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国家重点基础研究发展计划(2006CB101706): 作品数：19 被引量：310H指数：5; 相关作者：刘进元万建民江玲翟虎渠徐玉凤更多>>; 相关机构：清华大学南京农业大学中国农业科学院作物科学研究所更多>>; 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：生物学农业科学理学更多>>

水稻3型金属硫蛋白基因的分离和表达研究被引量：2: 2009年; [目的]对从水稻幼苗中分离的2个3型金属硫蛋白基因OsMT-I-3a和OsMT-I-3b的结构进行了分析,并对其表达模式进行了检测。[方法]利用Blast搜索水稻数据库,设计引物并利用RT-PCR的方法克隆OsMT-I-3基因cDNA全长。通过多重比对等方法对其基因和蛋白结构进行了分析。利用Northern杂交对这两个基因的组织表达模式和环境应答模式进行了检测。[结果]OsMT-I-3a和OsMT-I-3b分别编码62和65个氨基酸的多肽,具有典型的3型金属硫蛋白的半胱氨酸分布模式。OsMT-I-3a基因在叶片中没有检测到表达,OsMT-I-3b在叶片中高表达,且各种非生物胁迫因素会影响两种基因的表达模式。[结论]Ⅰ类3型2个水稻MT基因可能参与水稻多种环境胁迫的信号通路,在水稻抗非生物胁迫过程中起作用。; 徐玉凤李一勤刘进元; 关键词：水稻金属硫蛋白基因非生物胁迫

水稻新型MT基因的鉴定及其基因家族分子特征分析被引量：2: 2009年; [目的]探讨水稻MT基因家族各成员在基因结构上的差异及相互间的进化关系。[方法]从经重金属处理的水稻幼苗中分离到3个新的植物MT,对其进行RT-PCR和Northern杂交分析以及水稻和拟南芥MT基因家族的序列比对和进化分析。[结果]RT-PCR和Northern杂交分析表明,水稻中3个MT基因的表达均受重金属的诱导,在幼苗根部进行特异性表达。由水稻和拟南芥MT基因家族的序列比对提出植物MT的新分类方式。水稻I类OsMT基因家族的所有10个成员,定位到6条染色体上。同一类型的OsMT有高度的氨基酸序列保守性,相似的Cys排列方式。新发现的3个OsMT家族在单子叶植物水稻中独有,属4型MT。[结论]水稻和拟南芥MT基因家族进化分析显示,植物MT至少发生在种子植物出现前,而4型MT可能发生于单子叶植物和双子叶植物分离后。; 徐玉凤李一勤刘进元; 关键词：金属硫蛋白水稻 NORTHERN杂交基因表达

Urea-induced Inactivation and Unfolding of Recombinant Phospholipid Hydroperoxide Glutathione Peroxidase from Oryza sativa: 2007年; Phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase is an antioxidant enzyme that has the highest capability of reducing membrane-bound hydroperoxy lipids as compared to free organic and inorganic hydroperoxides amongst the glutathione peroxidases.In this study,urea-induced effects on the inactivation and unfolding of a recombinant phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase(PHGPx)from Oryza sativa were investigated by means of circular dichroism and fluorescence spectroscopy.With the increase of urea concentration,the residual activity of OsPHGPx decreases correspondingly.When the urea concentration is above 5.0 mol/L,there was no residual activity.In addition,the observed changes in intrinsic tryptophan fluorescence,the binding of the hydrophobic fluorescence probe ANS,and the far UV CD describe a common dependence on the concentration of urea suggesting that the conformational features of the native OsPHGPx are lost in a highly cooperative single transition.The unfolding process comprises of three zones:the native base-line zone between 0 and 2.5 mol/L urea,the transition zone between 2.5 and 5.5 mol/L urea,and the denatured base-line zone above 5.5 mol/L urea.The transition zone has a midpoint at about 4.0 mol/L urea.; WANG FengZHOU Hui-pingKONG Bao-huaFAN Jing-huaCHEN Hai-ruLIU Jin-yuan; 关键词：荧光性构象转换

