江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目(2012-WSN-082)
- 作品数：12 被引量：11H指数：2
- 相关作者：徐开林赵恺赵冬梅尹玲玲潘彬更多>>
- 相关机构：徐州医学院附属医院徐州医学院徐州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- ^60Co全身致死剂量照射对小鼠T细胞亚群分布及其IFN-γ和IL-17表达水平的影响被引量：2
- 2014年
- 目的 探讨致死剂量全身照射（TBI）对小鼠T淋巴细胞亚群分布及其细胞因子表达水平的影响.方法 将小鼠随机分为TBI组和未照射对照组.于致死剂量^60Co照射后第7天分离小鼠骨髓、肠系膜淋巴结、脾脏及肝脏的淋巴细胞,用流式细胞术检测细胞免疫表型及细胞内IFN-γ和IL-17表达水平.结果 ①TBI小鼠骨髓、脾、淋巴结及肝脏的淋巴细胞总数低于对照组[（5.34±1.14）×10^5对（3.08±1.13）×10^7、（2.10±0.54）×10^5对（2.71±0.83）×10^7、（5.89±1.07）×10^5对（7.92±1.15）×10^7、（3.45±1.01）×10^5对（7.44±0.79）×10^6,P值均＜0.05];②TBI组小鼠脾、淋巴结及肝组织IFN-γ CD4^＋T细胞百分比高于对照组[（20.77±2.03）％对（3.69±3.13）％、（6.28±0.46）％对（1.11±0.17）％、（27.24± 5.79）％对（9.01±1.24）％,P值均＜0.05];③TBI组小鼠脾、淋巴结及肝组织IFN-γ^＋ CD8^＋T细胞百分比亦高于对照组[（52.40±9.26）％对（43.06±1.04）％、（33.56±5.02）％对（21.83±4.22）％、（44.27±8.97）％对（19.32±3.11）％,P值均＜0.05];④TBI组小鼠脾及肝脏中CD4^＋T及CD8^＋T细胞IL-17A表达水平较对照组降低.结论 TBI可导致小鼠各脏器淋巴细胞数量减少、诱导IFN-γ表达阳性的效应性Th1和Tc1细胞百分比增加.
- 赵冬梅尹玲玲徐开林赵恺
- 关键词：全身照射白细胞介素17
- 髓细胞白血病干细胞表面标志蛋白白细胞介素-1辅助蛋白及其在血液系统疾病中的研究进展被引量：1
- 2015年
- 白细胞介素（IL）-1受体辅助蛋白（IL-1RAP）已被证实作为IL-1受体Ⅰ型（IL-1R Ⅰ）的共同受体,参与IL-1的效应发挥.最新研究表明,IL-1RAP是新鉴定的髓细胞白血病干细胞（LSC）表面标志蛋白,且IL-1RAP抗体,可通过抗体依赖性细胞介导的细胞毒性作用（ADCC）,杀灭慢性髓细胞白血病（CML）患者体内的LSC,而不损伤正常造血干细胞（HSC）.另有研究发现,IL-1RAP表达水平与急性髓细胞白血病（AML）临床预后密切相关,IL-1RAP表达水平亦是预测骨髓增生异常综合征（MDS）危险度的潜在指标.笔者拟就髓细胞白血病LSC表面标志蛋白IL-1RAP及其在血液系统疾病中的研究进展进行综述如下.
