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FHL2与IGFBP-7存在直接相互作用: 2005年; 目的:利用酵母双杂交技术筛选FHL2的相互作用蛋白,为进一步研究FHL2的功能奠定基础。方法:从卵巢文库中钓取FHL2cDNA,构建诱饵蛋白载体pAS2-1-FHL2,利用酵母双杂交筛选技术,在卵巢文库中筛选与FHL2相互作用的蛋白。将含有pACT2-候选基因的酵母菌与含有pAS2-1-FHL2的酵母菌进行交配实验,利用LacZ报告基因检测FHL2与候选蛋白之间是否存在相互作用。将FHL2和候选蛋白分别构建到pGEX-KG和pET-28a上,并纯化GST-FHL2和His-候选蛋白融合蛋白,利用GST沉淀实验进一步验证FHL2和候选蛋白的体外相互作用。结果:所获取的候选蛋白为IGFBP-7,是胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBPs)家族中的一员。交配实验表明,IGFBP-7与FHL2能特异性地相互作用,而不与空载体或BRCT1对照相互作用。GST沉淀实验进一步验证,IGFBP-7能与FHL2结合,而不与GST结合。结论:FHL2和IGFBP-7在体内及体外均可发生特异性的相互作用。; 丁丽华焦园园刘雨飞方言周蕾王晓辉黄翠芬叶棋浓; 关键词：FHL2 相互作用酵母双杂交

转录因子XBP1的融合表达、纯化及多克隆抗体的制备被引量：8: 2004年; 人X盒结合蛋白 1(XBP 1)为一种转录因子 ,与多种肿瘤的发生、发展有密切关系 .XBP 1有2种剪切形式 ,即XBP 1S和XBP 1U .将这 2种剪切形式中的一段相同编码序列 (编码 82～ 14 7位氨基酸 )重组于谷胱甘肽S转移酶 (GST)融合蛋白表达载体pGEX KG中 ,构建成重组质粒pGST XBP 1(82～ 14 7位氨基酸 ) .将该重组质粒转化E .coliDH5α后 ,表达GST XBP 1(82～ 14 7位氨基酸 )融合蛋白 ,经谷胱甘肽 Sepharose 4B亲和层析获得纯化的融合蛋白 .用此融合蛋白免疫家兔制备多克隆抗体 .利用制备的抗体分别用Western印迹和免疫细胞化学检测XBP 1的 2种剪切形式在哺乳动物细胞中的表达 .结果表明 ,该抗体对XBP 1的 2种剪切形式均具有反应原性 ,效价高 ,特异性好 ,可以用于进一步研究XBP; 刘雨飞丁丽华郝春芳方言赵福弟黄翠芬杨晓叶棋浓; 关键词：多克隆抗体

乳腺癌易感基因BRCA1研究进展被引量：3: 2004年; BRCA1是目前所发现的最重要的乳腺癌易感基因之一,它在DNA损伤修复,细胞周期调节,基因的转录激活,染色质稳定性,细胞增殖等方面都起着重要作用。该文着重介绍近几年来BRCA1基础研究方面的进展,并讨论BRCA1在肿瘤发生、发展过程的作用。为BRCA1在临床上的应用提供理论依据。; 严景华叶棋浓黄翠芬; 关键词：BRCA1 DNA损伤修复细胞周期调节

CCN蛋白家族研究进展被引量：7: 2005年; CCN蛋白家族包含多个成员,它们结构相似,富含半胱氨酸.作为分泌蛋白,CCN蛋白能够促进细胞生长、细胞粘附细胞迁移;诱导细胞凋亡;并调控肿瘤生长、血管发生和软骨内骨化.由于CCN蛋白在癌症和其它疾病预测或/和诊断中的重要性成为近几年研究的热点.本文将简述近几年在CCN蛋白领域的研究进展.; 焦园园杨桂文安利国叶棋浓; 关键词：肿瘤凋亡

BRCA1对FHL2转录激活功能的影响被引量：1: 2004年; 目的 :进一步了解乳癌易感基因BRCA1与FHL2相互作用对FHL2转录激活功能的影响 ,为揭示BRCA1在肿瘤发生发展中的作用提供依据。方法 :将BRCA1C端缺失突变体BRCA1(△ 14 4 3～ 186 3aa)和BRCA1(△ 90 8～ 186 3aa)按正确读框插入到pCR3载体中 ,并在 2 93T细胞中表达。利用GAL4荧光素酶报告基因检测野生型BRCA1以及肿瘤易感突变体BRCA1(P174 9R) ,BRCA1(Y185 3insA) ,BRCA1(△ 14 4 3～ 186 3aa)和BRCA1(△ 90 8～ 186 3aa)对FHL2转录激活活性的调节作用。结果 :野生型BRCA1能增强FHL2转录激活活性 ,且具有剂量依赖性。而 4种肿瘤易感突变体增强FHL2转录激活活性的能力明显减弱。结论 :BRCA1与FHL2相互作用可能对基因转录调节以及肿瘤发生、发展中起着重要作用。; 严景华叶棋浓方言朱建华吕秋军黄翠芬; 关键词：FHL2 突变转录激活乳腺肿瘤

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国家自然科学基金(30370738)