多选择标记植物表达载体的构建被引量：2: 2011年; 具有多选择标记的植物基因表达载体有利于转基因植物研究中的转基因植株的筛选。本研究对植物基因表达载体pCAMBIA1301进行了改造,产生了1个具有可溶性的红移绿色荧光蛋白基因(smRS-GFP)、抗除草剂Basta、葡萄糖苷酸酶(GUS)及潮霉素(Hpt)的多选择标记的新的植物基因表达载体。运用这一表达载体的多选择标记可以有效降低检测和筛选转化植株时的假阳性率。此外,如此的基因表达载体也能满足实验室的不同筛选方法的需求。; 李春艳吴三民赵建宇樊宪伟李有志; 关键词：植物表达载体

水稻种子脂氧合酶基因OsLOX1的原核表达、纯化及鉴定被引量：19: 2008年; 脂氧合酶是动植物体内催化脂质降解的关键酶,也是茉莉酸合成途径的第一个关键酶。以先前克隆到的水稻种子脂氧合酶基因OsLOX1全长cDNA为模板,用含有特异酶切位点的P1、P2为引物,通过PCR方法将它构建到大肠杆菌表达载体pET30a(+)上并转化到大肠杆菌菌株BL21(DE3)中,获得相应的重组工程菌。经过20℃条件下的IPTG诱导,OsLOX1重组蛋白在BL21(DE3)菌株中得到表达,经生化特性分析,发现该重组蛋白具有LOX催化活性,其最适pH和温度分别为4.8和30℃。该重组子可进一步应用于体外生产茉莉酸和研究植物种子LOX结构与功能的关系。; 汪仁沈文飚江玲刘玲珑翟虎渠万建民; 关键词：水稻种子脂氧合酶原核表达纯化

Isolation and initial characterization of GW5, a major QTL associated with rice grain width and weight被引量：249: 2008年; 谷物重量是庄稼谷物产量的一个主要决定因素并且被自然地发生的量的特点 loci (QTL ) 控制。我们更早识别了控制米饭谷物宽度和重量的主要 QTL， GW5，它在米饭染色体 5 上被印射到一个再结合热点。获得 GW5 怎么控制米饭谷物宽度的更好的理解，我们进行了这个地点的好印射并且揭开在米饭栽培变种 Asominori 与增加的谷物宽度联系的 1 212-bp 删除，与苗条谷物米饭 IR24 比较。另外， 46 米饭栽培变种的 genotyping 分析表明这删除高度与谷物宽度显型被相关，建议 GW5 删除可能在米饭驯服期间被选择了。GW5 编码对原子核局部性的 144 氨基酸的新奇原子蛋白质。而且，我们证明 GW5 身体上在酵母与 polyubiquitin 交往二混血儿的试金。一起，我们的结果建议 GW5 代表主要 QTL 内在的米饭宽度和重量，并且它多半在 ubiquitin-proteasome 小径行动在种子开发期间调整房间分割。这研究提供新奇卓见进控制米饭谷物开发的分子的机制并且建议 GW5 能为庄稼的产量很高的繁殖用作一个潜在的工具。; Jianfeng WengSuhai GuXiangyuan WanHe GaoTao GuoNing SuCailin LeiXin ZhangZhijun ChengXiuping GuoJiulin WangLing JiangHuqu ZhaiJianmin Wan; 关键词：GW5 QTL

