国家自然科学基金(30271000)
- 作品数：12 被引量：54H指数：4
- 相关作者：曾振灵蒋红霞陈杖榴林居纯邓旭明更多>>
- 相关机构：华南农业大学解放军军需大学四川农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金四川省优势产业发展急需紧缺专业博士后引进项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 细菌16S rDNA基因芯片的构建及应用被引量：3
- 2011年
- 本试验为建立能检测兽医临床重要病原菌的基因芯片方法,采用通用引物扩增菌株16S rDNA V1-V3区,制备16S rDNA PCR产物基因芯片,对5种兽医临床微生物进行检测。结果显示,制备的基因芯片能特异性地检测金黄色葡萄球菌、链球菌和鸡毒支原体,以及这3种菌株混合样品,但对大肠杆菌及沙门菌检测结果不理想。基因芯片检测灵敏度为3μg/L。
- 林居纯曹三杰蒋红霞曾振灵
- 关键词：基因芯片病原菌RDNA
- 养殖场分离的耐氟喹诺酮类药物的大肠杆菌基因突变研究被引量：7
- 2006年
- 目的探讨从养殖场动物、环境和饲养员分离的大肠杆菌的gyrA和parC基因突变特征。方法用琼脂稀释法测定环丙沙星和恩诺沙星对菌株的最小抑菌浓度。PCR扩增gyrA和parC基因的喹诺酮耐药决定区,扩增的片段长度分别为525bp和487bp,PCR产物直接测序。结果在63株突变株中,在GyrA亚基发生的氨基酸替代有Ser83→Leu(62株)和Asp87→Asn(52株)、Asp87→Tyr(2株)、Asp87→His(2株);ParC亚基的氨基酸替代有Ser80→Ile(47株)、Ser80→Arg(2株)和Glu84→Val(3株)、Glu84→Lys(4株)、Glu84→Gly(5株)、Glu84→Ala(1株)。环丙沙星对菌株的MIC小于0.125μg.ml-1时,GyrA和ParC亚基均没有任何变异;环丙沙星的MIC为0.125～0.25μg.ml-1时,GyrA亚基出现单一氨基酸替代;环丙沙星的MIC为0.5～32μg.ml-1时,出现GyrA83位和87位双替代或者GyrA83和ParC80位双替代;环丙沙星的MIC为4～128μg.ml-1,发生GyrA双替代和ParC单替代;环丙沙星的MIC在16～128μg.ml-1,发生GyrA双替代和ParC双替代。结论不同来源的耐氟喹诺酮类药物的大肠杆菌GyrA和ParC具有多种氨基酸替代类型,而且GyrA和ParC突变位点的数量与菌株对氟喹诺酮类耐药水平呈正相关。
- 陶文琴曾振灵陈杖榴蒋红霞陈晓琴吴聪明
- 关键词：氟喹诺酮类GYRAPARC
- 体外耐氟喹诺酮类鸡毒霉形体gyrA基因的突变特征分析被引量：1
- 2004年
- 按常规方法提取了鸡毒霉形体参考株S6 10 、疫苗株F14 8及在氟喹诺酮类药物压力下筛选出来的耐药株的基因组DNA ,扩增了各菌株DNA旋转酶 gyrA基因片段 ,并进行了克隆、测序 ,利用DNAsis软件对测序结果进行分析。结果表明 ,S6 10 和F14 8在恩诺沙星或环丙沙星压力下均筛选出不同程度的耐药菌 ,而且恩诺沙星致鸡毒霉形体发生耐药性突变的几率高于环丙沙星 ,S6 10株耐药突变频率高于F14 8;S6 10 筛选出来的耐药菌株发生突变的位置在DNA旋转酶GyrA亚基的第 83位 (相对于大肠埃希氏菌GyrA亚基中的位置 ,以下同 )和第 87位上 ,取代模式分别为Ser→Ile、Glu→Gln ,另外 1株高水平耐药株 (Se10 ,MIC≥ 12 8)在第 10 3位也发生了氨基酸取代 (Ile→Val) ;F14 8筛选出来的耐药菌株只在DNA旋转酶GyrA亚基的第 87位发生了突变 (Glu→Gly/Gln)。
- 蒋红霞陈杖榴曾振灵邓旭明欧阳红生梁焕春
- 关键词：鸡毒霉形体耐药性GYRA基因氟喹诺酮药物病原体
- 基因芯片技术及其应用被引量：3
- 2005年
- 基因芯片技术作为一项高新技术,近年来得到了飞速发展,在生命科学研究中发挥着越来越重要的作用。文章对基因芯片的制备,信号检测及其在生物学、医学领域的广泛应用进行了介绍。
- 林居纯曾振灵蒋红霞
- 关键词：基因芯片
- 氟喹诺酮类药物(FQs)耐药性产生的分子机制被引量：8
