湖南省自然科学基金(02JJY2027)
- 作品数：5 被引量：24H指数：4
- 相关作者：刘映霞胡国龄谭德明何淑雅刘敏更多>>
- 相关机构：南华大学中南大学更多>>
- 发文基金：湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重型乙型肝炎外周血单核细胞基因表达谱研究被引量：9
- 2003年
- 目的 应用基因芯片技术建立慢性重型乙型肝炎外周血单核细胞基因表达谱。 方法 应用含8192条人体cDNA的微阵列芯片和来自外周血单核细胞的标记cDNA,分析了10例慢性重型乙型肝炎和10例无症状HBsAg携带者(ASC)基因表达谱。通过应用GenePix 4000B扫描仪和ImaGene3.0分析软件比较Cy5标记的慢性重型肝炎来源cDNA与cy3标记的ASC来源cDNA的杂交结果,获得个体基因的相对表达比值。 结果 在8192个基因中,初筛出249个(3％)表达差异达2倍以上的基因,其中主要是细胞信号和传递,细胞周期和代谢,凋亡及炎症相关类基因(占79％)。 结论 这些结果提示了乙型肝炎病毒感染机体致慢性重型肝炎过程中,全面改变了宿主细胞内基因表达,并为进一步对这些差异表达基因的功能研究提供了一个框架。
- 刘映霞胡国龄谭德明何淑雅刘双虎
- 关键词：重型乙型肝炎外周血单核细胞基因表达谱
- 人NKG2D基因重组质粒的构建及鉴定
- 2003年
- 目的 构建人NKG2D重组质粒。方法 应用RT -PCR ,自健康人外周血单个核细胞 (PB MC)中获取NKG2DcDNA ,克隆于pMD1 8-T载体中 ,并经酶切和测序鉴定。结果 重组载体中插入片段序列与GeneBank登录的cDNA序列一致。结论 成功地构建了重组载体pMD1 8T -NKG2D ,为研究NKG2D的生物学活性奠定了基础。
- 刘映霞胡国龄刘敏何淑雅龚环宇
- 关键词：NKG2D基因克隆外周血单个核细胞
- 慢性乙型肝炎免疫细胞NKG2D表达在肝病重型化中的作用被引量：4
- 2006年
- 目的分析乙型肝炎免疫细胞NKG2D表达与肝病重型化的关系。方法应用免疫荧光技术和流式细胞术(FCM)分选20例慢性重型乙肝(FHB)、10例无症状表面抗原携带者(ASC)、10例健康对照的外周血NK细胞,并定量分析NKG2D表达。应用免疫组化SP法分析20例慢性乙肝(CHB)(轻度8例,其中G1级6例,G2级2例;中度7例,重度5例,其中G3级9例,G4级3例)、11例FHB肝组织内细胞毒细胞NKG2D的表达差异。结果经FACS可获得高纯度、高活性的NK细胞。FHB患者NK细胞的NKG2D蛋白表达量高于ASC和正常对照组,差异有显著性(P<0.01)。免疫组化结果显示,FHB组肝脏免疫细胞NKG2D蛋白表达量分别高于CHB(G3、G4)组、CHB(G1、G2)组和正常对照组,差异有显著性(P<0.01)。CHB(G3、G4)组高于正常对照组(P<0.01),但CHB(G1、G2)组分别与CHB(G3、G4)组和正常对照组比较,差异无显著性(P>0.05)。结论乙型肝炎外周血NK细胞和肝组织内细胞毒细胞NKG2D过度表达与重型肝炎发生相关。
- 刘映霞张鑫刘敏胡国龄谭德明
- 关键词：重型肝炎NK细胞NKG2D
- 肝细胞癌NKG2D表达及对NK细胞细胞毒的影响被引量：10
- 2004年
- 【目的】分析肝细胞癌NKG2D表达及对NK细胞细胞毒的影响。【方法】应用免疫荧光技术和流式细胞术 (FCM )分选 2 5例肝细胞癌 (HCC)、10例健康对照的外周血NK细胞 ,定量分析NKG2D蛋白表达。用MTT比色法检测抗NKG2DpAb加入前后NK细胞的细胞毒效应。【结果】HCC患者NK细胞的NKG2D蛋白表达量均低于正常对照 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。抗NKG2DpAb能显著抑制NK细胞对K5 6 2、HepG2细胞的细胞毒效应 ,使NK细胞对两种靶细胞的细胞毒效应分别下降了 6 .7和 4 .1倍。【结论】NK细胞NKG2D表达异常与肝细胞癌的发生发展可能相关。
- 杨林刘映霞
- 人NKG2D真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的瞬时表达被引量：4
- 2003年
- 目的 :构建人NKG2D重组真核表达载体 ,并研究其在COS 7细胞中的表达。方法 :应用RT PCR ,自健康人外周血单个核细胞 (PBMC)中获取NKG2DcDNA ,应用基因重组技术构建含目的基因的T载体克隆后 ,构建含目的基因的真核细胞表达质粒 ,并经酶切和测序证实。然后应用脂质体介导将重组真核表达质粒转染COS 7细胞 ,用RT PCR和流式细胞术 (FCM)检测转染细胞NKG2D表达。结果 :重组真核表达载体中插入片段序列与GeneBank登录的cDNA序列一致。NKG2D在COS 7细胞中获得表达。结论 :成功地构建了重组表达载体pcD NA3.1 NKG2D ,并实现了在COS 7细胞中的瞬时表达 ,为研究NKG2D的生物学活性奠定了基础。
- 刘映霞胡国龄刘敏谭德明沙新平何淑雅
- 关键词：基因克隆COS-7细胞基因表达
