国家自然科学基金(30700341)
- 作品数：6 被引量：74H指数：6
- 相关作者：刘春丽陈如冲叶新民钟南山赖克方更多>>
- 相关机构：广州医学院第一附属医院广州呼吸疾病研究所南京医科大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 副流感病毒感染豚鼠咳嗽反射敏感性变化及其神经源性炎症机制探讨被引量：16
- 2011年
- 目的:探讨人副流感病毒Ⅲ型(PIV3)感染豚鼠的咳嗽反射敏感性(CRS)变化和机制,以及神经源性炎症在CRS变化和病毒性咳嗽中的作用。方法:豚鼠50只,随机分成正常对照组以及病毒感染6、12、28和42 d组;通过滴鼻方法接种PIV3。Buxco肺功能仪测定CRS。免疫荧光和FQ-PCR方法检测PIV3抗原和核酸。ELISA法检测肺组织匀浆的P物质(SP)含量;FQ-PCR检测肺组织SP受体NK1、辣椒素受体亚型1(VR1)的mRNA水平;免疫组化方法检测肺组织SP、VR1和蛋白基因产物(PGP-9.5)的表达及半定量分析,并对它们各自与CRS的相关性进行分析。结果:各感染组豚鼠CRS均较对照组明显升高,以42 d组为最高。免疫荧光可见PIV3抗原表达;FQ-PCR显示病毒RNA含量在6 d组最高,并随感染时间逐步降低。各组SP和VR1 mRNA,以及12、28和42 d组NK1 mRNA水平均明显高于对照组。6、12及28 d组SP,28和42 d组VR1及42 d组PGP-9.5蛋白表达均增强。相关分析显示,6和28 d组肺匀浆SP含量,12、28和42 d组NK1 mRNA以及各感染组VR1 mRNA均与CRS呈正相关;6、12和42 d组SP的蛋白表达,12和28 d组VR1及12 d组PGP-9.5蛋白表达亦与CRS呈正相关。结论:神经肽的释放增加提示神经源性炎症的发生。CRS和神经肽的时空变化以及两者的正相关提示神经源性炎症在CRS增高和病毒感染性咳嗽中起重要作用。
- 叶新民钟南山刘春丽赖克方陈如冲
- 关键词：咳嗽神经源性炎症副流感病毒P物质
- 人副流感病毒三型感染对豚鼠咳嗽敏感性的影响被引量：17
- 2010年
- 目的 研究人副流感病毒3型（PIV3）感染对豚鼠咳嗽敏感性（CRS）的影响.方法 将雄性SPF级豚鼠60只按随机数字表法分成对照组、感染6 d组、感染12 d组、感染28 d组、感染42 d组和哮喘组,每组10只.病毒株为PIV3,经体外细胞培养扩增后,通过滴鼻方法接种于感染组豚鼠呼吸道;对照组接种细胞培养基;哮喘组给予卵清白蛋白致敏及诱发哮喘.辣椒素刺激后用BUXCO肺功能仪测定各组豚鼠CRS,同时测定气道高反应性（AHR）,并行BALF细胞学检测及肺组织病理学观察.结果感染后6、12、28和42 d组豚鼠CRS[中位数（四分位数间距）]分别为7.50（5.25）、7.30（7.25）、8.40（9.75）和8.20（5.50）CCnt（咳嗽总次数）,均高于对照组的2.50（3.00）CCnt（均P〈0.05）,感染后42 d组升高最明显;哮喘组CRS为3.90（1.75）CCnt,与对照组比较差异无统计学意义（P=0.18）.感染后6 d组豚鼠AHR明显;感染组豚鼠BALF中炎症细胞总数均较对照组明显升高,感染6 d和12 d组淋巴细胞明显升高.病理学检查显示感染组豚鼠急性期气道炎症表现为主,未见明显的肺实质炎症.结论 PIV3感染导致豚鼠CRS在急性和亚急性咳嗽期动态增高,CRS升高可能是豚鼠病毒感染引起咳嗽的关键特征.
