国家自然科学基金(81171609)
- 作品数：15 被引量：55H指数：4
- 相关作者：姚苹苹徐芳张云朱函坪杨章女更多>>
- 相关机构：浙江省疾病预防控制中心中国人民解放军南京军区军事医学研究所南京医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金江苏省科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 浙江省天台县2011-2018年汉坦病毒基因型别和进化变异研究被引量：4
- 2019年
- 目的研究2011-2018年肾综合征出血热(HFRS)国家监测点浙江省天台县汉坦病毒(HV)的基因型别和进化变异情况,了解天台县HV分子流行病学特点.方法将天台县2011-2018年HV抗原阳性的鼠肺标本超声后提取核酸,利用HV型特异性引物,应用巢式PCR对部分M片段进行扩增分型和序列测定,将天台县2011-2018年的HV序列与国内外其他已知的HV序列进行比较,以明确该地区的基因型别,分析病毒的进化变异情况.结果HV抗原阳性的67份鼠肺标本经型特异性引物巢式PCR扩增后31份标本为阳性,其中30份为汉滩病毒(HTNV)、1份为汉城病毒(SEOV),31份PCR阳性鼠肺均来自黑线姬鼠.31份巢式PCR阳性产物的部分M片段核苷酸序列有30株分布在HTNV单元群,1株分布在SEOV单元群.HTNV单元群中的天台T2018-130株与天台其余29株及国内外其他株同源性为84.8%~87.9%,差异较大,天台其余29株亲缘关系较近;SEOV发生群中的T2016-31株来自黑线姬鼠的鼠肺标本,与SEOV天台以往分离株ZT71株、ZT10株和浙江温州分离株Z37株在系统发生树上分布于同一或临近分支.结论浙江省天台县HV流行的主要型别HTNV基因表现出明显的地理聚集现象,但也存在着基因差异较大的变异株T2018-130株;同时从病毒基因序列分析证实SEOV T2016-31株存在于黑线姬鼠中,可能意味着在SEOV进化过程中病毒在宿主间发生了“溢出”现象.
- 姚苹苹陈钢徐芳杨章女陈晨孙一晟卢杭景庞卫龙张云朱函坪项海青
- 关键词：汉坦病毒基因型
- 浙江省2013年肾综合征出血热流行特征及监测分析被引量：21
- 2015年
- 目的分析浙江省2013年肾综合征出血热（HFRS）疫情及宿主种群分布和带病毒情况,为制定下一步防控措施提供科学依据。方法采用描述性流行病学方法分析HFRS疫情三间分布特征,在全省5个HFRS监测点采用夹夜法捕获鼠形动物,分别取其肺和血清,用免疫荧光法检测汉坦病毒抗原和抗体,分析浙江省鼠形动物种群分布及其带病毒情况。结果 2013年浙江省共报告HFRS病例527例,发病率为0.9622/10万,比2012年升高了3.89%,无死亡病例。病例主要集中在宁波、台州、绍兴、衢州、丽水等地区,全省除舟山市外各地级市均有病例报告;发病高峰时间主要集中在5-6月和12月前后;浙江省HFRS的高发人群为20~65岁年龄组,占发病总数的93.17%（491/527）;全省5个监测点鼠密度监测中共布放有效鼠夹13 785夹次,捕鼠546只,平均鼠密度为3.96%;共检测鼠血清678份,阳性80份,阳性率为11.80%;共检测鼠肺669份,阳性44份,带病毒率为6.58%,5个监测点HFRS抗体阳性率差异有统计学意义（χ2=30.962,P〈0.05）;HFRS病原携带率差异亦有统计学意义（χ2=9.83,P〈0.05）。结论 2013年浙江省HFRS疫情较2012年有上升趋势,宿主动物密度和带病毒率较高,需采取措施进行预防控制。
- 张蓉姚苹苹徐芳孙继民吕华坤卢苗贵施旭光任江萍龚震宇
- 关键词：肾综合征出血热数据分析
- 汉坦病毒浙江分离株的基因分型被引量：1
- 2012年
