广东省医学科学技术研究基金(A2001471)
- 作品数：6 被引量：9H指数：3
- 相关作者：蒋义国纪卫东傅娟王敏宾晓农更多>>
- 相关机构：广州医学院华中科技大学江西省人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- E-cadherin、Cyclin D1和Cyclin E在叶绿酸抗细胞恶变中表达研究被引量：1
- 2006年
- 目的研究叶绿酸干预反式-7,8-二羟-9,10-环氧苯并芘(反式-BPDE)恶性转化人支气管上皮细胞系16HBE中的细胞周期相关基因及蛋白的影响。方法应用半定量RT-PCR技术检测叶绿酸干预反式-BPDE恶性转化细胞中各组细胞E-cadherin基因mRNA表达差异;荧光细胞免疫化学技术检测E-cadherin、Cyclin D1及Cyclin E蛋白水平。结果反式-BPDE诱导恶变细胞组出现E-cadherin基因在mRNA和蛋白水平表达缺失,而经叶绿酸抗转化组该基因表达正常。Cyclin D1、Cyclin E蛋白在正常对照组中表达阴性,而在反式-BPDE恶性转化组中上述两种蛋白呈现高表达,通过叶绿酸干预抗转化组中其表达明显下调。结论叶绿酸抗反式-BPDE致细胞恶变作用与其避免抑癌基因E-cadherin的表达缺失有关。叶绿酸在拮抗反式-BPDE致癌中具有影响细胞周期素CyclinD1和CyclinE表达作用。
- 傅娟蒋义国宾晓农陈学敏
- 关键词：细胞周期素
- 叶绿酸抑制细胞恶性转化的基因表达分析被引量：3
- 2003年
- 目的 采用cDNA微阵列技术探索人支气管上皮细胞经叶绿酸抗转化处理后基因的差异表达。方法 人支气管上皮细胞株 1 6HBE分别经二羟环氧苯并芘 (BPDE)单独处理及叶绿酸与BPDE联合处理后 ,提取 2种细胞的总RNA ,逆转录合成cDNA并以Cy3 -dCTP和Cy5 -dCTP荧光素分别标记制作探针。探针混合后与含 4 0 0 0个人类基因的芯片杂交。以ScanArray 40 0 0扫描仪扫描芯片 ,以GenPixPro 3 0软件分析荧光信号 ,然后对差异表达的基因进行生物学信息分析。结果 叶绿酸与BPDE联合处理的细胞样与BPDE单独处理的细胞样比较呈显差异表达的基因有 1 0 6个 ,其中 67个 (63 9% )下调 ,另 39个 (36 8% )上调。结论 叶绿酸的抗转化活性与应激反应基因 ,免疫相关基因 ,DNA合成和修复基因 。
- 蒋义国朱丽瑾纪卫东
- 关键词：叶绿酸基因芯片
- 叶绿酸对恶性转化细胞周期及体外生长的影响被引量：3
- 2005年
- 目的 研究叶绿酸对反式 7,8二羟 9,10环氧苯并 (a)芘 (反式BPDE)恶性转化人支气管上皮细胞系(16HBE)体外生长及细胞周期影响。方法 采用噻唑蓝 (MTT)比色法和流式细胞术 (FCM) ,同时观察正常人支气管上皮细胞 (16HBE)、反式 -BPDE恶性转化细胞系、叶绿酸抗反式 -BPDE恶性转化细胞系生长曲线和生长周期的变化以及经叶绿酸处理后的影响。结果 BPDE恶性转化细胞系增殖活性明显大于正常细胞系 (16HBE) ,经 10 0 μmol/L叶绿酸抗BPDE恶性转化细胞组增殖活性较转化组有一定降低。经同样浓度叶绿酸处理的正常细胞组 ,未见降低细胞增殖活性作用。反式 -BPDE恶性转化细胞组G0 /G1期细胞周期比例明显少于正常组细胞。但经叶绿酸抗转化组G0 /G1期比例有所提高 ,而经同样浓度叶绿酸处理的正常细胞组G0 /G1期细胞周期比例无明显改变。结论 对正常细胞无影响的一定浓度叶绿酸有抑制反式 -BPDE恶性转化人支气管上皮细胞增殖活性的作用 ,并通过提高恶性转化细胞G0 /G1期细胞周期比例而影响细胞周期的进程 ,从而改变恶性细胞的增殖和分化。
