国家自然科学基金(31302077)
- 作品数：7 被引量：5H指数：1
- 相关作者：郑葵阳汤仁仙颜超华慧张波更多>>
- 相关机构：徐州医学院徐州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏高校优势学科建设工程资助项目家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Excretory-secretory products of helminthes directly promote the generation of B10 cells, but inhibited the generation of Th17 cells in vitro
- Background: Excretory-secretory products(ESPs)released by helminthes were well-known to regulate the T cell re...
- Wei PanRenxian TangChao YanYujuan ShenJianping CaoKuiyang Zheng
- 华支睾吸虫感染后血清IL-33检测及其意义
- 2016年
- 目的探讨华支睾吸虫感染后血清白细胞介素-33(IL-33)的检测及临床意义。方法建立不同品系小鼠华支睾吸虫感染模型,采用ELISA法对感染组和正常对照组小鼠血清中IL-33水平进行测定。同时检测45例华支睾吸虫感染患者及16名健康对照者血清中IL-33水平。结果感染华支睾吸虫后,小鼠血清中IL-33水平明显增高,且随感染时间的增加而逐渐增高。感染14 d时,病理损伤严重的FVB小鼠血清中IL-33水平明显高于病理损伤较轻的Balb/c小鼠,差异有统计学意义(P<0.05)。感染28d时,两种品系小鼠血清中IL-33水平显著高于感染0d时,差异有统计学意义(P<0.01)。此外,与健康对照相比,华支睾吸虫感染患者血清中IL-33水平也明显增加(P<0.01)。结论华支睾吸虫感染后,血清中IL-33水平升高,可作为辅助诊断的参考指标。
- 于倩程晓丹马锐颜超郑葵阳
- 关键词：华支睾吸虫白细胞介素-33
- IL-33参与华支睾吸虫感染后小鼠肝脏嗜酸性粒细胞的维持被引量：1
- 2016年
- 目的探讨在华支睾吸虫感染中,肝脏局部高水平的嗜酸性粒细胞浸润现象是否与内源性白细胞介素33(IL-33)有关。方法建立华支睾吸虫感染小鼠模型,利用流式细胞术检测感染小鼠肝脏嗜酸性粒细胞比例变化;利用抗ST2抗体阻断IL-33与ST2的作用,观察对感染后小鼠肝脏局部嗜酸性粒细胞浸润程度的影响。结果华支睾吸虫感染后,肝脏嗜酸性粒细胞比率显著增多。阻断IL-33与ST2的作用,能显著降低感染小鼠肝脏局部嗜酸性粒细胞比例(12.07%±1.58%vs 7.69%±0.68%;P<0.01)。结论华支睾吸虫感染后,IL-33参与肝脏局部高水平嗜酸性粒细胞的维持。
- 于倩沈莉萍程晓丹颜超汤仁仙郑葵阳
- 关键词：华支睾吸虫嗜酸性粒细胞
- 华支睾吸虫脂肪酸结合蛋白基因的克隆、表达及免疫原性分析被引量：3
- 2015年
- 目的：克隆表达华支睾吸虫脂肪酸结合蛋白（ Clonorchis sinensisfatty acid binding protein，CsFABP），并对其免疫原性进行分析。方法根据编码CsFABP的已知基因序列设计合成一对引物，应用RT－PCR技术扩增编码CsFABP的基因片段。将扩增的CsFABP的基因片段克隆到原核质粒pET30a（＋）中，转化入大肠埃希菌（ E． coli） DH5α中，经含卡那霉素琼脂平板筛选，小量抽提质粒，经双酶切、PCR及测序鉴定阳性克隆。将阳性重组质粒转化入E．coli BL21中，经异丙基－β－D－硫代半乳糖苷（ IPTG）诱导表达，表达产物经十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ SDS－PAGE）、考马斯亮蓝染色、Western blot分析鉴定。结果经酶切、菌液PCR以及测序确认，成功构建重组质粒pET30a（＋）－CsFABP，并在E．coli BL21中高效表达。 Western blot试验证实表达的Cs-FABP能被特异的兔抗华支睾吸虫免疫血清识别。结论本研究成功构建重组质粒pET30a（＋）－CsFABP，获得的CsFABP表达蛋白质具有一定的反应原性。
- 张波张蓓蓓李波华慧李向阳刘转转颜超付琳琳汤仁仙郑葵阳
- 关键词：华支睾吸虫脂肪酸结合蛋白原核表达免疫原性
- 混合噬菌体模拟抗原用于华支睾吸虫病诊断的研究
- 2014年
- 目的观察混合噬菌体模拟抗原用于华支睾吸虫病诊断的价值。方法用斑点免疫金银染色法（Dot—IGSS）检测、筛选出阳性的噬菌体单个克隆，将免疫活性强的克隆组合为不同的混合噬菌体抗原。分别用华支睾吸虫成虫抗原和混合噬菌体抗原检测采自华支睾吸虫病流行区居民血清中抗华支睾吸虫抗体。结果用免疫反应性最强的噬菌体克隆P1＋P6＋P9组合作为混合噬菌体抗原，以Dot—IGSS法检测680份流行区居民血清，混合噬菌体抗原检测和成虫抗原检测的抗体阳性率分别为17．20％和19．26％，差异无统计学意义。结论混合噬菌体模拟抗原与华支睾吸虫成虫抗原有相似的敏感性和特异性，并可在实验室成批制作生产，有助于提高华支睾吸虫病免疫诊断的效能。
- 付琳琳颜超赵昆
- 关键词：华支睾吸虫病
- The expression dynamics of transforming growth factor-β/Smad signaling in the liver fibrosis experimentally caused by Clonorchis sinensis
- Liver fibrosis is a hallmark of clonorchiasis suffered by millions people in Eastern Asian countries.However,l...
