广东省科研条件建设项目(1021010200004)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：唐华刘薇顾为望袁进肖东更多>>
- 相关机构：南方医科大学更多>>
- 发文基金：广东省科研条件建设项目国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 3种腺相关病毒介导的绿色荧光蛋白对西藏小型猪胚胎成纤维细胞的转染效率被引量：1
- 2012年
- 目的比较3种不同血清型腺相关病毒(AAV)介导的绿色荧光蛋白对西藏小型猪胚胎成纤维细胞的转染效率。方法原代分离培养西藏小型猪胚胎成纤维细胞并进行形态学鉴定,按照感染复数(MOI)为103、104、105转染传代两次的猪胚胎成纤维细胞,流式细胞学检测不同血清型AAV对西藏小型猪胚胎成纤维细胞的转染效率,并在倒置显微镜下观察转染后绿色荧光的表达强度;同时,应用MTT方法检测不同血清型AAV对西藏小型猪胚胎成纤维细胞的毒性。结果腺相关病毒AAV2-EGFP对PFF的转染效率随MOI值的增加而增高,MOI为103、104、105时,转染效率分别为(33.68±1.18)%、(50.80±2.59)%和(60.08±1.08)%,而其他两种血清型病毒感染效率均低于AAV2-EGFP。3种病毒转染PFF过程中,细胞生长正常,MTT显示各个转染组与对照组(未转染组)在D570处吸光度无显著差异。结论AAV2血清型载体对体外培养的猪胚胎成纤维细胞的感染效率显著高于其他几种血清型,AAV8和AAV9对PFF感染能力极差,筛选AAV2作为西藏小型猪基因打靶的最适病毒载体;同时,3类血清型病毒载体对猪胚胎成纤维细胞均无明显细胞毒性。
- 黄威毛莹莹刘薇唐华揭飞龙李红卫顾为望
- 关键词：腺相关病毒西藏小型猪胚胎成纤维细胞绿色荧光蛋白流式细胞技术
- 三种腺相关病毒介导的绿色荧光蛋白对西藏小型猪胚胎成纤维细胞转染效率的比较研究
- 目的 比较三种不同血清型腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)介导的绿色荧光蛋白对西藏小型猪胚胎成纤维细胞(Porcine fetal fibroblast,PFF)的转染效率.方法 原代分离...
- 黄威毛莹莹刘薇唐华揭飞龙李红卫顾为望
- 关键词：腺相关病毒绿色荧光蛋白流式细胞技术
- 西藏小型猪肋软骨细胞的分离培养及鉴定被引量：2
- 2013年
- 目的分离培养西藏小型猪肋软骨细胞,并对其进行鉴定。方法实验采用3日龄西藏小型猪,二步消化法分离培养西藏小型猪肋软骨细胞(PCCs),同样的方法分离培养小鼠的肋软骨细胞(MCCs),观察两个物种软骨细胞的形态,并分别以西藏小型猪胚胎成纤维细胞(PEFs)和小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)为阴性对照,对所分离培养的软骨细胞进行甲苯胺蓝染色鉴定以及胶原蛋白Ⅱ、蛋白聚糖的免疫荧光鉴定。结果成功分离培养西藏小型猪和小鼠肋软骨细胞,两种细胞的形态有差别,所分离培养的两个物种的软骨细胞均呈甲苯胺蓝染色阳性,胶原蛋白Ⅱ、蛋白聚糖免疫荧光阳性。结论成功建立了西藏小型猪肋软骨细胞分离培养及鉴定的方法。
- 刘薇史俊文岳敏张婷婷唐华袁进肖东顾为望
- 关键词：西藏小型猪软骨细胞甲苯胺蓝蛋白聚糖
- 西藏小型猪骨髓间充质干细胞(BMSCs)分离培养及慢病毒载体介导EGFP标记MSCs
- 目的 建立一种简便、有效的西藏小型猪骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem ceils,BMSCs)体外分离培养及纯化方法,并基于BMSCs建立慢病毒介导的外源基因EGFP体外投递系统...
- 唐华顾为望毕文浩艾威李德胜潘光辉史俊文刘薇黄威肖东
- 关键词：西藏小型猪骨髓间充质干细胞慢病毒增强型绿色荧光蛋白
