国家高技术研究发展计划(2001AA244041)
- 作品数：5 被引量：55H指数：5
- 相关作者：朱祯尹伟伦王华芳张晓英甘敬更多>>
- 相关机构：中国科学院遗传与发育生物学研究所北京林业大学北京市园林绿化局更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 国槐遗传转化体系的优化被引量：9
- 2009年
- 采用根癌农杆菌介导的国槐叶盘转化法,在建立修饰的豇豆胰蛋白酶抑制剂基因(sck)转化体系过程中,对影响农杆菌转化频率的各种因素进行研究。结果表明:国槐叶片需在黑暗条件下在MS培养基上预培养5天,农杆菌菌株选用GV3101,农杆菌共培养3天较合适;农杆菌菌液浓度OD600约为0.7,感染时间10min;侵染前的菌液和共培养基中添加200μmol·L-1乙酰丁香酮(AS)对国槐遗传转化有明显的促进作用;抑制农杆菌生长的抗生素浓度以头孢霉素(Cef)500mg·L-1最好。PCR和Southern blotting检测证实sck基因已整合到国槐基因组中。
- 张晓英甘敬尹伟伦朱祯王华芳
- 关键词：国槐乙酰丁香酮槐尺蠖抗虫基因
- 国槐离体再生及抗虫基因sck的转导被引量：6
- 2006年
- 以国槐叶片作为外植体,筛选出诱导不定芽分化的最佳培养基;利用根癌农杆菌介导法将经过修饰的广谱抗虫基因豇豆胰蛋白酶抑制剂基因sck(Signal-CpTI-KDEL)导入国槐。国槐叶片与农杆菌共培养结束后,转移至筛选培养基MS+BA3 mg·L-1+IAA0·05 mg·L-1+G418 8 mg·L-1+Cef 500 mg·L-1上。不定芽在培养基1/2MS+IBA1·0 mg·L-1+G418 10 mg·L-1+Cef 100 mg·L-1上进一步培养获得完整再生植株。通过PCR和Southern blotting检测证明,修饰的豇豆胰蛋白酶抑制剂基因sck已成功导入国槐细胞。
- 张晓英王华芳朱祯王天祥尹伟伦
- 关键词：国槐基因转导
- 抗生素对国槐愈伤组织诱导和生长的影响被引量：16
- 2004年
- 由于不同植物不同外植体对抗生素的反应不同,在进行国槐农杆菌介导的遗传转化研究之前,必须对新霉素磷酸转移酶基因(nptⅡ)有抗性的抗生素种类及其使用浓度进行探讨.结果表明,卡那霉素在浓度达到150mgL时仍然没有完全抑制国槐叶片和茎段的生长;而遗传霉素在低浓度下对国槐愈伤组织的诱导和生长的抑制作用较卡那霉素明显.随着遗传霉素浓度的增加,愈伤组织形成的频率降低,外植体的死亡率上升.当遗传霉素的浓度超过10mgL时,叶片和茎段愈伤组织的诱导和生长已完全受到抑制.另外,研究发现不同外植体对遗传霉素的敏感程度不同,茎段较强,叶片稍弱茎段的抗生素致死浓度在8～10mgL之间,叶片的抗生素致死浓度8mgL左右.
- 张晓英尹伟伦朱祯王华芳
- 山菠菜EREBP/AP2类DNA结合蛋白基因的克隆及其耐逆性研究(英文)被引量：21
- 2003年
- EREBP/AP2类蛋白是一个仅存在于植物中的DNA结合蛋白(DBP)大家族。其中一些成员如APETALA2和AtDREB/CBF分别调控花的发育和植物对环境胁迫的反应。为了阐明在植物响应盐胁迫过程中所涉及的转录因子的特点,用高盐浓度处理盐生植物山菠菜,构建了cDNA文库,并从此文库中分离得到了一个编码EREBP/AP2类蛋白的基因。此cDNA包含一个723 bp的开放读码框和一个长达655 bp的3’端非编码区,推导的氨基酸序列显示其有一个保守的EREBP/AP2的DNA结合域,此基因被命名为AhDREB1。将AhDREB1置于CaMV 35S启动子下转入烟草,获得9个独立的转基因株系,对其进行了长期的盐胁迫实验。结果显示,AhDREB1的组成性表达显著提高了转基因烟草的耐盐能力,这可能是由于其激活了一些具有抗盐效应的下游基因。通过与拟南芥的全基因组进行同源性比较得到了具有较高相似性的7个EREBP/AP2家族成员,二级结构预测显示了它们在DNA结合区段的a螺旋结构上具有相似性。
- 沈义国闫冬青张万科杜保兴张劲松刘强陈受宜
- 关键词：转基因烟草基因克隆耐逆性
- 国槐转雪花莲凝集素基因及抗蚜性被引量：6
- 2010年
- 通过农杆菌介导法将雪花莲外源凝集素基因(gna)导入国槐叶片,获得转基因再生植株,经卡那霉素抗性筛选,PCR和Southern blot检测证实,gna基因已经整合进入国槐基因组中。凝血活性检测表明,大部分转基因植株表现出一定的凝血活性,对照未转化植株的凝血活性很低。室内离体叶片虫试试验进一步证明,转基因植株较非转基因植株有一定的抗蚜虫能力。
- 张晓英甘敬尹伟伦朱祯王华芳
- 关键词：国槐雪花莲凝集素槐蚜基因转化虫口密度