- Chao YanLin WangBo LiBei-Bei ZhangBo ZhangYan-Hong WangXiang-Yang LiJia-Xu ChenRen-Xian TangKui-Yang Zheng
- 关键词：SINENSISFIBROSISTRANSFORMINGTGF-Β/SMAD
- 小鼠肝内胆管上皮细胞的分离与鉴定被引量：1
- 2015年
- 为建立一种简单可靠的小鼠肝内胆管上皮细胞(MIBECs)分离培养方法,用Ⅳ型胶原酶进行门静脉灌注,取出肝内胆管,用DNaseⅠ、pronase E和Ⅳ型胶原酶分类消化,小鼠肝内胆管组织细小、均匀的细胞团培养于含100mL/L胎牛血清(FBS)和10ng/mL表皮生长因子(EGF)、肝细胞生长因子(HGF)和胰岛素转铁蛋白硒(ITS)的DMEM/F12培养基中。细胞贴壁后,利用细胞角蛋白19免疫荧光法鉴定目的细胞。在培养的过程中,用CCK8测定细胞的生长曲线。结果显示,成功分离出MIBECs,细胞纯度约95%。细胞培养3d^7d内呈对数生长状态。以上结果表明本分离培养方法是一种简单可靠的小鼠肝内胆管上皮细胞分离纯化培养技术。
- 王艳红张波李波张蓓蓓于倩颜超华慧汤仁仙郑葵阳
- 关键词：小鼠肝内胆管上皮细胞
- 华支睾吸虫排泄分泌抗原诱导RAW264.7细胞IL-33表达的研究
- 2016年
- 目的探讨华支睾吸虫排泄分泌抗原(ESA)对巨噬细胞系RAW264.7白介素33(IL-33)表达的影响,并探讨其机制。方法分别在ESA(60μg/ml)与RAW264.7细胞作用2、4、8、12h时检测IL-33 mRNA表达水平。用抗TNF-α中和抗体阻断TNF-α作用,通过RT-PCR及Western blot检测对ESA诱导RAW264.7细胞IL-33表达变化的影响。结果 ESA诱导RAW264.7细胞IL-33mRNA水平增高(P<0.05);利用TNF-α中和抗体阻断TNF-α作用,可显著降低IL-33mRNA的含量(P<0.05)。但ESA对IL-33蛋白水平的表达无显著影响(P>0.05)。结论 ESA可诱导RAW264.7细胞IL-33mRNA高表达,该作用部分依赖于自分泌的炎性因子TNF-α作用。
- 于倩程晓丹马锐华慧颜超汤仁仙郑葵阳
- 关键词：华支睾吸虫巨噬细胞肿瘤坏死因子-Α
- TLR5在华支睾吸虫感染C3H/HeN小鼠肝脏中表达的初步分析 TLR5在华支睾吸虫感染C3H/HeN小鼠肝脏中表达的初步分析
- 2014年
- 目的 分析小鼠华支睾吸虫感染后小鼠肝脏中Toll样受体5（TLR5）的表达情况.方法 随机选取C3H/HeN雌性小鼠,经口感染35个华支睾吸虫囊蚴建立感染模型.分别在感染0（对照组）、1、7、28、56、84天处死小鼠,取肝脏组织行如下处理：①苏木精-伊红（H-E）染色观察小鼠肝脏病变;②采用免疫组织化学染色观察小鼠肝脏组织TLR5表达情况;③采用逆转录聚合酶链反应（RT-PC R）检测肝脏中TLR5的表达水平.结果 ①肝脏病理结果显示,与对照组小鼠相比,感染第1、7天小鼠肝脏汇管区出现炎症细胞浸润,第28天可观察到肝细胞排列紊乱,出现纤维组织增生和胆管增生;②免疫组织化学染色显示,TLR5在感染华支睾吸虫第1天、7天、28天的小鼠肝内表达增高,其主要表达于汇管区肝细胞、肝胆管上皮细胞和纤维化区域的成纤维细胞;③RT-PCR结果显示,小鼠肝脏中TLR5 mRNA表达量在感染第1天、7天、28天明显高于对照组.结论 C3H/HeN小鼠感染华支睾吸虫可上调肝脏组织TLR5的表达,提示TLR5可能在宿主抵抗华支睾吸虫感染中起着一定的作用。
- 徐江涛张波王林王艳红张曼曼华慧颜超刘相叶刘转转汤仁仙郑葵阳
- 关键词：华支睾吸虫