- 尹玲玲赵恺徐开林
- 关键词：白血病干细胞白血病
- TIRC7在慢性髓系白血病患者单核细胞中的表达
- 2018年
- 目的探讨T细胞免疫应答cDNA7(TIRC7)在慢性髓系白血病(CML)患者单核细胞(MNC)中的表达水平。方法收集24例CML患者(CML组)及6例健康志愿者(对照组)的新鲜骨髓或外周血,采用琼脂糖凝胶电泳及实时荧光定量PCR法检测TIRC7基因在MNC中的表达水平。结果应用TIRC7引物可扩增出大小约210bp的片段,与理论值相符。CML组TIRC7扩增条带亮度较弱,而对照组TIRC7条带明亮。CML组TIRC7相对表达量为0.085(0.032,0.197),低于对照组的0.960(0.715,2.027)(P<0.01)。结论 TIRC7在CML患者MNC中的表达水平较低,可能在CML的发生、发展中起重要作用。
- 尹玲玲朱锋赵恺徐开林
- 关键词：慢性髓系白血病单核细胞
- 异基因骨髓移植并发移植物抗宿主病小鼠体内IL-22的细胞来源被引量：1
- 2013年
- 本研究探讨小鼠经异基因骨髓移植后发生移植物抗宿主病(GVHD)时体内IL-22的细胞来源。分别以C57BL/6和BALB/c小鼠为供受鼠,受鼠经致死剂量全身照射后输注供鼠骨髓和脾淋巴细胞悬液,建立GVHD模型。实验分为正常组(normal)、单纯照射组(TBI)、骨髓移植组(BMT)和骨髓联合脾细胞诱导GVHD组(BS)。ELISA法检测小鼠血浆中IL-22的水平;流式细胞术检测IL-22的细胞来源及所属亚群情况。结果表明,BS组小鼠血浆中IL-22水平最高,与正常小鼠相比差异有统计学意义(P<0.01);BS组小鼠脾、淋巴结和外周血中淋巴细胞均可产生IL-22,且IL-22+CD4+T细胞百分率高于IL-22+CD8+T细胞;除Th22细胞外,Th1细胞和Th17细胞也是GVHD小鼠体内IL-22的细胞来源,但以Th22细胞分泌IL-22为主。结论:GVHD小鼠体内可产生高水平的IL-22,其主要来源于IFN-γ-IL-17-IL-22+的Th22细胞。
- 赵恺黄栋赵冬梅陈翀吴庆运潘彬曾令宇李振宇徐开林
- 关键词：骨髓移植移植物抗宿主病白介素-22
- 移植物抗宿主病小鼠肠道病变与肠系膜淋巴结T细胞活化状况的动态分析
- 2013年
- 异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）是目前治愈恶性血液病的有效途径，但移植物抗宿主病（GVHD）仍然是allo．HSCT患者死亡的重要原因。肠道GVHD发生率高、症状重、对患者全身状况影响大，直接关系到患者的预后及生活质量。在GVHD小鼠肠道发生免疫病理损伤时，肠系膜淋巴结（MLN）中T细胞活化、增殖及亚群分化情况及其与肠道病理损伤相关性目前尚未明确。本研究我们利用小鼠异基因骨髓移植（BMT）后的GVHD模型，检测MLN中T细胞活化、分化及功能，分析其对GVHD肠道损伤的指示意义。
- 赵恺黄栋赵冬梅陈翀吴庆运潘彬曾令宇李振宇姚瑶徐开林
- 关键词：移植物抗宿主病肠系膜淋巴结T细胞活化肠道病变小鼠免疫病理损伤
- ^60Coγ射线致死剂量全身照射对小鼠脾脏和肠系膜淋巴结T细胞亚群表面免疫分子表达水平的影响被引量：1
- 2016年
- 目的探讨小鼠接受^60Coγ射线致死剂量全身照射（TBI）后，脾脏和肠系膜淋巴结T细胞活化分子和黏附分子表达水平的变化。方法于2012年7月至10月，选择12只无特定病原体（SPF）级雄性BALB／c小鼠为研究对象。研究对象纳入标准：周龄为10～12周龄，体重为20-25g。按照完全随机法将其分为TBI组（接受致死剂量TBI）和对照组（未照射），每组6只。TBI组予^60Coγ放射源一次性照射（剂量率为0．66Gy／min，总剂量为7．5Gy）。于照射后第7天，脊椎离断处死两组小鼠，无菌条件下，取其脾脏、肠系膜淋巴结，研磨后采用密度梯度离心法收集单个核细胞。采用流式细胞术检测两组小鼠脾脏和肠系膜淋巴结中，CD4^＋T，CD8^＋T，辅助性T细胞（Th）1及细胞毒性T细胞（Tc）1细胞表面CD44和CD62L的表达水平。并采用统计学方法比较两组小鼠上述免疫分子表达水平。结果照射后第7天，TBI组小鼠脾脏和肠系膜淋巴结CD44^＋CD4^＋T细胞比例为（88．1±1．1）％和（76．7±1．8）%，均低于对照组的（95．0±1．1）％和（92．8±1．4）％，且差异有统计学意义（t=-11．01、-17．82，P〈0．05）；而CD44^＋CD8^＋T细胞的比例分别为（99．0±0．3）和（92．5±1．7）％，均高于对照组的（88．7±0．8）％和（83．4±1．6）％，差异亦有统计学意义（t=31．15、9．54，P〈0．05）。TBI组小鼠肠系膜淋巴结CD44^＋Thl比例为（4．1±0．4）％，高于对照组的（1．0士0．2）O，且差异有统计学意义（t=14．78，P〈0．05）；而两组小鼠脾脏CD44^＋Th1比例比较，差异无统计学意义（t=-0．93，P〉0．05）。TBI组小鼠脾脏和肠系膜淋巴结CD44^＋Tc1比例分别为（65．5士4．6）O和（26．6±2．8）％，较对照组的（41．8±1．5）％和（18．7±1．3）％增高，且差异有统计学意义（t=9．97、6．51，P〈0．05）。TBI组小鼠的脾脏和肠
