首都医学发展科研基金(ZB199814)
- 作品数：10 被引量：20H指数：2
- 相关作者：黄益民顾云张颖辛毅王盛宇更多>>
- 相关机构：首都医科大学附属北京安贞医院北京市心肺血管疾病研究所中国中医研究院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 环孢素A对心脏移植大鼠外周血单个核细胞免疫分子表达的影响被引量：2
- 2005年
- 目的 通过对大鼠心脏移植 ,探讨环孢素A对免疫排斥反应过程中免疫分子表达的影响。方法 将大鼠分为 2组 ,用药组大鼠心脏移植术前后以 15mg·kg-1体重环孢素A灌胃给药 ;对照组灌胃给予同等体积的生理盐水。 2组分别在移植前、移植术后 1,3,7,10和 12d取血 ,用荧光单克隆抗体 (mAb)标记单个核细胞免疫分子 ,流式细胞仪检测MHC II,CD4 ,CD8,ICAM I和IL2 R的表达水平。结果 大鼠心脏移植前 ,环孢素A组外周血单个核细胞表面免疫分子CD4的表达水平明显低于对照组 ,移植术后 ,环孢素A组的CD4和ICAM I的正调表达时相出现于移植后的前 2 4h内 ,环孢素A组的CD8于移植后第 2 4小时至第 3天时 ,出现一个负调表达的低谷 ,这一负调表达期比对照组延长了 2d ,而环孢素A组CD8开始正调表达时相是移植后第 3天 ,比对照组正调表达时相晚 2d ,比同组CD4和ICAM I开始正调表达时相晚 2～ 3d ,比同组IL 2R开始正调表达时相晚 2d。结论 ①环孢素A不抑制急性器官移植排斥反应早期 (抗原呈递期 )外周血单个核细胞对MHC Ⅱ 抗原肽复合物的表达过程 ;②环孢素A不能有效抑制ICAM I的表达 ,而是促进其表达 ;③环孢素A不能有效抑制MHC Ⅱ 抗原肽和ICAM I通过TCR共同介导的CD4 + T单个核细胞激活过程 。
- 王盛宇顾云黄益民李玉梅吕燕宁张颖葛六平
- 关键词：心脏移植环孢素A免疫分子
- 心脏移植后PBMC表面蛋白分子的表达与组织病理学改变的比较被引量：1
- 2005年
- 目的: 比较心脏移植前后,外周血单个核细胞(PBMC)表面蛋白分子的表达与组织病理学改变时相间的差别,探讨免疫分子的活性变化与移植器官排斥反应时间进程间的关系.方法: 6例心脏移植患者于术前、术后不同时间点取外周血,用不同荧光单克隆抗体(mAb)标记PBMC表面的蛋白分子后,用流式细胞仪检测MHC-II、CD3、CD4、CD8、HLA-DR和ICAM-I的表达.常规移植术后供心组织病理检查, 根据国际器官移植排斥反应的病理诊断标准分级.结果: (1)6例实施心脏移植的患者中, 有3例在不同时间发生不同程度的急性排斥反应.(2)发生排斥反应的病例在整个30 d的观测期内, CD3、CD4及CD8的表达水平, 均高于未发生排斥反应的病例.(3)发生移植排斥反应的患者,其PBMC上HLA-DR的表达于移植术后72 h出现高峰, 出现高峰的时间较用活组织检查诊断排斥反应的时间早4～7 d.(4)发生排斥反应的患者PBMC上MHC-II及ICAM-I的表达,分别于术后3 d及2 d 出现高于术前的表达峰,于术后15 d达峰值,峰值的出现时间与病理改变基本同步.结论: (1)心脏移植患者术前的免疫功能状况,与移植术后排斥反应的发生率及严重性有一定的相关性.(2)监测PBMC表面HLA-DR、MHC-II及ICAM-I分子的表达, 对临床早期发现心脏移植排斥反应具有一定的指导意义.
