内蒙古自治区自然科学基金(2012MS0526)
- 作品数：6 被引量：4H指数：1
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- 浅黄根须腹菌磷酸盐转运蛋白基因异源表达分析
- 2016年
- 为探究外生菌根真菌对油松磷吸收作用的分子机理,以油松优良乡土外生菌根真菌——浅黄根须腹菌Rhizopogon luteolus的磷酸盐转运蛋白基因(Rl PT)为对象,在缺陷酵母MB192中进行了异源表达研究。结果显示,该c DNA编码的蛋白质能够互补高亲和力磷酸盐转运蛋白pho84的功能;由不同pH条件下生长试验可知,该蛋白是一个与质子相偶联的运输蛋白;Rl PT测算的K_m值为57.90μmol/L磷酸盐;通过酸性磷酸酶的活性检测,进一步验证该基因是具有高亲和力磷酸盐转运蛋白功能的基因。激光共聚焦显微观察表明,该蛋白在低磷条件下多定位于酵母细胞膜上发挥其功能。
- 峥嵘王琚钢白淑兰
- 关键词：异源表达
- 球根白丝膜菌的分离及培养特性研究被引量：2
- 2015年
- 以油松外生菌根真菌球根白丝膜菌(Leucocortinarius bulbiger(Alb.et Schw.)Sing.)的子实体为材料,采用组织分离方法获得纯菌种,接种于不同培养基,筛选出最适基础培养基.运用单因素优化法筛选出最佳碳源、氮源、pH值,再经多因素正交试验筛选出菌丝体生长最佳碳源、氮源及pH值组合.结果表明,球根白丝膜菌菌丝体生长最适基础培养基为PACH,在此基础上筛选的菌丝体生长最佳碳源、氮源、pH值分别为葡萄糖、酒石酸铵、pH=7.0.正交试验筛选的菌丝体生长的最快三因素组合为蔗糖、磷酸二氢铵、pH值为7.0.
- 邰图雅春蕾斯日古楞峥嵘
- 关键词：组织分离法
- 浅黄根须腹菌的分离及培养特性研究
- 2014年
- 研究以油松外生菌根真菌浅黄根须腹菌(Rhizopogon luteolus)的子实体作为分离材料,通过采用组织分离方法获得纯菌种。以菌丝体生长速度和生长状况为参照标准,将菌种接种于不同培养基,筛选出菌丝体生长最适基础培养基为PACH,在此基础上通过单因素试验对其pH值,碳源,氮源等培养条件进行研究,结果表明,菌丝体生长最佳pH值,碳源及氮源分别为6.0、葡萄糖和酒石酸铵。通过pH值、碳源及氮源3个较优水平的正交试验,确定在(pH5.0+牛肉膏+蔗糖)组合中菌丝体生长速度最快,而在(pH6.0+牛肉膏+葡萄糖)组合中菌丝体生长状况为最佳。
- 邰图雅斯日古楞春蕾峥嵘
- 浅黄根须腹菌γ-actin基因的克隆及表达分析被引量：1
- 2014年
- 以油松的优良外生菌根真菌即浅黄根须腹菌为对象,用简并PCR法和RACE技术分离其γ-肌动蛋白基因(Rl-act)的全长cDNA序列。该全长序列为1 339 bp,包含一个1 128 bp的开放阅读框(ORF),编码375个氨基酸,5'端非翻译区(5'UTR)95 bp,3'UTR长度116 bp。Port Param软件在线分析结果表明,该cDNA所编码的蛋白质理论等电点为5.01,相对分子质量为94.929 kD,具有真菌γ-actin基因3个保守特征序列。Blast同源性检索结果表明,Rl-act序列与12种担子菌actin序列同源性均在97%以上,与同为外生菌根真菌的双色蜡蘑actin的亲缘关系最近。Rl-act基因在不同碳源及磷水平培养条件下表达量基本一致,验证了该基因作为分子内标的可靠性。
- 峥嵘王琚钢邰丽华白淑兰牛艳芳
- 关键词：肌动蛋白CDNA克隆基因表达
- 球根白丝膜菌γ-actin基因的克隆及表达分析被引量：1
- 2016年
- 根据真菌肌动蛋白(actin)基因保守区序列设计引物,用简并PCR法和RACE技术分离得到球根白丝膜菌(Leucocortinarius bulbiger)γ-肌动蛋白基因(Lb-act)的全长cDNA序列。该序列全长为1 357 bp,包含一个1 137 bp的开放阅读框(ORF),编码378个氨基酸,5'端非翻译区(5'UTR)92 bp,3'UTR长度128 bp。Port Param软件在线分析结果表明,该cDNA所编码的蛋白质理论等电点为5.12,相对分子质量为95.022 kD,具有真菌γ-actin基因3个保守特征序列。Blast同源性检索结果表明,Lb-act氨基酸序列与担子菌肌动蛋白序列有较高的相似性,其与双色蜡蘑的肌动蛋白氨基酸序列的亲缘关系最近。Lb-act基因在不同碳源及磷水平培养条件下表达量基本一致,验证了该基因作为分子内标的可靠性。
- 张虹峥嵘
- 关键词：肌动蛋白CDNA克隆
- 浅黄根须腹菌磷酸盐转运蛋白基因克隆及表达分析
- 2017年
- 研究以油松(Pinus tabulaeformis)的优良外生菌根真菌-浅黄根须腹菌(Rhizopogon luteolus)菌丝体为对象,采用简并PCR和末端克隆技术分离了其磷酸盐转运蛋白基因(RlPT),所分离的RlPT cDNA全长序列2017 bp,包含一个1 653 bp的开放阅读框(open reading frame,ORF),编码550个氨基酸;基因组DNA长度约为2 324 bp,包含11外显子和10个内含子,保守结构域搜索显示属于MFS超基因家族。结果表明:蛋白序列的系统进化树显示与浅黄根须腹菌(Rhizopogon luteolus)的磷酸盐转运蛋白的亲缘关系最近。qPCR分析显示在磷饥饿时,该基因表达显著提高。
- 宝日玛峥嵘白淑兰
- 关键词：克隆