- 目的对浙江省汉坦病毒（HV）分离株进行基因分型，为制定肾综合征出血热防制对策提供科学依据。方法应用RT—PCR的方法，使用汉坦病毒型特异性引物，对汉坦病毒浙江分离株型特异性M和S片段进行扩增和测序，并与其他已知病毒序列进行比较，以明确浙江株的基因型和亚型。结果本研究中18株HV浙江株11株为汉滩型（HTN），分为5个亚型，另7株为汉城型（SEO），分为3个亚型。HTNV ZNB-1、ZNB-2毒株和A3毒株以及SEOV Gou3、ZJ5毒株在种系发生上与其他HTNV和SEOV明显不同，Gou3和ZJ5株在SEOV发生群中构成一独立分支，比较核苷酸序列发现，ZNB-1和ZNB-2病毒M片段除与HTNV Nc167株有较高的同源性外（88．7％），与其他HTNV的同源性在69．7％-74．0％之间，A3株M片段除与HTNV B78株有较高的同源性外（99．7％），与其他HTNV的同源性在73．6％～76．3％之间。结论浙江省是汉坦病毒中汉滩型和汉城型的混合型疫区，HTNV至少有5个亚型，SEOV至少有3个亚型，而且浙江省存在着特殊亚型的HTN毒株以及SEO毒株。
- 徐芳姚苹苹朱函坪王洁钱磊胡群童淑梅邓小昭谢荣辉杨章女张云朱智勇
- 关键词：汉坦病毒基因型
- 量子点荧光探针用于汉坦病毒重组抗原的检测被引量：4
- 2012年
- 目的应用量子点荧光探针对汉坦病毒(Hantavirus,HV)重组抗原进行检测。方法合成水溶性量子点荧光纳米颗粒,并在其表面修饰G蛋白和anti-HV抗体作为量子点荧光探针,对HV重组抗原进行检测并优化检测条件。结果量子点与抗体的最佳偶联条件:pH 6.0、反应时间2 h、抗体浓度为20μg/ml。用本方法检测HV重组抗原的最低检测值为5 ng/ml。结论该探针能有效的识别HV抗原,且操作简便快速,为HV重组抗原的检测和肾出血热综合征的诊断提供了新方法。
- 陈琼郑锦峰孙军红姚苹苹王洁李晶邓小昭王长军朱函坪张云
- 关键词：汉坦病毒重组抗原
- 基于汉坦病毒疫苗研究现状及效果的文献分析
- 2021年
- 为了解国内外关于汉坦病毒疫苗的相关研究现状及疫苗效果,本文检索1990年1月1日至2020年6月10日期间发表在中国知网和PubMed上的关于汉坦病毒疫苗的相关文献,并基于文献分析的方法了解当前关于汉坦病毒疫苗的研究现状及效果。本研究共纳入符合标准的362篇中英文文献,其中,102篇为关于汉坦病毒相关疫苗研究的实验研究,260篇为实施疫苗接种后的效果评价,含23篇为疫苗接种后发生严重不良反应的报道。结果表明,目前关于汉坦病毒疫苗的研究主要在重组DNA疫苗的有效性及安全性评价以及重组疫苗中递送载体的发现方面;目前应用于中国的灭活疫苗主要以I、II型及双价灭活疫苗为主,且中短期免疫效果较好。重组DNA疫苗是当前汉坦病毒疫苗研究的热点,不同基因型汉坦病毒的疫苗研究对预防汉坦病毒相关疾病的暴发具有重要意义。疫苗接种一年后加强免疫可更有效地预防汉坦病毒的暴发,此外还应重视对重点地区16~60岁以外健康人群的疫苗接种覆盖。
- 王秋伟潘雅东艾乐乐朱长强张云谭伟龙
- 关键词：汉坦病毒疫苗
- 汉坦病毒S基因的克隆及体外转录被引量：2
- 2014年
- 目的:通过基因克隆和体外转录,获得汉坦病毒汉滩型76118株及汉城型R22株S基因的RNA全长cRNA,为汉坦病毒病原学检测提供阳性定量标准品。方法:设计汉滩型76118株和汉城型R22株S基因克隆引物,PCR获得相应片段,分别克隆至含双启动子的PCRⅡ载体中,测序鉴定无误后,重组质粒分别经内切酶SpeⅠ、SacⅠ线性化,用T7 RNA聚合酶进行体外转录,产物经DNase处理、纯化后测定浓度,经RT-PCR验证。结果:获得汉滩型76118株及汉城型R22株S基因的cRNA片段,并可准确定量其拷贝数,76118株和R22株的质量浓度分别为80、17.58 ng/μL。结论:获得的cRNA样品可作为汉坦病毒核酸快速检测方法的阳性定量标准品。