- 顾云黄益民孟旭白涛李玉梅辛毅
- 关键词：心脏移植急性排斥反应免疫分子表达
- 器官移植病人外周血淋巴细胞表面蛋白分子表达与移植器官功能和活组织病理学改变时相比较被引量：1
- 2013年
- 目的系统比较移植后外周血淋巴细胞表面蛋白分子表达时相与病理改变时相间的差别,探讨外周血淋巴细胞免疫活性变化与移植器官排斥反应时间进程间的关系。方法分别通过对临床4例肾移植、4例心脏移植和1例单肺移植病人的观察,利用病理学、流式细胞术等技术,系统比较了移植器官功能改变时相、移植器官的病理改变时相、外周血淋巴细胞表面蛋白分子表达时相的时间进程的差别和先后顺序。结果 (1)9例器官移植病人中有4例在发生急性排斥反应,免疫抑制剂不能完全阻断脏器移植排斥反应的发生;(2)肾移植术后早期,对外周血淋巴细胞表面蛋白分子CD3、CD4、CD8和TCR表达水平的监测可以帮助发现和判断急性排斥反应的时间进程,并可较准确地监测抗排冲击的疗效,减少免疫药物冲击疗程的盲目性;(3)心脏移植排斥反应病人淋巴细胞HLA-DR分子于移植后24～72 h期间出现高于没有排斥反应病人的表达高峰,比活组织检查诊断排斥反应时间提前5～7 d;(4)9例病人24 h内平均淋巴细胞表面蛋白分子CD3、CD4、CD8、HLA-DR、ICAM-I、MHC-Ⅱ、TCR等负调表达,淋巴细胞活性被一过性抑制;(5)9例病人24～48 h期间,平均淋巴细胞表面蛋白分子CD3、CD4、HLA-DR、ICAM-I、MHC-Ⅱ、TCR等正调表达。结论外周血淋巴细胞表面蛋白分子的测定对临床急性排斥反应的早期发现和时间进程的监测、抗排斥反应药物治疗效果的判断与监测具有一定的指导意义。
- 许秀芳张颖辛毅黄益民顾云李娜孟旭伍冀湘周玉杰张兆光许学敏李京悻
- 关键词：脏器移植外周血淋巴细胞
- 环孢霉素A对异体心肌诱导大鼠脾淋巴细胞表面分子表达时间窗的影响
- 2012年
- 目的:体外建立异体心肌组织抗原诱导大鼠淋巴细胞表面蛋白分子及编码基因表达时间窗模型,动态观察环孢素A对表达时间窗的影响。方法:实验分4组:对照组、抗原组、环孢组和抗原+环孢组。2、6、12、24、48h和72h观察脾白细胞其表面蛋白分子及编码基因的变化。结果:4组MHC-Ⅱ、CD4、CD8分子、ICAM-1无显著差异,CD4分子环孢霉素组2～24h有一个平台期。IL-2R分子抗原组12h达高峰值,环孢素A组6h有小峰值,抗原+环孢素A组表达较平稳。P59基因对照组逐步负调,而抗原组在2h内和12～24h有2个正调表达,2～12h负调至谷底,后再正调、负调表达,环孢素A组表达较稳定,抗原+环孢素组48h达到谷底,后迅速上升。CD4基因对照组2h、抗原组6h到谷底,后迅速上升,环孢素A组48h达到峰值,抗原+环孢素A组2h内有一个峰值,2组后逐步负调。CD8基因4组均负性表达,除抗原组无谷底外,对照组加药12h出现谷底,环孢素组加药6h出现谷底,抗原+环孢素A组加药12h出现谷底,3组后迅速上升。结论:异体心肌组织抗原可在2h内引发白细胞开始释放细胞表面蛋白分子IL-2R、P59基因表达,刺激6h可以诱发CD4基因开始转录表达,环孢素A 2h开始释放ICAM-I、IL-2R分子。这些结果为更加具体的描述移植免疫排斥反应的时间进程提供了详实的依据,并为更深入阐述环孢素A抑制移植排斥反应的机理提供了可靠依据。