- 田宇赵冬梅尹玲玲阮素红赵恺徐开林
- 关键词：全身照射CD8阳性T淋巴细胞CD4阳性T淋巴细胞
- Th22细胞及其效应因子白细胞介素-22在移植物抗宿主病中研究进展
- 2013年
- 辅助性T细胞22（Th22）细胞属于CD4＋T细胞亚群，其在感染性疾病、自身免疫性疾病以及肿瘤中作用已有研究。近来有研究证实Th22细胞在移植物抗宿主病（GVHD）中的发挥重要作用。笔者就近年来Th22细胞及其效应因子IL-22在GVHD中研究进展作一概述。
- 赵冬梅赵恺徐开林
- 关键词：移植物抗宿主病白细胞介素-22辅助性T淋巴细胞
- 白血病干细胞的新型标志蛋白IL1RAP杂交瘤细胞的制备及其分泌单克隆抗体的检测被引量：3
- 2013年
- 本研究旨在制备针对白血病干细胞表面标志蛋白IL1RAP(IL-1 receptor accessory protein)的特异性单克隆抗体并对其进行鉴定。用重组人IL1RAP作为抗原免疫BALB/c小鼠,通过常规杂交瘤技术将免疫后的小鼠脾细胞与SP2/0细胞经PEG融合,筛选阳性杂交瘤细胞株。分别应用ELISA和Western blot法对杂交瘤细胞上清中分泌抗体进行抗体类型、滴度和敏感性检测。分离人外周单个核细胞,检测所得抗体对细胞内源性抗原的特异性。结果表明,获得了8株可稳定分泌IL1RAP单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别为3H6E10、4B6A6、8G11B5、9E9F2、10D8A7、1C7H7、1D7G11和2D3D3;抗体类型鉴定为IgG1/κ型;分泌的单克隆抗体能特异性识别单个核细胞表达的IL1RAP。结论:本实验成功制备了可稳定分泌IL1RAP单克隆抗体的杂交瘤细胞及其特异性的IL1RAP单克隆抗体,为将来有效清除体内白血病干细胞提供了新途径。
- 赵恺尹玲玲赵冬梅吴庆运陈翀潘彬曾令宇姚瑶徐开林
- 关键词：单克隆抗体白血病干细胞
- 抗人IL1RAP单克隆抗体重、轻链基因的克隆及重组嵌合受体的构建被引量：1
- 2015年
- 目的:克隆抗人IL1RAP(IL-1 receptor accessory protein)单克隆抗体(McAb)可变区基因及构建嵌合抗原受体(CAR)重组质粒。方法:采用RACE、重叠延伸PCR技术,从3H6E10、10D8A7杂交瘤细胞总RNA中克隆扩增IL1RAP McAb的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)段DNA,并连接成IL1RAP特异性单链抗体可变区基因片段(scFv)。将hCD8α跨膜段、hCD137胞内段、hTCRζ链、hCD8α引导肽(Signal peptide)、scFv-anti-IL1RAP连入载体LV-Lac,并与辅助载体pMD2.G、psPAX2共同转染293FT细胞,包装获得病毒颗粒。结果:获得了两种抗人IL1RAP McAb的VH及VL基因,3H6E10 VH和VL基因全长402 bp和393 bp,可分别编码134、131个氨基酸;10D8A7 VH和VL基因全长423 bp和381 bp,可分别编码141、127个氨基酸。构建重组表达载体LV-3H6E10 scFv-ICD、LV-10D8A7 scFv-ICD(ICD:CD8α跨膜段-CD137胞内段-TCRζ链)后,经测序证实目的片段序列正确。重组质粒转染293FT细胞获得慢病毒颗粒。结论:本实验成功构建了能特异性结合人IL1RAP蛋白的嵌合受体,为以后制备IL1RAP-CAR杀伤性T细胞疫苗打下基础。
- 尹玲玲阮素红田宇赵恺徐开林
- 关键词：基因克隆重组质粒
- Th17细胞及Treg在急性移植物抗宿主病中的研究进展被引量：1
- 2013年
- 移植物抗宿主病（GVHD）是异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）的主要并发症。T细胞诱导和活化是GVHD发生的中心环节。辅助性T细胞（Th）17细胞及调节性T细胞（Treg）作为新近鉴定的T细胞亚群，两者之间存在相互调节关系，并且在GVHD中发挥了重要作用。笔者现就近年来Th17细胞和Treg细胞及两者在aGHVD中相互调节作用的研究进展作一综述。
- 赵冬梅赵恺徐开林
- 关键词：移植物抗宿主病TH17细胞
