国家高技术研究发展计划(2006AA02Z138)
- 作品数：9 被引量：118H指数：3
- 相关作者：陈国平胡宗利王万能赵志平侯晓姝更多>>
- 相关机构：重庆大学重庆理工大学重庆工学院更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- Rhodobacter sphaeroides和Rhodovulum sulidophilum LHII的α和β亚基的交叉作用关系被引量：1
- 2009年
- 类球红细菌(Rhodobacter sphaeroides)和嗜硫小红卵菌(Rhodovulum sulidophilum)为不同属的两种光合细菌,前者的捕光系统Ⅱ由pucB、pucA基因编码产生的β亚基和α亚基组装形成,后者的捕光系统Ⅱ由pucsB、pucsA基因编码产生的β亚基和α亚基组装形成.将这两组基因交叉组合,克隆到包含puc启动子的表达载体中,得到两个表达质粒即pRKpucsBpucA和pRKpucBpucsA,然后通过接合转移方法分别转入LHI、LHII和RC缺陷型菌株DD13中,两种接合转移菌株都可以形成捕光系统Ⅱ并进入光合细菌膜系统.
- 陈国平李尽哲胡宗利王万能潘宇
- 蜂毒肽融合蛋白在裂殖酵母中的表达研究
- 将抗菌肽之一的蜂毒溶血肽(Melittin)基因序列定向克隆到表达载体pESP-2中,构建GST-Melittin融合蛋白。利用载体上严格受硫胺素浓度调控的启动子Pnmtl,实现融合蛋白在裂殖酵母Schizosaccha...
- 胡宗利刘志昭邓磊潘宇陈国平
- 关键词：蜂毒肽裂殖酵母蛋白表达
- 文献传递
- 紫色光合细菌捕获太阳能的分子机理被引量：5
- 2011年
- 光合作用是地球上最重要的化学反应,生物体通过它捕获太阳能,转为化学能供生长繁殖需要.光合细菌是地球上最早出现的具有原始光能合成体系的微生物,其光合反应中心是一个由多种色素分子与蛋白质以非共价键方式结合的、具有特定构象的色素-蛋白复合体-光反应中心RC(Reaction center)和LH(Light Harvesting),光能通过电荷分离及电子转移反应转化为化学能,其效率是当前人工模拟远远不能及的.本文综述了紫色光合细菌捕获太阳能的分子结构、作用机理的研究进展,并结合作者在R.sphaeroides LHII蛋白组份同源及异源基因表达方面的研究结果进行相应的分析,明确了Rhodobacter sphaeroides基因组中同源基因puc2BA的表达特点和功能,Rhodovulum sulfidophilum pucsBA与R.sphaeroides pufBA能够同时在R.sphaeroides中表达,能同时形成LHII和LHI,并具有能量传递功能.
- 王万能陈国平胡宗利李尽哲何帅
- 关键词：太阳能分子机理
- 细胞膜中的功能筏及膜穴系统
- 2011年
- 细胞膜具有重要的生理功能,功能筏及膜穴系统是细胞膜的功能结构单元,是进一步研究细胞膜结构和功能的基础。光合细菌胞质内膜与功能筏及膜穴系统在结构和功能上高度一致,可以认为光合细菌胞质内膜是研究细胞膜功能筏及膜穴系统的较好模型。
- 王万能陈国平胡宗利
- 关键词：细胞膜光合细菌
- 植物花青素代谢途径分析及调控模型建立被引量：71
- 2008年
- 介绍了植物花青素的合成、修饰、转运及汇集过程,从转录水平和转录后水平分析了花青素途径分子调控机制,概述了外部因素对花青素积累的影响,并在此基础上提出了一个新的花青素途径调控机制模型。
- 张宁胡宗利陈绪清侯晓姝李勇陈国平
- 关键词：花青素代谢途径
- 抗菌肽的抗菌机制及其临床应用被引量：34
- 2009年
- 抗菌肽是广泛存在于生物体内的一种小分子肽,具有广谱性、高效性、稳定性等特点,其本身不易产生耐药性。不仅具有杀菌作用,还能抑杀真菌、寄生虫、病毒以及肿瘤细胞且对正常细胞毒性较小。新颖抗生素发现的缺乏,导致了大量耐药菌株的出现,抗菌肽有可能成为一种新的抗生素替代品。本文介绍了抗菌肽的结构特点、生物活性,并重点阐述了其抗菌机制及最新临床应用进展。