- 许秀芳张颖辛毅黄益民顾云李娜孟旭伍冀湘周玉杰张兆光
- 关键词：CD8
- 环孢素A,庆大霉素和硒制剂对大鼠外周血淋巴细胞分子和基因表达的影响被引量：4
- 2003年
- 目的 为比较环孢素A ,庆大霉素和硒制剂对细胞免疫功能的不同影响 ,本实验观察了大鼠短期服用环孢素A ,庆大霉素和硒制剂后外周血多种淋巴细胞分子和基因的表达水平变化 ,并对 3组药物进行了对比。方法 将 2 4只大鼠分为 4组 ,分别ig给药。于第 3天取血并分离淋巴细胞。用荧光单克隆抗体 (mAb)标记淋巴细胞分子并提取淋巴细胞总RNA。流式细胞仪检测淋巴细胞分子MHC Ⅱ ,CD4,CD8,ICAM Ⅰ和IL2 R的表达水平 ,基因差异显示分析法检测多基因表达水平。免疫组化法检测各组心肌组织中CD4+,CD8+淋巴细胞数。结果 与对照组相比 ,环孢素A ,庆大霉素和硒制剂都抑制淋巴细胞分子ICAM I,CD4和CD8的表达 ,同时 3组心肌组织中CD4+和CD8+淋巴细胞数降低 ,心肌组织中CD4+淋巴细胞数与CD4分子表达水平明显正相关 (P <0 .0 0 0 1)。 3组的细胞分子表达和心肌淋巴细胞数的降低程度依次为环孢素A >庆大霉素 >硒制剂。不同的是 ,环孢素A还负调MHC Ⅱ和IL2 R的表达水平 ,而庆大霉素却正调MHC II和IL2 R的表达 ,硒制剂负调MHC Ⅱ ,正调IL2 R的表达。 3组都表现出对凋亡基因 gig18和一个 45 0bp左右的待测基因的正调表达。 结论 ①短期服用环孢素A ,庆大霉素和硒制剂 ,都抑制大鼠外周血淋巴细胞对ICAM I 。
- 王盛宇黄益民顾云张颖赵颂军
- 关键词：环孢素A庆大霉素硒制剂基因表达
- 环孢霉素A对大鼠心脏移植模型淋巴细胞分子表达与移植心脏病理学改变时相关系的影响
- 2013年
- 【目的】通过环孢素A(CsA)干预的异体异位心脏移植动物模型的研究,对移植术后淋巴细胞分子表达、心肌组织淋巴细胞浸润能力和移植心脏病理改变时相进行比较,探讨环孢素A对其影响。【方法】SD大鼠为移植心脏供体,Wistar大鼠为移植心脏受体。实验分为心脏移植对照组和环孢素A干预+心脏移植组实验组两组。在移植前及移植后24 h、3 d、7d、10 d和12 d时间点免疫荧光测定淋巴细胞在心肌组织中浸润能力、实时定量PCR检测淋巴细胞编码基因CD4、CD8和酪氨酸激酶P59 mRNA表达水平、心肌组织病理学检查判断排斥反应程度。【结果】①心脏移植后24 h内,外周血淋巴细胞基因的转录与表达为一过性降低;②心肌组织CD4+、CD8+淋巴细胞浸润和Ⅱ级排斥反应病理改变,主要出现于心脏移植后的d3～d7;③环孢素A不能有效抑制移植后3 d内心肌组织CD4+、CD8+淋巴细胞浸润程度的快速增加,但可明显降低移植后d3～d7的心肌组织CD4+淋巴细胞的浸润程度;④环孢素A不能完全阻断淋巴细胞P59基因的表达;⑤环孢素A不能有效抑制淋巴细胞CD4基因正调表达,但可抑制CD8基因的转录。【结论】环孢素A的移植排斥反应的抑制作用在大鼠移植后d3～d7。淋巴细胞基因表达、心肌组织淋巴细胞浸润与排斥反应病理改变有关。这将有助于同种移植病人环孢素A的临床应用。
- 许秀芳辛毅李娜张颖黄益民顾云周玉杰张兆光