- 郝丽娜胡丹吕恒张锦海张凤玉龚秀芳李丙军朱进潘秀珍姚苹苹张云王长军陈建华
- 关键词：汉坦病毒克隆体外转录
- 肾综合征出血热伴多种并发症1例报告并文献复习
- 2023年
- 肾综合征出血热是一种由汉坦病毒感染引起的传染病,起病急,易出现多种并发症,主要依靠实验室病原学检测结果进行最终诊断。本文报告了1例伴多种并发症肾综合征出血热病人,对其病例特征和病程进展进行分析,以期为该病诊疗和防治提供一定参考。
- 岳娜洪倩朱长强艾乐乐李文豪谭伟龙
- 关键词：汉坦病毒感染肾综合征出血热病例报告
- 汉坦病毒感染的量子点标记免疫检测研究
- 2011年
- 目的 应用量子点荧光标记技术和间接免疫法,建立一种新的汉坦病毒（HV）感染的免疫检测技术.方法 采用碳二亚胺交联法,在水溶性量子点表面修饰protein G和羊抗人IgG.以HV抗原片为固相载体,QDs-PG-IgG复合物为标记二抗,检测待检血清中的HV特异性抗体,并对检测条件进行优化.结果 量子点与羊抗人IgG的最佳偶联条件：反应时间2h、pH 6.0、羊抗人IgG浓度20 μg/ml.检测体系的最佳反应条件：量子点标记二抗的最适工作浓度为1：200,HV感染阳性血清检测的最大稀释度为1：1280.结论 成功建立了简便、快速的HV感染的量子点标记免疫检测方法,该方法具有良好的灵敏度和特异性,抗荧光猝灭性强,为进一步实现HV抗体的单分子定量检测奠定基础.
- 沈雅王洁巴龙姚苹苹邓小昭王长军朱函坪张云杨占秋
- 关键词：汉坦病毒属荧光抗体技术
- 浙江省2008-2011年啮齿动物中汉坦病毒的分离及鉴定被引量：8
- 2013年
- 目的分析浙江省肾综合征出血热(HFRS)疫区鼠形动物携带汉坦病毒状况及其型别。方法应用直接免疫荧光试验和RTPCR方法检测汉坦病毒抗原和核酸,阳性者用长爪沙鼠和VeroE6细胞进行病毒分离,对分离株的M片段基因进行序列测定和分析。结果 2008-2011年在浙江省HFRS疫区捕获的鼠形动物中以黑线姬鼠为优势鼠种;从该鼠鼠肺中共分离到6株汉坦病毒,序列分析表明分离株均为汉滩型汉坦病毒,其中Z521、524、534为H7亚型,TT-27、T-43、R88可能为新亚型;6株分离株之间的基因同源性较高,并与以往浙江省分离株具有较高同源性。结论 2008-2011年浙江省HFRS疫区鼠间存在汉滩型汉坦病毒流行。
- 徐芳朱函坪姚苹苹胡丹张云谢荣辉杨章女钱磊朱进
- 关键词：汉坦病毒病毒分离M基因啮齿动物
- 汉坦病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：8
- 2014年
- 目的通过建立汉坦病毒实时荧光定量PCR检测方法,快速准确地检测汉坦病毒。方法根据汉滩型和汉城型汉坦病S片段基因的序列分别设计特异性探针引物,使用含有目的基因片段的重组质粒标准品绘制标准曲线,建立检测两型汉坦病毒的实时荧光定量PCR方法。结果建立的检测方法特异性良好,与其他常见病原不发生交叉反应;最低检测限为101copies/μl,灵敏度高;不同梯度定量模板的拷贝数的对数值与Ct值之间线性关系表达式分别为y=-3.4607x+40.988(HTN),y=-3.5307x+39.356(SEO),扩增效率分别为92.2%(HTN)和92.6%(SEO),相关系数R2分别为0.9968(HTN)和0.9997(SEO),呈良好的线性关系,且重复性好。结论建立的实时荧光定量PCR灵敏度高,重复性好,可用于汉坦病毒的快速检测,并可初步辨别汉滩型和汉城型汉坦病毒,对肾综合征出血热的病原早期诊断和流行病学调查有较好的应用价值。
- 胡丹郝丽娜李丙军张锦海吕恒张凤玉龚秀芳耿美玲谭维国操敏郑峰朱进姚苹苹张云王长军
- 关键词：汉坦病毒荧光定量PCR
