导与植株再生体系的影响,并对体细胞胚的发生过程进行了观察.实验结果表明,在2.0 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L 6-BA时胚性愈伤组织的诱导频率最高.随着2,4-D浓度的增加,愈伤组织的诱导和分化能力明显下降.在再生过程中采用1.0 mg/L的6-BA达到了比较好的效果,愈伤组织的再生频率大部分在90%以上.同时发现适当提高肌醇浓度可以使苗长得较为粗壮.在实验中发现匍匐翦股颖的体细胞胚发生过程为球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚.
- 曾泉徐子勤
- 关键词：匍匐翦股颖愈伤组织2,4-D6-BA体细胞胚
- 小麦NBS-LRR类抗病基因同源序列的分离与鉴定被引量：16
- 2006年
- 根据已知植物抗病基因的保守区域设计引物,从抗锈病小麦品种西农88基因组DNA扩增出3条与植物抗病基因同源的序列,分别为WRGA1、WRGA2和WRGA14。这三条同源片段均含有典型的NBS-LRR类抗病基因所拥有的保守性结构域Kinase-2a、Kinase-3a和疏水结构域(HD)．它们与部分已知NBS-LRR类抗病基因的氨基酸序列同源性为46．0%-9．9%,三个片段间在氨基酸水平上的同源性为80．7%-56．8%。Northern杂交表明WRGA1在小麦中受水杨酸正调控,属诱导型表达。
- 黄萱徐子勤陈立余王健
- 关键词：小麦抗病基因同源序列水杨酸
- 一种优化的植物总DNA提取方法被引量：47
- 2004年
- 根据自己提取植物基因组DNA的实际经验,改进了Clark利用CTAB提取植物基因组DNA的方法.在试验过程中发现,通过在研磨材料时加入液氮、用剪去端部的吸头转移含有DNA的溶液,并且将加入RNaseA消化RNA的步骤改在最后进行等一系列改进,可以获得高质量的DNA.本文同时就主要提取步骤进行了分析.
- 黄萱高丽美张永彦徐子勤
- 关键词：植物总DNA
- 高羊茅高频再生体系的建立被引量：4
- 2007年
- 目的建立高频再生体系,为相关基因的转化提供良好的受体系统。方法以高羊茅(Fes-tuca.arundinacea)成熟种子为外植体,以MS为基本培养基,进行高羊茅胚性愈伤组织诱导、继代、分化及生根培养。结果初生愈伤组织在MS+2,4-D5 mg/L+CH400 mg/L+蔗糖60 g/L+琼脂12 g/L的继代培养基诱导出体细胞胚后,在含6-BA2.0 mg/L+NAA0.5 mg/L的MS培养基上分化形成丛生苗,分化率达78.9%;再生苗在1/2 MS+NAA0.5 mg/L生根培养基上生根,生根率达100%。结论MS+2,4-D 9 mg/L为最佳愈伤组织诱导培养基,MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5mg/L为最佳分化培养基,1/2 MS+NAA0.5 mg/L为最佳生根培养基。
- 王健徐子勤张永彦高丽美黄萱
- 关键词：高羊茅愈伤组织诱导分化高频再生体系