- 硒对心脏移植大鼠外周血单个核细胞免疫分子、基因表达的影响被引量：2
- 2006年
- 目的探讨微量元素硒对大鼠异体异位心脏移植后免疫排斥反应过程中免疫分子和基因表达的影响。方法大鼠分为对照及药物干预组。干预组分别于心脏移植术前后每天灌胃给予硒（40μg·kg^-1）及环孢素A（15mg·kg^-1），对照组给予同等体积生理盐水。3组分别在移植术前及术后1，3，7，10和12d取外周血，分离单个核细胞（PBMC）。荧光单克隆抗体（mAb）标记，流式细胞仪检测MHC-Ⅱ，CD4，CD8，R2-R和ICAM-Ⅰ免疫分子表达水平。荧光基因差异显示分析法检测多基因表达水平。国际器官移植排斥反应病理诊断标准对移植心肌组织进行病理分级。结果①对照组移植心脏存活率于术后3d时下降，7—12媳剧下降；硒组移植心脏存活率术后7d时下降，10—12d存活率为43％；环孢素A组术后3d移植心脏存活率下降50％，12d时为30％。②对照组及环孢素A组术后24h移植心肌组织分别有12．5％和33．3％发生Ⅱ级以上病理损伤，硒组术后7d出现Ⅱ级以上病理损伤。③与对照组比较，心脏移植术前后，硒对PBMC表面免疫分子MHGⅡ，CD8，IL-2R及ICAM-Ⅰ的表达均有抑制作用（P〈0．05或P〈0．01），环孢素A对ID2R有较强的抑制作用。④硒及环孢素A对心脏移植术后2，3-bisphosohoglycerate的mRNA表达均有抑制作用。与对照组比较，硒对gig18的mRNA为负调表达，环孢素A为正调表达。结论微量元素硒可能通过调节2，3-bisphosphoglycerate和gig18等细胞代谢和凋亡相关基因的转录，抑制PBMC表面免疫分子MHC-Ⅱ，CD8，IL-2R和ICAM-Ⅰ的表达，从而对心肌细胞起到保护作用，提高大鼠移植心脏存活率。
- 顾云王盛宇黄益民张永科吕燕宁张颖葛六平
- 关键词：心脏移植硒免疫分子
- 环孢素对心脏移植大鼠外周血淋巴细胞多基因mRNA表达的影响
- 2004年
- 目的 对大鼠心脏移植前后不同时间点外周血淋巴细胞mRNA差异表达的研究,探讨环孢素对免疫排斥反应过程中基因表达的影响.方法 心脏移植前后以15 mg·kg-1·d-1环孢素灌胃的大鼠,分别在移植前、移植后24,72 h,7,10,12 d取血,提取总RNA,用mRNA差异显示法找出差异表达条带,克隆测序,用灰度扫描法计算差异表达基因的比密度。结果 对照组移植心脏存活率于移植后的10 d内降至为0%,而此阶段环孢素组的移植心脏存活率始终保持在50％.移植后第10天,对照组与凋亡信号传导和线粒体蛋白构象重构与蛋白转运相关基因Ribosomal—12S和S25,MHC—Ⅲ(Hst-70)的表达水平显著高于移植前,与移植心脏存活率最低点同步.其2,3-bisphosphoglycerate和gig18基因表达水平的变化无统计学意义。环孢素组与细胞凋亡有关的gig18和Thbsl,以及T细胞受体(TCR)等基因的表达水平于移植后10 d内持续低于移植前,2,3-bisphosphoglycerate基因的表达水平于移植后24 h降低,只有钠通道β-1基因的表达水平于移植后10 d内高于移植前。结论 环孢素可负调心脏移植后大鼠外周血淋巴细胞凋亡相关基因gig18和Thbsl,正调钠通道基因的转录。