- 叶新民钟南山刘春丽刘蓉赖克方陈如冲
- 关键词：咳嗽咳嗽敏感性
- 豚鼠呼吸道合胞病毒感染咳嗽模型及神经原性炎症机制被引量：18
- 2011年
- 目的 建立豚鼠呼吸道合胞病毒（RSV）感染急性和感染后咳嗽模型，探讨其神经原性炎症在咳嗽发病中的的作用。方法50只豚鼠随机分成对照组以及病毒感染后6、12、28和42d组各10只，滴鼻接种RSV；测定咳嗽反射敏感性（CRS）。支气管肺泡灌洗液细胞学和肺组织病理学观察气道炎症。免疫荧光和荧光定量．聚合酶链反应（FQ-PCR）法检测RSV抗原和核酸。酶联免疫吸附试验检测肺组织匀浆P物质含量；FQ-PCR法检测肺组织P物质受体神经肽受体1（NK1）的mRNA表达；免疫组化检测肺组织P物质蛋白表达；进行P物质、NK!mRNA水平与CRS的相关性分析。结果免疫荧光可见RSV感染肺组织病毒抗原表达；FQ—PCR结果显示肺组织RSVRNA随着感染后时间推移呈逐步降低趋势。感染后6、12、28和42d组豚鼠咳嗽总次数分别为（8．0±3．8）、（8．7±6．2）、（7．6±4．4）和（6．7±3．7），均明显高于对照组（2．5±1．4）的水平（均P〈0．05），以感染后12d组最为明显（P〈0．01）。肺泡灌洗液细胞学和肺组织病理学显示，感染组在急性期以气道炎症表现为主。各感染组肺组织P物质含量均明显高于对照组，蛋白检测可见明显阳性表达。感染组肺组织NK1mRNA表达除6d组外，均高于对照组。相关分析显示，各感染组CRS均与P物质和NK1mRNA水平呈正相关（均P〈0．05）。结论RSV感染咳嗽模型成功建立；P物质及其受体释放增加引起的神经原性炎症可能是模型豚鼠CRS增高和感染后咳嗽的关键机制。
- 叶新民钟南山刘春丽赵谨秦笙陈如冲
- 关键词：呼吸道感染呼吸道合胞病毒P物质
- 变应性咳嗽的临床特征与气道炎症特点被引量：23
- 2013年
- 目的探讨变应性咳嗽(AC)的诊断、治疗及其气道炎症特点。方法采用《咳嗽的诊断与治疗指南(草案)》的病因诊断程序,对158例慢性咳嗽患者进行病因诊断;结合诱导痰方法,分析痰液中细胞分类,分别采用荧光酶免疫法、酶联免疫吸附法测定诱导痰上清液中总IgE、嗜酸粒细胞阳离子蛋白(ECP)、白细胞介素-8(IL-8)的浓度。并以13例正常人和20例嗜酸粒细胞性支气管炎患者作对照;口服氯雷他定10 mg/d,2周,部分患者同时口服泼尼松10～15 mg/d或甲基氢化泼尼松8～12 mg/d,1周。结果 22例符合AC诊断,占慢性咳嗽的13.9%,多表现为慢性干咳,肺功能正常,组胺激发试验阴性。AC患者中性粒细胞(57.62±29.35)%较正常人(30.70±16.04)%显著增高(P<0.01),巨噬细胞(37.62±29.49)%较正常人(67.98±15.83)%明显降低(P<0.01),嗜酸粒细胞和淋巴细胞与正常人比较差异无统计学意义。AC患者诱导痰上清液中ECP浓度19.30(2.00～200.00)mg/L和IL-8浓度12.82(1.92～118.92)mg/L较正常人显著升高(P<0.01,P<0.05)。AC患者糖皮质激素或抗过敏治疗1周后,大部分患者的咳嗽消失。结论 AC是引起慢性咳嗽的一个重要原因,气道具有以中性粒细胞为主的炎症,抗过敏或抗炎治疗效果良好。
- 刘春丽陈如冲罗炜
- 关键词：变应性咳嗽诱导痰气道炎症
- 呼吸道合胞病毒感染对豚鼠咳嗽相关气道功能及其神经递质的影响被引量：7
- 2011年
