国家自然科学基金(30972520)
- 作品数：11 被引量：34H指数：4
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- 万古霉素敏感性下降金黄色葡萄球菌(VISA/hVISA)的研究进展被引量：4
- 2017年
- 万古霉素敏感性下降的金黄色葡萄球菌(VISA/hV ISA)日益增多,已经成为公共健康的重要威胁。来自临床或实验室的VISA/hV ISA菌株表现出一些共同特征,如细胞壁增厚,自溶活性降低,毒力减弱,醋酸盐代谢异常。金葡菌从VSSA到VISA/hV ISA的转化是一个逐步演变的过程,VISA中一些调控基因的变异,特别是如wal KR、graRS、vra SR、rpo B、rpo C、rpo D、agr、msrR、fdh2、sle1等基因连续的变异与金葡菌对万古霉素的耐药性相关。VISA/hV ISA中相应基因的变异也是VISA/hV ISA对宿主毒力减弱,持续定殖及对宿主适应性改变的遗传基础。为了预防和控制VISA/hI VSA感染,应全面了解其生物学特性,开发简便有效的检验方法,探索制定灵活的治疗策略,达到有效防治的目的。
- 马笑雪徐佳胡健
- 关键词：万古霉素金黄色葡萄球菌基因变异
- 多重PCR系统的建立及其在社区型甲氧西林耐药性金黄色葡萄球菌中PVL噬菌体分型中的应用
- 2011年
- 目的从基因组型和表型两方面解析从医院环境中分离出的社区型甲氧西林耐药性金黄色葡萄球菌(MRSA),对携带杀白细胞素(PVL)基因的MRSA中的PVL溶原噬菌体进行分型。方法聚合酶链式反应(PCR)解析菌株所携带的SCCmec基因岛型及PVL毒素基因;凝固酶试验测定菌株的凝固酶型;设计8组PCR反应组合检测PVL溶原噬菌体型。结果 36株菌株所携带的SCCmec基因岛分型多样化。携带Ⅳc型SCCmec的菌株占多数,为16株(44.4%),其次为携带Ⅱ型SCCmec的菌株,为10株(27.8%)。各菌株所携带的SCCmec型别与菌株的凝固酶分型高度一致。经多重PCR检测,6株PVL阳性菌株所携带的PVL噬菌体型分别为φ108PVL型(3株),φ2958PVL型(1株)和φSa2mw型(2株)。结论院内分离的社区型MRSA的基因型和表型多样化,PVL噬菌体分型的多重PCR系统具有可应用性,应用此系统对鉴别具有异构六角形头部和伸长形头部的PVL溶原噬菌体有意义。
- 马笑雪孙丹丹罗恩杰
- 关键词：PVL基因噬菌体分型多重PCR
- 异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌检测方法的临床应用评价被引量：3
- 2012年
- 近年来，随着甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌（MRSA）感染率的上升和万古霉素的广泛使用，临床上出现了万古霉素敏感性下降的金黄色葡萄球菌，包括万古霉素中介金黄色葡萄球菌（vancomycin—intermediateStaphylococcusaureus，VISA）和异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌（heterogeneousvanco．mycin—intermediateStaphylococcusaureus，hVISA）。2006年，美国临床和实验室标准协会（CLSI，原NCCLS）将万古霉素对金黄色葡萄球菌的折点进行了更新，但并未对hVISA做出明确的定义，
- 胡健马笑雪田园孙丹丹
- 关键词：金黄色葡萄球菌临床应用评价万古霉素中介甲氧西林耐药感染率
- 金黄色葡萄球菌与宿主细胞自噬的相互作用
- 2022年