- 王盛宇黄益民张颖王夏葛六萍
- 关键词：环孢素心脏移植外周血淋巴细胞免疫排斥反应
- 器官移植患者外周血淋巴细胞分子表达
- 2012年
- 目的:比较移植后患者外周血淋巴细胞不同基因表达时相与病理改变时相,探讨外周血淋巴细胞分子的表达与排斥反应的关系。方法:通过对9例脏器移植的观察,系统比较了移植器官的实时荧光定量PCR检测患者外周血淋巴细胞CD4、CD8、P56、P59编码基因表达时相改变、荧光差异显示技术检测差异基因表达时相及其与脏器功能、病理改变时相的关系。结果:免疫抑制剂不能完全阻断脏器移植排斥反应的发生;移植术后24 h内,9例患者荧光差异显示-PCR技术外周血淋巴细胞P59、酪氨酸磷酸酶的基因表达上调,24～48 h PKC-θ、CD4等基因表达上调;肾移植和心脏移植术后PKC-θ、MHC-Ⅱ、丝/苏氨酸激酶和酪氨酸磷酸酯酶及丝氨酸/苏氨酸激酶15、凝血因子VIII、干扰素诱导蛋白、HLA-DR-H基因较术前有3倍以上升高。P59编码基因表达水平于移植后24 h内保持基本平稳,此后持续负调表达直到第10天达低谷。P56和CD8基因于移植后72 h内表现为持续负调表达,此后正调表达并于第5天时达到移植后的第一个峰值。CD4编码基因于移植后24 h内首先表现为负调表达,此后开始正调表达并于48 h达到移植后的第一个峰值。结论:外周血淋巴细胞基因表达水平的监测可能有助于临床早期急性排斥反应的诊断和免疫抑制剂治疗效果的判断。
- 许秀芳辛毅张颖黄益民顾云李娜周玉杰张兆光
- 关键词：脏器移植外周血淋巴细胞时相
- 大鼠心脏移植后淋巴细胞5种免疫分子表达的变化被引量：10
- 2003年
- 目的 :观察大鼠异体异位心脏移植术后不同时间点 ,淋巴细胞相关免疫分子的表达水平、供心存活率及心肌组织的病理学改变 ,探讨免疫排斥反应的相关时间进程。方法 :分别经供体SD大鼠的心脏主动脉、肺动脉与受体Wistar大鼠的腹主动脉及下腔静脉吻合 ,进行异位心脏移植术。于术前及术后不同时间点 ,取血分离淋巴细胞。用流式细胞仪分别检测淋巴细胞上CD4、CD8、IL 2R、ICAM I和MHC II类分子的表达水平。对供心心肌组织进行常规病理学检查。结果 :于移植后2 4h ,只有MHC II类分子的表达水平增加 ,CD4、IL 2R和I CAM I的表达水平降低 ,CD8无改变。术后 72h,CD4、CD8及IL 2R的表达增加 ,其中CD8和IL 2R达峰值。术后 7～ 10d ,除CD4的表达继续增加外 ,其他 4种免疫分子的表达水平逐渐降低。术后不同时间点移植心脏的存活率分别为 :10 0 % (2 4h)、85 .7% (72h)、16 .7% (7d)、0 (10d和 12d)。病理学检查显示 ,移植后 2 4h ,心肌组织无明显的病理学变化 ,术后 3d ,7只大鼠中 4只出现ⅠA级及以上病理改变。术后 7d ,6只大鼠全部发生Ⅱ级以上的病理学变化。结论 :大鼠心脏移植后的 2 4h内 ,外周血淋巴细胞为以MHC II分子表达为主的抗原识别、呈递期 ,并伴有一过性免疫功能降低 ;术后 2 4～ 72h为T细胞活化期 。
- 顾云黄益民张永科吕燕宁林筝张颖葛六平
- 关键词：心脏移植免疫分子表达心肌组织淋巴细胞
