国家自然科学基金(30972512) 作品数:21 被引量:87 H指数:7 相关作者: 牛侨 梁瑞峰 李伟庆 宋静 刘莹 更多>> 相关机构: 山西医科大学 太钢疾病预防控制中心 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 年山西省研究生优秀创新项目 国家教育部博士点基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 理学 更多>>
NMDAR在亚慢性染铝致大鼠学习记忆损害中作用 被引量:3 2013年 目的探讨N-甲基-D-天门冬氨酸受体(NMDAR)在亚慢性染铝致大鼠学习记忆损害中作用。方法健康成年雄性SD大鼠36只,按体重随机分为对照组、低、中、高剂量麦芽酚铝[Al(mal)3]组(0.41、0.81、1.23 mg/kg),腹腔注射染毒8周后,用Morris水迷宫试验检测大鼠空间学习记忆能力,苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠海马组织病理变化,Western-blot方法检测大鼠海马组织NMDAR亚单位NR-2A、NR-2B表达。结果中、高剂量组大鼠找到平台时间分别为(44.12±5.62)、(45.92±13.97)s,均长于对照组的(26.80±1.59)s(P<0.05);中、高剂量染铝组大鼠在目标象限停留时间均明显减少(P<0.05);随着铝剂量增加,大鼠海马锥体层细胞排列分散,细胞数目减少,出现核固缩、空泡变性等病理改变;与对照组NR-2A蛋白表达水平(0.69±0.03)比较,中、高剂量组表达水平[(0.44±0.12)、(0.32±0.19)]均明显降低(P<0.05),且呈剂量效应关系;与对照组比较,各剂量染铝组大鼠NR-2B蛋白水平变化不明显。结论亚慢性染铝可使大鼠学习记忆能力下降,其机制可能与大鼠海马NMDAR亚基蛋白表达改变有关。 刘莹 宋静 段蕾 牛侨关键词:铝 学习记忆 麦芽酚铝对大鼠在体海马长时程增强影响 被引量:8 2013年 目的探讨急性麦芽酚铝[Al(mal)3]染毒对大鼠海马CA1区长时程增强(LTP)影响。方法对照组及低、中、高染铝组大鼠通过侧脑室给药方式分别一次性注射生理盐水、2.43、12.15、60.75μg Al(mal)3,给药容积为5μL,5 min内缓慢匀速注入;采用在体海马CA1区LTP记录技术,记录兴奋性突触后电位(fEPSP)。结果高剂量染铝组大鼠在给药前和给药后30 min时fEPSP分别为(109±4)%和(111±7)%,差异无统计学意义(P>0.05);在高频刺激后60 min时,低、中、高染铝组fEPSP分别为(157±8)%、(140±13)%、(110±7)%,均低于对照组的(190±27)%,而相同剂量下的Al(mal)3对双脉冲易化(PPF)无影响。结论 Al(mal)3剂量依赖性抑制大鼠海马CA1区的LTP诱导和维持,其作用机制可能与突触前机制无关,而与突触后机制有关。 宋静 张慧芳 刘莹 牛侨关键词:侧脑室注射 亚慢性染铝对大鼠学习记忆及AMPA受体基因表达影响 被引量:7 2013年 目的研究亚慢性染铝后对大鼠学习记忆及α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸(AMPA)受体基因表达的影响。方法无特定病原体级健康成年雄性SD大鼠36只,按体质量随机分为0.41、0.82、1.23 mg.kg-1.d-1麦芽酚铝[Al(mal)3]组和对照组。染毒组分别腹腔注射Al(mal)30.41、0.82、1.23 mg.kg-1.d-1,对照组给予等容量生理氯化钠溶液。染毒8周后,用Morris水迷宫实验检测大鼠空间学习记忆能力,实时荧光定量聚合酶链反应法检测大鼠海马组织AMPA受体亚单位GluR-1、GluR-2、GluR-3基因表达情况。结果水迷宫结果表明,与对照组比较,0.82、1.23mg.kg-1Al(mal)3组大鼠找到平台时间延长(P<0.05),并且目标象限停留时间缩短(P<0.05);1.23 mg.kg-1.d-1Al(mal)3组穿越平台次数减少(P<0.05)。基因检测表明,与对照组比较,3个Al(mal)3组GluR-1、GluR-2基因表达水平均降低(P<0.01);0.82、1.23 mg.kg-1.d-1Al(mal)3组GluR-3基因表达也降低(P<0.01)。结论亚慢性染铝可使大鼠学习记忆能力下降,其机制可能与大鼠海马AMPA受体各亚基基因表达改变有关。 刘莹 宋静 牛侨关键词:AMPA受体 铝 学习记忆 基因 亚慢性铝暴露对大鼠学习记忆及2-氨基羟甲基恶丙酸受体蛋白表达水平的影响 被引量:3 2013年 [目的]研究亚慢性铝暴露对大鼠学习记忆及2-氨基羟甲基恶丙酸(AMPA)受体蛋白表达水平的影响。[方法]健康成年雄性SD大鼠32只,按体重随机分为4组,分别为生理盐水对照组,低、中、高剂量铝染毒组(染毒剂量分别为15、30、45μmol/kg)]。