- 金黄色葡萄球菌是能够导致多种感染性疾病的重要病原菌。近年来,金黄色葡萄球菌和细胞自噬的相互作用引起了学术界的关注。本文聚焦于金黄色葡萄球菌诱导细胞自噬、金黄色葡萄球菌抑制细胞自噬和金黄色葡萄球菌在自噬作用下的结局,来阐述金黄色葡萄球菌与细胞自噬的相互关系。金黄色葡萄球菌可以通过经典信号转导途径、非经典途径、二元调控系统以及外膜囊泡等途径诱导宿主细胞自噬。金黄色葡萄球菌也可通过调节宿主细胞成分变化和利用自身产物来抑制细胞自噬。根据需要,金黄色葡萄球菌在自噬作用下可以被清除或者存活。阐明金黄色葡萄球菌与宿主细胞自噬作用的复杂关系,将有助于为临床应对金黄色葡萄球菌引起的感染性疾病提供治疗新思路。
- 赵琨马笑雪毕亚男黄怡王召凯韩昕君崔雨彤
- 关键词：细胞自噬金黄色葡萄球菌感染性疾病自噬作用宿主细胞信号转导途径
- 迷你SCC重组质粒的构建及ccr重组酶对SCCmec基因岛的整合功能研究
- 2011年
- 目的构建4组迷你SCC重组质粒载体,并导入受体菌N315ex中,验证并比较ccrC和ccrAB重组酶具有识别特异性DNA片段,进而把Ⅴ型或Ⅱ型SCCmec基因岛整合入细菌染色体上的功能。方法以转化株0342(pSR5C)和N315(pSR2AB)中抽提的染色体DNA为模板,PCR扩增DNA片段attⅤ和attⅡ,并连接到pYT3载体上,构建pYTattⅤ和pYTattⅡ;将PCR扩增的重组酶基因ccrC0342和ccrAB315分别交叉克隆到pYTattⅤ和pYTattⅡ上,构建重组质粒,并导入N315ex受体菌,在适宜温度培育下充分表达质粒,应用在不同温度培养下含药培养基上菌落数量变化及PCR方法,检测各转化株中质粒整合频率,验证质粒插入方向。结果成功构建4组迷你SCC重组质粒。转化株N315ex(pSR5attⅤ)、N315ex(pSR5attⅡ)和N315ex(pSR2attⅡ)中迷你SCC质粒以不同频度和特定方向整合入细菌染色体中,整合效率分别为8.600%、0.005%和7.200%。N315ex(pSR2attⅤ)中未见整合发生。结论与ccrAB仅可识别Ⅱ型SCCmec基因岛的attⅡ相比,ccrC重组酶可识别V型SCCmec的attⅤ和Ⅱ型SCCmec的attⅡ两组DNA片段,发挥其重组整合作用。
- 马笑雪孙丹丹罗恩杰
- 关键词：金黄葡萄球菌重组酶质粒载体
- 医院内流行社区型MRSA的分子生物学特点分析被引量：4
- 2010年
- 目的调查2007-2009年沈阳医院分离MRSA感染的临床类型,并解析MRSA克隆的分子生物学特点。方法记录分析125株MRSA感染者的临床数据;多重PCR法分型SCCmec基因岛;凝固酶试验测定菌株的凝固酶型;聚合酶链式反应（PCR）测定PVL、CNA、SEH、TSST1等毒素基因在菌株中的分布情况。结果在检测的125株MR-SA中,76.0%（95/125）起源于社区,20.8%（26/125）起源于医院。成年MRSA感染平均年龄39.7岁,以皮肤、粘膜感染最常见;儿童患者以上呼吸道感染患者多见。CNA阳性菌株占73.6%,全部分泌4型血浆凝固酶,并携带IVc型SCC-mec基因岛。结论 1株起源于社区,基因型为IVc SCCmec-coagulase4且携带CNA毒素基因的特定MRSA克隆在医院内蔓延。
- 马笑雪孙丹丹王斯李苗罗恩杰
- 关键词：金黄色葡萄球菌
- 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌染色体盒的研究进展被引量：8
- 2011年
- 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的产生是由甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA)获得外源性的SCCmec所致。MRSA菌株可以产生一种新的青霉素结合蛋白PBP2a,PBP2a降低了与β-内酰胺类抗生素的亲合力,从而对β-内酰胺类抗生素产生耐药性。PBP2a由mecA基因编码,mecA基因存在于葡萄球菌盒式染色体(Staphylococcal cassette chromosome mec,SCCmec)中,SCCmec是一种可移动的遗传元件,该元件还携带除mecA基因外的其他抗菌药物的耐药基因,造成多重耐药(Multidrug-resistance,MDR)。SCCmec目前主要分为8型,其中又分为若干亚型。SCCmec的基因型与MRSA的流行背景有关,不同地区的SCCmec基因分型分布可能不同。