水稻谷胱甘肽磷脂氢过氧化物酶的热稳定性研究: 2007年; 谷胱甘肽磷脂氢过氧化物酶是唯一能够直接还原生物膜上脂类过氧化物的过氧化物酶。利用圆二色光谱(CD)、内源荧光光谱和差示扫描量热仪(DSC)研究了温度对谷胱甘肽磷脂氢过氧化物酶(OsPHGPx)活性及其构象变化的影响。在温度为20～27.5℃期间,随着温度的逐渐升高,OsPHGPx的活性逐渐上升,到27.5℃时达到最大值;在27.5～45℃时,随着温度逐渐升高,其活性迅速下降;当温度超过45℃时,其活性完全丧失。在20～40℃,CD光谱、内源荧光光谱和DSC均没有发生明显变化,暗示OsPHGPx的结构基本保持完整;在40～55℃,CD光谱显示该酶二级结构发生去折叠;内源荧光光谱的变化暗示该酶三级结构发生去折叠。其中在40～45℃,DSC显示该酶可能存在两个去折叠中间体。当温度超过55℃时,整个酶的构象不再发生变化,呈现去折叠状态。; 王丰周惠萍孔宝华范静华陈海如刘进元; 关键词：谷胱甘肽磷脂氢过氧化物酶荧光光谱 CD光谱差示扫描量热法

水稻脂氧合酶-3基因启动子的特性分析被引量：4: 2008年; 从栽培水稻品种越光中克隆了水稻脂氧合酶-3基因(Lox-3)的启动子,长度为1343bp,其序列与日本晴对应的序列完全相同。生物信息学分析表明,该启动子序列中包含受信号诱导的元件(G-box)、温度响应元件(CCGAAA)和水分胁迫响应元件(CACATG)等顺式作用元件;进一步构建了Lox-3基因启动子与gus和gfp基因的融合表达载体并获得转基因植株,发现报告基因在转基因植株的根、茎、叶、花药、种胚及种皮中均有表达,在萌发种子的胚和胚芽中也有表达,但在胚乳中不表达。此外,经ABA、NaCl及人工陈化处理后对报告基因的表达进行了定量分析,发现这些非生物胁迫可能通过诱导启动子顺式元件致使报告基因表达活性增强。; 刘南南张文伟江玲沈文飚翟虎渠万建民; 关键词：启动子水稻转基因植株逆境胁迫

水稻磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶在蛋白质水平上的组织和诱导表达特征(英文)被引量：5: 2009年; 蛋白质是生命活动的主要承担分子,了解蛋白质在有机体中的时空分布对于正确解析蛋白质的功能十分重要.磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(PHGPx)是目前发现的唯一能够直接还原膜上脂类过氧化物的抗氧化酶,在保护生物膜免受过氧化损伤方面有着重要作用.采用Westernblot技术,分析了水稻PHGPx(OsPHGPx)在水稻不同组织以及多种胁迫条件下的蛋白质表达特征.结果表明,OsPHGPx在成熟水稻植株内主要分布于叶组织中,以旗叶中含量最高,而在水稻幼苗中则在茎及叶组织中均检测到较强的杂交信号.OsPHGPx在幼苗中的表达受到H2O2和NaCl的强烈诱导,但植物激素对其表达的影响较弱.H2O2和NaCl的诱导效果呈现出时间及剂量的相关性,当用0.5mmol/LH2O2处理12h或用500mmol/LNaCl处理24h,此时OsPHGPx表达量达到最大值.对H2O2清除剂二甲基硫脲处理的水稻幼苗,外源H2O2的再处理并不能诱导OsPHGPx的表达,而NaCl的诱导效果并不受影响,说明H2O2可能并不介导NaCl诱导OsPHGPx的表达.这些结果为进一步研究OsPHGPx在水稻中生物学功能奠定了基础.; 李甜杨晓东刘进元; 关键词：水稻蛋白质表达谱氧化胁迫盐胁迫

盐芥—新型耐盐模式植物及其研究进展被引量：1: 2010年; 盐芥(Thellungiella halophila)是新型的耐盐模式植物,研究其基因功能对植物耐盐机理的研究有很大意义。介绍了盐芥适宜作为新型耐盐模式植物的形态及分子生物学特征,并简述了其目前在生理生化和分子生物学方面所进行的试验及取得的成果,对其前景进行了展望。; 王莹任大明; 关键词：模式植物耐盐机理

国家重点基础研究发展计划(2006CB101706)

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