各染毒组腹腔注射麦芽酚铝染毒8周后,采用Morris水迷宫试验检测大鼠空间学习记忆能力,苏木精-伊红(HE)染色观察海马组织病理学改变,Western-blot方法检测大鼠海马组织AMPA受体亚单位谷氨酸受体(GluR)-1、GluR-2和GluR-3的表达量。[结果]HE染色结果显示,随着染铝剂量的增加,海马组织出现锥体层细胞排列紊乱,数目减少,胞核淡染肿胀,轴突走向紊乱等改变。定位航行实验结果显示,低、中、高剂量组及对照组的潜伏期分别为(36.86±3.75)、(44.75±12.82)、(46.48±8.12)、(29.86±10.34)s,中、高剂量组与对照组比较潜伏期增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。空间探索实验结果显示,低、中、高剂量组及对照组的目标象限时间分别为(40.58±10.04)、(34.70±9.25)、(32.93±11.28)、(43.11±15.72)s,中、高剂量组与对照组比较目标象限时间降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。Western-blot检测结果显示,GluR-1在低、中、高剂量组及对照组的蛋白表达量分别为0.69±0.15、0.54±0.22、0.41±0.14、0.92±0.09,中、高剂量组GluR-1蛋白表达量分别与对照组和低剂量组比较,差异有统计学意义(P<0.05);GluR-2在低、中、高剂量组及对照组的蛋白表达量分别为0.63±0.18、0.62±0.09、0.42±0.09、0.83±0.26,高剂量组GluR-2蛋白表达量与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。GluR-3蛋白含量在各组无明显变化。[结论]亚慢性铝暴露可致大鼠学习记忆能力下降,这可能与大鼠海马AMPA受体蛋白表达水平下降有关。 宋静 刘莹 王林平 牛侨关键词:学习记忆 亚慢性 铝对PC12细胞淀粉样前体蛋白β位点裂解酶-1蛋白及基因表达的影响 被引量:2 2012年 [目的]探讨铝对PC12细胞淀粉样前体蛋白(APP)β位点裂解酶-1(beta-site amyloid precursor proteincleaving enzyme-1,BACE1)蛋白及基因表达的影响。[方法]采用PC12细胞进行培养及麦芽酚铝[Al(mal)3]染毒,将细胞分为6组,分别为:200μmol/L生理盐水组;0、50、100、200和400μmol/L Al(mal)3组。分别采用酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)、荧光实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chainreaction,qRT-PCR)于染毒12、24和48 h后测定BACE1蛋白含量及基因表达。[结果]细胞计数试剂盒-8(CCK-8)细胞活力测定结果显示,不同浓度Al(mal)3染毒PC12细胞,可使其细胞活力呈现随染毒时间延长而逐渐下降的趋势。qRT-PCR结果显示,100μmol/L Al(mal)3组在染毒48 h后BACE1基因表达明显高于生理盐水组、0μmol/L Al(mal)3组,差异有统计学意义(P<0.05);200、400μmol/L Al(mal)3组染毒12、24、48 h后BACE1基因表达明显高于生理盐水组和0μmol/L Al(mal)3组,差异均有统计学意义(P<0.05)。ELISA测定结果显示,染毒12 h后400μmol/L Al(mal)3组BACE1表达量明显高于生理盐水组和0μmol/L Al(mal)3组,差异均有统计学意义(P<0.05);染毒24 h后200、400μmol/L Al(mal)3组BACE1表达量明显高于生理盐水组和0μmol/L Al(mal)3组,差异有统计学意义(P<0.05);染毒48h后400μmol/L Al(mal)3组的BACE1表达量明显高于生理盐水组和0μmol/L Al(mal)3组,差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]Al(mal)3对PC12细胞具有明显毒性作用,该作用可能与麦芽酚铝致PC12细胞BACE1蛋白和基因表达增强有关。 李伟庆 葛翠翠 贾志建 梁瑞峰 牛侨关键词:淀粉样前体蛋白 麦芽酚铝对PC12细胞钙稳态和凋亡的影响 被引量:1 2017年 目的探讨麦芽酚铝[aluminum maltolate,Al(mal)_3]染毒对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(rat pheochromocytoma cells,PC12)钙稳态及凋亡的影响。