国家自然科学基金(81072010)
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 相关作者：王舒蓓徐莹孙蕴伟陈平王海郦更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 结肠癌细胞微小核糖核酸-200c表达和上皮间质转化与吉非替尼敏感性关系
- 2013年
- 目的 探讨微小核糖核酸（miRNA）-200c及上皮间质转化（EMT）与结肠癌细胞对吉非替尼治疗敏感性的关系.方法 细胞计数试剂盒8（CCK-8）法检测吉非替尼对4种人结肠癌细胞系HT29、SW620、HCT116、SW480的生长抑制作用；以实时定量PCR法检测4种结肠癌细胞中miRNA-200c,上皮标志物（E-钙黏蛋白）,间质标志物[波形蛋白、具锌指E盒结构的同源异性盒1（ZEB 1）]mRNA水平表达,Western印迹检测E-钙黏蛋白、波形蛋白、ZEB 1蛋白水平表达.外源性上调或下调miRNA-200c表达,观察EMT相关基因表达变化及细胞对吉非替尼敏感性的变化.结果 HT29细胞对吉非替尼最为敏感[半数抑制浓度（IC50）=（7.70±0.31） μmol/I],其miRNA-200c与E-钙黏蛋白表达量均为最高,波形蛋白及ZEB 1表达水平极低；HCT116及SW480细胞系对吉非替尼为中度敏感[IC50=（11.88±0.97）,（16.63士0.45）μmol/L],其miRNA-200c、E-钙黏蛋白呈中等程度表达；SW620细胞系对吉非替尼最不敏感[IC50=（26.43±3.68） μmol/L],miRNA-200c与E-钙黏蛋白表达量最低,波形蛋白及ZEB 1表达量均显著高于其他3种细胞系.外源性上调miRNA-200c表达后,SW620细胞中E-钙黏蛋白表达上调,ZEB 1及波形蛋白表达下调,同时细胞对吉非替尼的敏感性亦显著提高；相反,外源性下调miRNA-200c表达后,HT29细胞中E-钙黏蛋白表达下调,ZEB 1及波形蛋白表达上调,同时细胞对吉非替尼的敏感性显著降低.结论 miRNA-200c可能通过调控EMT,上调E-钙黏蛋白表达,进而影响结肠癌细胞对吉非替尼的敏感性.
- 徐莹王舒蓓王海郦孙蕴伟
- 关键词：微RNAS喹唑啉类钙黏着糖蛋白类
- 联合干扰素-α和吉非替尼对结肠癌细胞的生物学作用研究
- 2011年
- 目的探讨干扰素（IFN）-α、吉非替尼对人结肠癌细胞系HCTll6的增殖、凋亡作用。方法采用结肠癌细胞HCTll6为研究对象，观察不同浓度IFN—α（50U／ml和100U／ml）、吉非替尼（0．5μmol／L，2．5μmol／L和5．0μmol／L）单独和联合应用（IFN—α50U／ml＋吉非替尼0．5μmol／L）和不同作用时间点（作用24、48和72h）对细胞的生物学作用。四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测药物对细胞的增殖抑制作用，光学显微镜观察细胞形态变化，流式细胞学检测细胞凋亡情况。采用SPSS13．0软件进行统计学分析，两组间比较采用t检验，多组数据比较采用单因素方差分析。结果IFN—α、吉非替尼单独和联合应用均能明显抑制HCT116的增殖（P值均〈0．05），且抑制程度与药物作用时间和药物浓度之间存在依赖效应。药物作用下可观察到细胞呈现凋亡形态学改变，流式细胞学结果显示HCT116细胞凋亡率明显增加，IFN—α（50U／ml）、吉非替尼（0．5μmol／L）单独和联合应用72h后细胞凋亡率分别为15．6％±0．6％、13．6％±0．4％和31．2％±0．3％明显高于对照组的6．8％±0．3％，差异均有统计学意义（P值均〈0．01）。结论IFN—α、吉非替尼均能抑制HCT116细胞生长并诱导细胞凋亡，两者联合应用具有协同增效作用。
- 张树贤陈平王舒蓓徐莹孙蕴伟
- 关键词：干扰素-Α喹唑啉类细胞HCT116细胞细胞增殖凋亡