- 傅娟蒋义国宾晓农纪卫东王敏
- 关键词：细胞周期恶性转化
- 叶绿酸抗细胞恶变相关cDNA序列的克隆
- 2003年
- 目的:克隆叶绿酸抑制人支气管上皮细胞系(16HBE)恶性转化的相关差异表达cDNA序列。方法:以叶绿酸及反式-BPDE共同处理的16HBE细胞为实验细胞,以反式-BPDE单独处理的16HBE细胞为对照细胞,采用cDNA代表性差异分析法,比较2种细胞基因表达的差异,分离叶绿酸抗反式-BP-DE作用的相关差异表达cDNA片段。分离的片段分别与pGEM-T载体连接并转化入JM109细菌中,对质粒DNA进行测序。以BLASTN程序进行GenBank的同源性检索。结果:克隆的5条cDNA序列中,有3条为新基因序列,另2条分别与类S18/S6人核糖体蛋白及alpha-烯醇酶等有同源性。结论:克隆的5条cDNA序列所在的基因可能与叶绿酸抗细胞恶性转化分子机制密切相关。
- 朱丽瑾蒋义国
- 关键词：细胞转化基因表达克隆
- 致癌物诱导恶变细胞中线粒体高变区序列分析被引量：1
- 2006年
- 目的检测苯并(a)芘代谢产物反式二羟环氧苯并芘(反式-BPDE)及结晶型硫化镍(NiS)诱发永生化人支气管上皮细胞系(16HBE)恶性转化过程中线粒体DNA控制区序列变化。探讨线粒体DNA控制区在环境致癌物苯并(a)芘及硫化镍致癌作用中是否存在靶分子序列。方法应用银染PCR-单链构向多态性(SSCP)方法及测序方法分析恶变细胞中线粒体DNA高变区的序列变化。结果经反式-BPDE和NiS诱导恶变的人支气管上皮细胞系线粒体高变区均未发现异常改变。结论线粒体基因控制区可能并非是化学致癌物诱发肺癌的靶序列。
- 傅娟蒋义国陈家堃吴中亮曹虹
- 关键词：苯并(A)芘人支气管上皮细胞线粒体基因
- 叶绿酸对反式-7,8-二羟-9,10-环氧苯并芘抗细胞转化活性的影响被引量：6
- 2003年
- 目的 研究叶绿酸对反式 7,8 二羟 9,10 环氧苯并芘 (反式 BPDE)诱发的SV40 largeT抗原永生化的人支气管上皮细胞系 (16HBE)恶性转化的抑制作用。方法 在反式 BPDE诱导的细胞转化整个过程中 ,分别加入浓度为 10、5 0和 10 0 μmol/L的叶绿酸 ,应用刀豆凝集素 (ConA)凝集实验、软琼脂集落形成实验和裸鼠成瘤实验进行细胞恶性度鉴定。结果 细胞培养至 2 5代 ,发现叶绿酸和反式 BPDE共处理组细胞与反式 BPDE单独处理组细胞相比 ,前者ConA凝集时间延长 ;叶绿酸和反式 BPDE共处理组细胞在软琼脂中集落形成率分别为 7 4‰、11 4‰和 14 4‰ ,明显低于反式 BPDE单独处理组 (19 6‰ ) ,且有剂量反应关系 ;各处理组细胞均能在裸鼠体内成瘤 ,叶绿酸和BPDE共处理组在裸鼠体内生长的肿瘤体积分别为 (0 4 3± 0 13)cm3 、(0 2 2± 0 0 4 )cm3 、(0 10± 0 0 6 )cm3 ,明显小于BPDE单独处理组的 (1 71± 0 37)cm3 ,并有剂量依赖关系 ,肿瘤组织经病理学证实为低分化鳞状细胞癌。结论 体外试验显示叶绿酸具有一定的抗细胞恶变能力。
- 纪卫东蒋义国王敏冯苏妹
- 关键词：叶绿酸肿瘤