方法将PC12细胞随机分为0(对照组)、50、100、200、400μmol/L Al(mal)_3染毒组,分别培养12、24、48 h,采用CCK-8试剂盒检测PC12细胞活性,以流式细胞术检测PC12细胞内游离钙离子荧光强度[Ca(~2+)]i及细胞凋亡率。结果随着Al(mal)_3染毒时间和染毒剂量的增加,PC12细胞活性逐渐下降,细胞[Ca(~2+)]i与细胞总凋亡率逐渐升高。除50μmol/L Al(mal)_3染毒12、24 h及100μmol/L Al(mal)_3染毒12 h外,其他各剂量组染毒PC12细胞12、24、48 h后细胞活性均低于对照组,细胞[Ca(~2+)]i均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。400μmol/L Al(mal)_3染毒PC12细胞12 h,200、400μmol/L Al(mal)_3染毒24 h,100、200、400μmol/L Al(mal)_3染毒48 h后,PC12细胞总凋亡率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论钙超载可能是Al(mal)_3引起凋亡发生的主要机制。 王琼 李壮 梁瑞峰 白剑英 牛侨关键词:钙离子 凋亡 慢性铝染毒致大鼠神经细胞凋亡及P53磷酸化改变 被引量:4 2015年 目的探讨慢性铝染毒致大鼠神经细胞凋亡及P53磷酸化的变化。方法40只雄性SD大鼠按照体重随机分为空白对照组和低、中、高剂量AlCl3染毒组(每组10只),染毒剂量依次为10.73、107.33、1073.33mg/kg,染毒期6个月。染毒组将氯化铝(AlCl3·6H2O)混入饲料中喂养大鼠,对照组无AlCl3饲料饲养。TUNEL法检测大鼠皮质神经细胞凋亡,免疫印迹法检测大鼠皮质P53蛋白及其ser15位点磷酸化蛋白表达。结果低、中、高剂量组皮质神经细胞凋亡率均明显高于对照组,差异有统计学意义(P〈0.01)。随着染毒剂量的增加,大鼠脑皮质组织中P53和ser15位点磷酸化P53蛋白表达均增加。高剂量组P53蛋白表达量明显高于对照组和低剂量组,差异有统计学意义(P〈0.05);中、高剂量组ser15位点磷酸化P53蛋白的表达量明显高于对照组和低剂量组,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论慢性AlCl3染毒可致大鼠皮质神经元P53及磷酸化P53蛋白表达增加,这可能是引起神经细胞凋亡的机制之一。 潘宝龙 郭栓栋 郭亮 李新 牛侨关键词:铝 神经元 细胞凋亡 Effects of Exposure to Aluminum on Long-term Potentiation and AMPA Receptor Subunits in Rats in vivo 被引量:13 2014年 Objective To explore the effects of exposure to aluminum (AI) on long-term potentiation (LTP) and AMPA receptor subunits in rats in vivo. Methods Different dosages of aluminum-maltolate complex [Al(mal)3] were given to rats via acute intracerebroventricular (i.c.v.) injection and subchronic intraperitoneal (i.p.) injection. Following AI exposure, the hippocampal LTP were recorded by field potentiation technique in vivo and the expression of AMPAR subunit proteins (GluR1 and GluR2) in both total and membrane-enriched extracts from the CA1 area of rat hippocampus were detected by Western blot assay. Results Acute AI treatment produced dose-dependent suppression of LTP in the rat hippocampus and dose-dependent decreases of GluRz and GluR2 in membrane extracts; however, no similar changes were found in the total cell extracts, which suggests decreased trafficking of