- 孙丹丹马笑雪胡建罗恩杰
- 关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MECA基因耐药性
- 宿主基因多态性与结核病易感性的相关研究新进展被引量：3
- 2011年
- 结核病的高发已经给全球人类带来巨大的困扰。对结核病的预防和治疗越来越成为医疗工作者关注的问题,其中不同人群对结核杆菌的易感性引起了众多学者的关注。宿主基因的多态性可能影响宿主对结核杆菌的识别、吞噬及杀伤,进而影响结核病感染的发生和发展。认为此为结核病与宿主之间存在的重要内在联系。
- 石佳马笑雪
- 关键词：基因多态性结核
- ccr重组酶基因介导SCCmec基因岛的剪切功能研究被引量：3
- 2010年
- 目的构建携带ccrC和ccrAB重组酶基因的载体质粒,并导入耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)中,验证ccrC重组酶具有把Ⅴ型SCCmec基因岛从细菌染色体上特异性剪切下来的功能。方法以携带Ⅴ型SCCmec基因岛的菌株81/0342的染色体DNA为模板,应用PCR法扩增ccrC基因,再以携带Ⅱ型SCCmec基因岛的菌株N315的染色体DNA为模板,应用PCR法扩增ccrAB基因,分别克隆到温度敏感质粒pYT3上构建重组质粒pSR5C和pSR2AB,电穿孔技术交叉导入原野生菌株81/0342和N315中构建6株细菌转化株,在适宜温度培育下充分表达质粒,应用PCR法检测SCCmec基因岛从染色体上脱落,并连续10d传代培养细菌,应用影印实验检查细菌的药物敏感性变化。结果ccrC重组酶基因的PCR扩增产物为1.9kb,小于Ⅱ型SCCmec基因岛上携带的ccrAB重组酶基因。经鉴定证实成功构建了重组质粒pSR5C和pSR2AB,当菌株81/0342中导入重组质粒pSR5C和pSR2AB后,81/0342所携带的Ⅴ型SCCmec基因岛能从染色体上剪切下来,并以环状DNA结构存在于细菌中,而只有当N315中导入重组质粒pSR2AB时,N315所携带的Ⅱ型SCCmec基因岛才能脱落下来,SCCmec基因岛脱落的细菌成为对妥布霉素和头孢唑肟药物敏感的菌株。结论ccrC重组酶与ccrAB一样具有特异性剪切酶的功能,可单独介导Ⅴ型SCCmec基因岛的脱落,从而为社区MRSA所携带的Ⅴ型SCCmec基因岛在金黄色葡萄球菌之间的广泛传播提供了实验依据。
- 马笑雪黄惠颖孙丹丹罗恩杰
- 关键词：金黄色葡萄球菌重组酶质粒
- 金黄色葡萄球菌主要毒力因子对宿主固有免疫系统的影响被引量：4
- 2015年
- 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus),简称金葡菌,是重要的人类病原菌,是世界范围内细菌感染的主要原因。金葡菌通过产生多种毒素如p-v杀白细胞素(panton-valentine leukocidin,PVL),引起固有免疫细胞如巨噬细胞、中性粒细胞释放多种促炎因子导致机体炎症损伤,并诱导这些细胞发生凋亡坏死,而高效地逃避固有免疫系统的识别和消除,引起严重的感染性疾病。本文综述了金葡菌产生的alpha溶血素、PVL、可溶性调控蛋白(Phenol-soluble Modulin,PSM)和Staphopain的促炎机制及对宿主固有免疫细胞的杀伤作用,为临床治疗金葡菌引起的感染提供参考。
- 廖明喻逄龙杨娅丽马笑雪
- 关键词：金黄色葡萄球菌半胱氨酸蛋白酶
