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流感病毒识别糖链受体分子机制的研究进展被引量：11: 2012年; 近年来,由于流感病毒(influenza virus)不可预测的局部流行和有可能引发全球大流行,其一直是研究的热点课题之一.流感病毒表面糖蛋白血凝素(hemagglutinin,HA)特异识别宿主细胞表面的糖链受体是流感病毒感染宿主、进而复制并继续传播的生物学基础.影响流感病毒宿主特异性的两个主要因素是HA自身的变化(包括基因突变、重组、糖基化位点数量和糖基化位置的变化)和宿主细胞表面糖链受体的变化(包括糖链受体的类型、分布和分子构象的改变)等.因此准确掌握这些信息有助于人们进一步加强对流感病毒的防控.本文主要从糖组学角度概述了流感病毒识别糖链受体的分子机制,重点介绍流感病毒宿主细胞表面糖链受体的研究进展.; 钟耀刚秦棪楠孙士生陈闻天李铮; 关键词：流感病毒血凝素唾液酸

线粒体抗体芯片法对人肝脏代谢蛋白的发育分析(英文): 2012年; 目的分析比较代谢相关蛋白在成人和胎儿肝脏中的分布及其丰度。方法使用含19个线粒体单抗的蛋白芯片分析4种肝组织总蛋白样本(成人肝组织匀浆蛋白,胎肝匀浆蛋白,成人肝线粒体蛋白和胎肝线粒体蛋白),通过生物信息学工具对蛋白表达丰度进行比较,探讨蛋白质代谢相关的途径。结果醛氧化酶和羰基还原酶在成人肝线粒体中的表达较胎儿分别上调2.6和1.7倍。皮质类固醇11-β-脱氢酶同工酶1,环氧化物水解酶1和纤维蛋白原β链蛋白则分别下调1.7,1.9和2.2倍。环氧水解酶1和谷胱甘肽转移ω-1在成人和胎儿肝匀浆样本中存在显著差异。结论肝脏代谢相关蛋白的表达在成人肝脏和胚胎肝脏中存在显著的差别。该研究将有助于更好地理解代谢蛋白的发生和发展,并确定肝脏代谢标志物。; 颜桦陈超李铮; 关键词：肝脏代谢通路

H7N2禽流感病毒HA的分离纯化及其糖链谱研究被引量：1: 2015年; 血凝素(HA)是位于流感病毒囊膜表面的一种Ⅰ型跨膜糖蛋白,是流感病毒结合宿主细胞表面受体,介导病毒入胞的关键分子,也是中和抗体以及疫苗研制的重要靶标.HA表面糖基化与病毒毒力、感染宿主范围等密切相关,且其表面糖链变化会影响其结构与功能.然而目前关于流感病毒HA糖基化的研究主要集中在其糖基化位点上,而对于HA上详细的糖链结构知之甚少.本文应用禽流感病毒特异识别的唾液酸糖链(SAα2-3Gal)受体,制备特异的糖链磁性微粒复合物,进而从H7N2禽流感病毒中分离纯化HA,并采用SDS-PAGE及质谱技术进行鉴定.确定提取物系HA后,进一步利用凝集素芯片联合质谱技术研究禽流感病毒H7N2的HA表面糖型,结果显示H7N2禽流感病毒HA表面主要含有岩藻糖、半乳糖、N-乙酰半乳糖胺、甘露糖、N-乙酰葡糖胺等糖链结构,共获得16个糖链结构较为准确的寡糖,这些糖链可能与HA生物学功能相关.本研究有助于揭示禽流感病毒感染宿主的糖链作用机制,有助于设计制备针对HA相关的糖链疫苗.; 李学甜孙宇杜亚蓉王喜龙张沛欣钟耀刚马恬然王秀荣李铮; 关键词：禽流感病毒血凝素质谱

糖类相关基因芯片的设计与制备被引量：2: 2010年; 随着糖组学的发展,研究表明某些疾病如肿瘤等的发生伴随着体内糖蛋白表面糖链结构的变化,而糖链结构的形成与修饰经过糖基转移酶、糖苷酶和磺基转移酶的参与.本研究从Genebank等数据库中选取人类糖基转移酶基因127条、糖苷酶基因34条和磺基转移酶34条以及管家基因10条.通过对每个基因的mRNA序列进行探针设计,制备出一款糖类相关基因芯片,用于研究糖类相关基因的表达谱,旨在揭示疾病发生与糖类相关基因表达变化的关联性.制备的芯片应用于人肝癌细胞系SMMC-7721与正常肝细胞系Chang’s liver的研究,筛选出差异表达的基因34个,其中上调基因19个、下调基因15个.通过对2个上调基因和2个下调基因进行Realtime-PCR验证,得到了一致的实验结果.; 陈闻天刘晨于汉杰颜桦王岸潇陈超李铮; 关键词：基因芯片糖基转移酶糖苷酶

用于功能糖组学研究和监测禽流感病毒宿主特异性的新技术的开发: 2012年; 随着基因组学、蛋白质组学技术的迅猛发展以及现代仪器分析技术的突飞猛进和广泛应用，糖组学正在成为现代生命科学的前沿研究领域之一，并逐步渗透到生命科学研究的每一个领域。糖组学是从分析和破解一个生物或一个细胞全部糖类物质所含信息的角度人手，研究糖类物质的分子结构、表达调控、功能多样性以及糖类物质与疾病之间关系的科学。糖类物质同核酸一样是重要的生物信息分子，而且是基因信息的延续，在基因组学和蛋白质组学发展的同时，对糖组学的研究也显得非常迫切。随着分子生物学及细胞生物学的发展，; 关键词：糖组学宿主特异性禽流感病毒蛋白质组学技术现代生命科学细胞生物学

流感病毒糖蛋白糖链的作用和功能研究被引量：7: 2011年; 流感病毒是近几年的研究热点之一.糖链在流感病毒生活周期中发挥重要作用,例如宿主细胞表面的唾液酸化糖链是病毒侵染细胞时的特异性受体,宿主决定的病毒糖蛋白糖链结构影响病毒的宿主范围和毒力.本文从糖组学角度综述糖链在甲型流感病毒生活周期中的重要作用,着重阐述病毒血凝素糖基化的影响因素及其对病毒宿主范围、毒力的影响和在病毒演化中的作用.; 孙士生王秦哲李铮; 关键词：流感病毒糖链血凝素宿主毒力

基于超滤膜辅助的糖蛋白全N-连接糖链的富集和质谱解析(英文)被引量：7: 2014年; 糖基化作为一种常见的蛋白质翻译后修饰,对蛋白质的空间结构、生物功能等具有重要的影响.解析糖蛋白糖链结构有助于更清楚地认识糖蛋白及其功能.本研究建立了一种基于超滤膜富集血清中糖蛋白全N-连接糖链,并利用质谱技术对糖链结构进行分析的方法.根据糖蛋白及其糖链结构之间的分子质量差异,利用Millipore公司的10 ku超滤膜富集血清糖蛋白上酶解(PNGase F)释放的全N-连接糖链,并使用MALDI-TOF/TOF-MS解析糖链结构.通过该技术可以从血清中富集并鉴定到23种独特的N-连接的糖链结构,并且利用二级质谱进行了结构确认.该方法可以被用于从大量生物样本中富集糖蛋白全N-连接糖链,可以达到快速、高通量地解析糖蛋白N-连接糖链的目的.; 杨刚龙马恬然李铮; 关键词：超滤膜糖蛋白

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国际科技合作与交流专项项目(2009DFA32730)