- 侯晓姝胡宗利陈国平李勇王炳琴李栀恩
- 关键词：抗菌肽抗菌机制
- 趋化因子RANTES在毕赤酵母中的表达、纯化与鉴定
- 2008年
- 背景:RANTES是典型的趋化性细胞因子,参与很多炎症反应以及器官移植免疫排斥反应。从天然组织中分离RANTES数量有限,难以满足对其生物学功能研究和临床应用的需要;运用基因工程方法生产RANTES具有一定的应用价值。目的:观察人体趋化因子RANTES基因在毕赤酵母体系中的分泌表达,获得重组RANTES蛋白。设计、时间及地点:基因水平的实验观察,于2006-07/2007-10在重庆大学生物工程学院313实验室完成。材料:新鲜人外周血取自志愿者,用以分析人体RANTES基因序列设计引物;质粒pPIC9K、毕赤酵母菌珠Pichia Pastoris GS115均由重庆大学生物工程学院313实验室保存。方法:将人体趋化因子RANTES基因插入含AOX1启动子和α分泌信号肽序列的酵母表达载体pPIC9K中,用SalⅠ将重组质粒线性化,电击转化毕赤酵母GS115感受态细胞,筛选阳性整合子进行甲醇诱导表达。主要观察指标:趋化因子RANTES在毕赤酵母中的表达、纯化与鉴定结果。结果:人体趋化因子RANTES在酵母培养基BMGY中实现了分泌表达,表达产物经SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳及Western blot鉴定为重组RANTES蛋白。结论:在毕赤酵母真核系统中实现了人体趋化因子RANTES的分泌表达,为RANTES蛋白进一步的结构和功能研究打下了基础。
- 邓晓洁胡宗利张宁赵志平陈国平
- 关键词：RANTES毕赤酵母分泌基因表达
- 蜂毒肽融合蛋白在裂殖酵母中的表达研究被引量：3
- 2010年
- 将抗菌肽之一的蜂毒溶血肽(Melittin)基因序列定向克隆到表达载体pESP-2中,构建GST-Melittin融合蛋白。利用载体上严格受硫胺素浓度调控的启动子Pnmtl,采用先扩大培养后诱导表达的两步培养法,实现了融合蛋白在裂殖酵母Schizosaccharomyces Pombe中的异源表达。然后通过GST亲和层析法一步纯化得到融合肽。研究中1L培养液收集到约5g鲜活酵母菌,纯化得到400μg融合蛋白,融合蛋白经SDS-PAGE和Western blot验证,表明蜂毒肽融合蛋白已在裂殖酵母中高效的表达,并可以通过GST亲和层析法得到有效纯化。初步的活性实验证明所获得Melittin蛋白对Escherichia Coli DH5α菌种有良好的抑菌效果。
- 胡宗利刘志昭邓磊潘宇陈国平
- 关键词：蜂毒肽裂殖酵母蛋白表达
- 紫细菌光合机构及光合作用基因的表达调控被引量：3
- 2008年
- 紫细菌是研究细菌光合作用的重要生物。介绍了紫细菌光合机构捕光色素蛋白复合体Ⅰ(light-harvesting I)、捕光色素蛋白复合体Ⅱ(light-harvesting II)和光化学反应中心(reaction center)的结构,并探讨了其光合作用基因的转录调控机制,重点阐述了PpsR/AppA系统对紫细菌光合作用基因的转录调控。
- 赵志平胡宗利梁岩陈国平
- 关键词：紫细菌光合机构转录
- 番茄红素的新型生产途径研究被引量：2
- 2008年
- 研究利用PCR技术扩增出Erwinia herbicola的crtI基因,并连接到含强启动子Puc的表达载体pRKR5上构建表达质粒pRKR5-crtI,通过接合转移的方式将其导入光合细菌Rhodobacter sphaeroides突变株TC72中,调控氧浓度诱导工程菌累积红色色素,经HPLC和吸收光谱分析,工程菌中合成的色素为番茄红素,工程菌的生物量(干重)为2.36 g/L,番茄红素含量可达1.52 mg/g,与其他生产番茄红素的工程菌如大肠杆菌和产朊假丝酵母相比,番茄红素产量有一定程度的提高。
- 薛姣胡宗利陈国平赵志平陈绪清
- 关键词：番茄红素ERWINIARHODOBACTERSPHAEROIDES异源表达
