四川省应用基础研究计划项目(05JY029-119)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 相关作者：徐艳程晓刚金虹张绍兰邹强更多>>
- 相关机构：成都医学院首都医科大学附属北京天坛医院更多>>
- 发文基金：四川省应用基础研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- IL-27亚基基因真核表达质粒的构建与表达被引量：1
- 2008年
- 目的克隆人白细胞介素27(interleukin 27,IL-27)蛋白亚基EB病毒诱导的基因3(Epstein-Barr vi-rus-induced gene 3,EBI3)与p28基因的cDNA,分别构建其真核表达质粒并在COS-7细胞表达。方法人外周血单核细胞诱导为成熟树突状细胞后提取细胞总RNA,经逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增EBI3与p28基因cDNA,酶切后插入pcDNA-3.1构建真核表达载体pcDNA-EBI3与pcDNA-p28。重组质粒转染COS-7细胞,RT-PCR检测目的基因表达。结果成功构建克隆人IL-27蛋白亚基真核表达质粒,重组质粒分别转染COS-7细胞后检测到相应基因表达。结论人IL-27蛋白亚基基因克隆及真核表达质粒的成功构建,为构建表达有生物学活性的重组人单链IL-27蛋白奠定基础。
- 程晓刚叶琬邹强陈玮金虹徐艳张绍兰冷言冰李晋川
- 关键词：IL-27基因克隆真核表达
- 重组人单链IL-27融合基因的构建、表达及生物学活性鉴定被引量：1
- 2009年
- 白细胞介素（IL）-27是近年发现的IL—12细胞因子超家族的新成员，是由IL-27 p28和IL-27 EB病毒诱导的基因3蛋白（Epstein—Barr virus—induced gene 3，EBI3）亚单位构成的可溶性异源二聚体，实验发现IL-27具较强促进细胞免疫与诱导杀伤肿瘤细胞的生物学活性。由于编码EBB与p28的基因分别位于不同的染色体，接受不同启动子和增强子的调节，因此只有当EBI3和p28同时表达并以1：1形式构成异二聚体蛋白时才具良好生物学活性。
- 程晓刚叶琬邹强陈玮金虹徐艳张绍兰李晋川
- 关键词：IL-27生物学活性融合基因活性鉴定单链杀伤肿瘤细胞
- 腺病毒介导重组人单链IL-27融合基因在肝癌细胞的表达及活性鉴定
- 2010年
- 目的:利用腺病毒表达系统在肝癌细胞表达有生物活性的单链重组人白细胞介素-27(rhscIL-27)并检测其生物学活性。方法:将rhscIL-27基因片段从pcDNA3.1载体克隆到腺病毒载体pAdTrack-CMV,然后在细菌内与pAdEasy同源重组构建AdIL-27腺病毒载体并转染293细胞包装、扩增腺病毒颗粒。将重组腺病毒感染肝癌细胞株HepG2,荧光显微镜、RT-PCR及ELISA等方法进行检测蛋白表达情况,IFN-γ诱生实验检测rhscIL-27的生物学活性。结果:成功构建AdIL-27腺病毒载体,经293细胞包装扩增后感染HepG2细胞观察到有GFP表达,RT-PCR及ELISA检测到细胞有rhscIL-27表达,IFN-γ诱生实验证实表达的rhscIL-27具有诱导产生IFN-γ的生物学活性。结论:利用腺病毒表达系统成功在肝癌细胞表达有生物活性的重组人单链IL-27(rhscIL-27),并具有诱导产生IFN-γ的生物学活性,为研究IL-27的生物学功能及其对肝癌的基因治疗奠定了基础。
- 程晓刚张亚清叶琬邹强陈玮金虹徐艳张绍兰
- 关键词：白细胞介素-27腺病毒