- 2005年
- 随着氟喹诺酮类药物的广泛使用,细菌对该类药物产生耐药性日趋严重,这引起了国内外的高度重视。本文就FQs耐药性产生的分子机制,即药靶的改变,药物在菌体内蓄积浓度下降及由质粒介导的耐药等机制做了综述。
- 林居纯曾振灵
- 关键词：氟喹诺酮类药物耐药性分子机制
- 鸡毒支原体的分离与鉴定被引量：6
- 2007年
- 从广东、四川及北京地区患有慢性呼吸道疾病的不同鸡场采集194份样本,接种FM-4培养基进行分离培养。对符合鸡毒支原体培养特性培养物采用PCR加以鉴定,结果培养鉴定出69株鸡毒支原体,其分离率为35.57%(69株/194株)。
- 林居纯曾振灵向蓉孔意端
- 关键词：鸡毒支原体
- 氟喹诺酮类药物压力下鸡毒支原体gyrA基因突变特征分析被引量：4
- 2004年
- 按常规方法提取鸡毒支原体参考株 (S6 - 1 0 )、疫苗株 (F1 4- 8)及在氟喹诺酮类药物压力下体外筛选出来的耐药株的基因组DNA,扩增各菌株 DNA旋转酶 gyr A基因片段 ,并克隆、测序 ,利用 DNA SIS分析软件对测序结果进行分析。结果表明 ,S6 - 1 0 和F1 4- 8在恩诺沙星或环丙沙星压力下均筛选出不同程度的耐药菌 ,而且恩诺沙星致鸡毒支原体发生耐药性突变的机率高于环丙沙星 ,S6 - 1 0 株耐药突变频率高于 F1 4- 8。 S6 - 1 0 筛选出来的耐药菌株发生突变的位置在 DNA旋转酶 gyr A亚基的第 83位 (相对于大肠杆菌 gyr A亚基中的位置 ,以下同 )和 87位上 ,取代模式为 Ser83→ Ile、Glu87→ Gln,高水平耐药株 (Se32 M,MIC≥ 12 8)除了在第83位发生突变外 ,在第 82位还增加一突变位点 (Asp→ Gly) ;F1 4- 8筛选出来的高水平耐药菌株 (Fe32 M)在 DNA旋转酶 gyr A亚基的第 83、87位发生了双位点突变 (Ser83→ Ile,Glu87→ Gly) ,而低水平耐药株 (Fe8M、Fc8M)在 gyr
- 蒋红霞陈杖榴曾振灵邓旭明欧阳红生梁焕春
- 关键词：氟喹诺酮类药物鸡毒支原体GYRA基因突变特征
- 寡核苷酸芯片检测兽医病原菌耐药性的研究被引量：15
- 2004年
- 利用寡核苷酸芯片(oligonucleotide array)对兽医临床常见病原菌耐药性检测进行了初步研究。设计1对兼并引物扩增3种病原菌(E. coli、S. aureus、M. gallisepticum)的gyrA基因片段,并用cy5-dCTP标记荧光。设计一系列检测病原菌对氟喹诺酮类药物耐药的寡核苷酸探针,将探针固定在APS-PDC法制作的Microarray上,用标记的PCR产物与之杂交,置于Scanarrray4000中扫描,利用ImaGene3.0软件对杂交图像进行分析。研究结果表明,设计的兼并引物能很好地扩增出3种病原菌的gyrA基因片段,与Microarray杂交后在相应的位点出现可检测的杂交信号,样本O78S(禽大肠杆菌)、SS(金黄色葡萄球菌)、S6-10(鸡毒支原体)的ratio比值均≥2,说明这3株是敏感株;样本EDr(犬大肠杆菌)、ECr(猫大肠杆菌)与a1探针(检测GyrA第83位氨基酸发生突变的探针)的ratio比值≤0.5,说明这两株是耐药突变株,均与样本的实际情况相吻合。说明利用Oligonucleotide array能快速准确地检测出GyrA亚基第83、87位发生突变的耐药菌株,是可行、有效、快捷的抗菌药耐药性的监测方法。本研究为进一步研制和开发兽医临床常见病原菌耐药性检测芯片打下初步基础。
- 蒋红霞陈杖榴曾振灵邓旭明欧阳红生李瑶
- 关键词：寡核苷酸芯片兽医病原菌耐药性
- 耐氟喹诺酮类药物鸡毒支原体gyrA基因突变的研究被引量：1
- 2007年
- 林居纯曾振灵蒋红霞
- 关键词：鸡毒支原体感染氟喹诺酮类药物GYRA慢性呼吸道疾病
- 寡核苷酸芯片检测兽医病原菌耐药性的初步研究
- 利用寡核苷酸芯片(Oligonucleotide array)对兽医临床常见病原菌耐药性检测进行了初步研究。设计一对兼并引物扩增3种病原菌(E.coli、S.aureus、M.gallisepticum)的gyrA基因片...
- 蒋红霞陈杖榴曾振灵邓旭明欧阳红生李瑶
- 关键词：耐药性
- 文献传递