AMPA receptor subunits from intracellular pools to synaptic sites in the hippocampus. The dose-dependent suppressive effects on LTP and the expression of AMPA receptor subunits both in the membrane and in total extracts were found after subchronic AI treatment, indicating a decrease in AMPA receptor subunit trafficking from intracellular pools to synaptic sites and an additional reduction in the expression of the subunits. Conclusion Al(mal)3 obviously and dose-dependently suppressed LTP in the rat hippocampal CA1 region in vivo, and this suppression may be related to both trafficking and decreases in the expression of AMPA receptor subunit proteins. However, the mechanisms underlying these observations need further investigation. SONG Jing LIU Ying ZHANG Hui Fang ZHANG Qin Li NIU Qiao关键词:HIPPOCAMPUS INVIVO caspase-3基因在染铝小鼠神经细胞凋亡中的作用 被引量:5 2011年 [目的]通过观察染铝小鼠海马的线粒体膜电位、组织形态以及脑组织内活化的caspase-3蛋白含量表达的变化,研究caspase-3 siRNA在铝致神经细胞凋亡中的作用。[方法]取3月龄雄性昆明小鼠,按体重随机分为4组,即空白对照组(生理盐水4μL)、染铝组(0.5%AlCl3.6H2O 4μL)、Al+RNAi组(0.5%AlCl3.6H2O 3μL+目的siRNA表达载体1μL)、空载体组(0.5%AlCl3.6H2O 3μL+对照siRNA表达载体1μL),通过侧脑室注射进行染毒,连续染毒5 d,各组小鼠海马的凋亡率用流式细胞术检测;线粒体膜电位用罗丹明123(Rhl23)染色流式方法检测;观察小鼠组织学变化;脑组织中活化的caspase-3蛋白的含量用蛋白印迹(Western blot)技术检测。[结果]凋亡率结果显示:与空白对照组相比,染铝组、空载体组的细胞凋亡率升高有统计学意义(P<0.05),Al+RNAi组凋亡率尚无差别(P>0.05);线粒体经Rhl23染色呈现明亮绿色的荧光,染铝组和空载体组荧光强度较对照组明显减弱(P<0.05),Al+RNAi组与空白对照组差异无统计学意义;常规HE染色镜下可见空白对照组小鼠海马神经元排列整齐,染铝组细胞排列零乱,细胞连接松解,空载体组细胞数量减少,siRNA处理后细胞状态与空白对照组相似;活化的caspase-3蛋白表达量结果显示染铝组高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);空白对照组、空载体组、Al+RNAi组之间尚无差别(P>0.05)。[结论]RNA能通过下调caspase-3基因的表达,从而对铝致小鼠神经细胞凋亡产生抑制作用。 李娜 王晓燕 刘春长 张勤丽 牛侨关键词:铝 SIRNA CASPASE-3 凋亡 神经细胞 亚慢性铝暴露对大鼠大脑皮质中β-位点切割酶1mRNA和蛋白表达及活力的影响 2012年 目的探讨铝暴露对大鼠大脑皮质中β-位点切割酶1(beta-site APP cleaving enzyme1,BACE1)mRNA、蛋白表达及活力的影响。方法将16只健康清洁级雄性SD大鼠按体重随机分成4组,分别为对照(生理盐水)组和低(0.27 mg/kg)、中(0.54 mg/kg)、高(1.08 mg/kg)剂量麦芽酚铝染毒组,每组4只。采用腹腔注射方式进行染毒,染毒容量为1 ml/kg,连续染毒60 d。测定大鼠大脑皮质中的BACE1 mRNA、蛋白表达及活力。结果 0.54、1.08 mg/kg麦芽酚铝染毒组BACE1 mRNA和蛋白表达及活力均明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。且随着麦芽酚铝染毒剂量的升高,大鼠皮质BACE1 mRNA和蛋白表达及活力呈上升趋势。结论铝暴露可导致大鼠大脑皮质BACE1 mRNA、蛋白表达和活力升高。 梁瑞峰 李伟庆 牛侨关键词:大脑皮质