- 目的观察呼吸道合胞病毒RSV（感染）对豚鼠咳嗽相关的气道功能及神经递质的影响，探讨病毒感染后咳嗽的发病机制。方法雄性SPF级豚鼠60只，按数字随机法随机分成正常对照组、病毒感染组和哮喘组，病毒感染组按病毒感染后天数分为6、12、28和42d四个组，每组10只。通过滴鼻方法接种RSV。Buxco肺功能仪测定咳嗽反射敏感性（CRS）及气道反应性（AR）。荧光定量PCR（Realtime PCR）方法检测辣椒素受体亚型1（VR1）的mRNA表达，免疫组织化学方法检测肺组织VRl及蛋白基吲产物9．5（PGP-9．5）的蛋白表达。结果病毒感染6、12、28、42d组豚鼠CRSE（8．00±3．86）、（8．70±6．20）、（7．60±4．40）和（6．70±3．71）CCnt]均较正常对照组[（2．50±1．43）CCnt]升高（P值均〈0．05），并在12d组达到最高峰（P〈0．01）。感染后12d组豚鼠AR对2个高浓度乙酰甲胆碱刺激结果为（1069±156）％和（1846±285）％，均高于正常对照组（P值分别〈0．05和0．01）。感染后6、12和28d组VRl的mRNA水平分别为1．57±0．43、1．61±0．47和1．68±0．56，均较正常对照组（1．00±0．34）升高（P值均〈0．05），而以28d组为最高。与正常对照组相比，感染后28d组VRl蛋白表达增强（PG0．05）：而感染后12d组PGP9．5表达增强（P〈0．05）。结论CRS增高伴随一定程度的AR增高是RSV引起咳嗽的特点，感染引起VR1和PGP9．5的时空变化可能与病毒感染性咳嗽的发病机制有关。
- 叶新民钟南山刘春丽陈如冲赵谨
- 关键词：呼吸道合胞病毒气道反应性辣椒素受体
- 呼吸道合胞病毒感染对豚鼠咳嗽相关气道功能及其神经递质的影响被引量：9
- 2011年
- 目的观察呼吸道合胞病毒RSV(感染)对豚鼠咳嗽相关的气道功能及神经递质的影响,探讨病毒感染后咳嗽的发病机制。方法雄性SPF级豚鼠60只,按数字随机法随机分成正常对照组、病毒感染组和哮喘组,病毒感染组按病毒感染后天数分为6、12、28和42 d四个组,每组10只。通过滴鼻方法接种RSV。Buxco肺功能仪测定咳嗽反射敏感性(CRS)及气道反应性(AR)。荧光定量PCR(Real-time PCR)方法检测辣椒素受体亚型1(VR1)的mRNA表达,免疫组织化学方法检测肺组织VR1及蛋白基因产物9.5(PGP-9.5)的蛋白表达。结果病毒感染6、12、28、42 d组豚鼠CRS[(8.00±3.86)、(8.70±6.20)、(7.60±4.40)和(6.70±3.71)CCnt]均较正常对照组[(2.50±1.43)CCnt]升高(P值均<0.05),并在12 d组达到最高峰(P<0.01)。感染后12 d组豚鼠AR对2个高浓度乙酰甲胆碱刺激结果为(1 069±156)%和(1 846±285)%,均高于正常对照组(P值分别<0.05和0.01)。感染后6、12和28 d组VR1的mRNA水平分别为1.57±0.43、1.61±0.47和1.68±0.56,均较正常对照组(1.00±0.34)升高(P值均<0.05),而以28 d组为最高。与正常对照组相比,感染后28 d组VR1蛋白表达增强(P<0.05);而感染后12 d组PGP-9.5表达增强(P<0.05)。结论 CRS增高伴随一定程度的AR增高是RSV引起咳嗽的特点,感染引起VR1和PGP-9.5的时空变化可能与病毒感染性咳嗽的发病机制有关。
- 叶新民钟南山刘春丽陈如冲赵谨
- 关键词：呼吸道合胞病毒气道反应性辣椒素受体
