国家科技支撑计划(2011BA101B03)
- 作品数：14 被引量：81H指数：6
- 相关作者：马小军莫长明冯世鑫白隆华唐其更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院广西药用植物园广西大学更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学天文地球环境科学与工程更多>>
- 罗汉果葡萄糖基转移酶基因的克隆及原核表达被引量：6
- 2013年
- 从罗汉果(Siraitia grosvenorii)转录组中获得一条与罗汉果甜苷Ⅴ生物合成相关的葡萄糖基转移酶(UDPG)的unigene片段,以罗汉果授粉后70d的果实RNA为模板,利用RACE和RT-PCR技术克隆UDPG全长基因,将克隆得到的SgUDPG1基因连接到原核表达载体pEASY-E1上,构建融合表达载体,转化到大肠杆菌BL21(DE3),通过IPTG诱导表达,重组蛋白纯化,SDS-PAGE检测表达产物以及Western-blotting和质谱鉴定蛋白产物。结果表明,获得了1条SgUDPG1,全长为1959bp,开放阅读框ORF为1365bp,编码1条454aa的肽链,理论分子量为51.2kD,等电点为5.39,具有植物中次生代谢产物糖基转移酶特有的保守结构域PSPG-boxmotif。SgUDPG1在授粉后50d和70d的果实中表达逐渐升高,是对照授粉后3d的5.16倍和13.12倍,与果实中甜苷Ⅴ含量呈相同趋势。此基因的ORF可以在大肠杆菌中表达,并且可以纯化出比理论分子量大5.3kD的融合蛋白,通过Western-blotting和质谱鉴定,确定该蛋白属于罗汉果葡萄糖基转移酶。
- 邢爱佳马小军莫长明潘丽梅韦鹏霄韦鹏霄唐春风
- 关键词：葡萄糖基转移酶RACE原核表达融合蛋白
- 罗汉果花芽分化过程中形态及其激素水平变化特征被引量：21
- 2015年
- 采用石蜡切片和酶联免疫法（ELISA）对罗汉果雄性、雌性、两性花芽分化过程的形态和激素水平变化进行观测,为罗汉果开花调控和品种选育提供科学依据。结果表明：（1）罗汉果雄性、雌性、两性花的花芽分化过程均可分为花芽未分化期、花芽分化初期、花序分化期、萼片原基分化期、花瓣原基分化期、雄蕊原基分化期和雌蕊原基分化期7个阶段。雄蕊原基分化期前,3种花芽分化过程无明显差异,各时期形态特征均依次为：茎端呈圆锥状（花芽未分化期）→茎端经半球形变成扁平状（花芽分化初期）→距茎端5~7节位处分化出穗状花序（花序分化期）→小花原基周围形成5个萼片原基（萼片原基分化期）→萼片原基内侧形成5个花瓣原基（花瓣原基分化期）。雄蕊和雌蕊原基分化期,3种花芽分化过程存在明显差异,雄蕊原基内侧出现雌蕊原基后,雄花芽雄蕊原基继续发育成雄蕊,雌蕊原基停滞生长,退为一个小突起;雌花芽雌蕊原基继续发育成雌蕊,雄蕊原基生长缓慢,退化为小花丝;两性花芽雌蕊和雄蕊原基均继续发育,形成外观正常的雌蕊和雄蕊。（2）内源激素脱落酸（ABA）、赤霉素（GAs）和玉米素核苷（ZR）含量在3种花芽分化过程中变化规律相似,即ABA含量在花芽生理分化期降低,花芽形态分化期升高,而GAs和ZR含量则基本保持不变;吲哚乙酸（IAA）含量在3种花芽分化过程中变化存在明显差异,雌花芽IAA含量在花芽生理分化期升高,花芽形态分化期逐渐降低,而雄性和两性花芽的IAA含量则基本保持不变。ABA/GAs、ABA/IAA、ZR/IAA和ZR/GAs激素含量比值在3种花芽分化过程中变化规律相似,ABA/GAs在花芽生理分化期降低,花芽形态分化期升高,而BA/IAA、ZR/IAA和ZR/GAs则基本保持不变。研究认为,罗汉果花芽分化过程经历一个＂两性期＂,高ABA含量和ABA/GAs比值有利于罗汉�
- 莫长明涂冬萍黄杰马小军潘丽梅姚绍嫦冯世鑫白隆华
- 关键词：花芽分化内源激素
- 罗汉果主产区土壤重金属潜在生态危害评价被引量：6
- 2013年
- 对桂北罗汉果主产区8套地层上A层土壤及罗汉果的果实中5种重金属元素(As、Cd、Pb、Hg、Cr)含量进行测试分析,利用区域土壤背景值分析了不同地层上A层土壤的质量,并采用Hakanson潜在生态危害指数法分析了土壤重金属元素的潜在生态危害程度。研究结果表明:罗汉果主产区8个地层上的A层土壤污染程度属于中度及中度以上,其中K层为中度污染区,-Cq、Pt21地层区则为重度污染区,产生污染的重金属元素主要为Pb、Cr、As;8个地层土壤上生长的罗汉果的果实中5种重金属元素的含量远低于国家绿色行业标准值,表明罗汉果在桂北喀斯特生态区具有抗土壤污染和果实优质的特征,应加大对该资源植物的开发力度,促进区域经济发展和生态环境的建设。
- 王娟韩子钧彭培好曾其国
- 关键词：潜在生态危害土壤重金属
- 遮荫处理对罗汉果果肉组织中罗汉果苷和糖分含量的影响被引量：2
- 2016年
- 该研究以罗汉果品种"永青1号"为材料,在果实发育后期进行不同强度的遮荫处理,测定遮荫处理下果肉组织中罗汉果苷各组分含量、各种糖分的积累及其相关糖代谢酶活性、叶片光合特性的变化。结果表明:重度遮荫(70%遮荫)会导致果实中罗汉果甜苷Ⅴ含量显著提高,遮荫60 d(授粉后90 d),对照与70%遮荫处理果实中罗汉果甜苷Ⅴ含量分别为4.83%、5.79%,差异达极显著水平(P<0.01);70%遮荫处理下果实中葡萄糖、果糖含量也明显高于对照(P<0.05)。与罗汉果甜苷Ⅴ、葡萄糖、果糖含量的变化不同,遮荫60 d,70%遮荫处理下罗汉果果实中可溶性糖、蔗糖的含量分别显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)低于对照。另外,遮荫处理导致罗汉果叶片净光合速率下降,遮荫40 d,70%遮荫处理下叶片的净光合速率显著低于对照(P<0.05)。综上说明,重度遮荫处理可以引起罗汉果果实品质的改变;光合速率下降是遮荫处理下可溶性糖含量降低的主要原因;SPS、AI、SSC活性的改变则是遮荫导致蔗糖含量降低及葡萄糖、果糖含量上升的重要因素;重度遮荫条件下,荫棚中温度降低可能是罗汉果果实中甜苷Ⅴ含量增高的关键诱因。该研究结果为罗汉果的生产及品质调控提供了理论依据。
- 王海英马小军莫长明赵欢涂冬萍白隆华冯世鑫
- 关键词：遮荫果实品质
- 罗汉果主要产区的农业地质调查研究被引量：8
- 2012年
- 通过对罗汉果在永福、临桂、龙胜县以喀斯特地貌为主产区进行环境地质调查和样地调查的综合调查方法进行调查可知:罗汉果种植的主要品种为青皮果;罗汉果种植在中元古界上板溪群(Pt12)和上元古界的震旦系并层湘桂边境组(Z);下古生界的前寒武纪混合花岗岩(γ2)和寒武系清溪组(∈q)、边溪组(∈b);上古生界的泥盆系莲花山组与那高岭组并层(D1)、郁江组与东岗岭阶并层(D2)山坡上和中生界的白垩系红色碎屑岩(K)的良田中。这些调查结果将对罗汉果的农业地质区划、生态环境效益、资源保护、农业地质区划、道地性研究和人工栽培提供农业地质学理论依据和实践指导。
- 曾其国马小军彭培好冯世鑫魏荣昌黄曦唐其王晓峰
- 关键词：道地性农业地质
- 罗汉果主产区土壤安全评价与预警规划被引量：4
- 2012年
- 本研究采用内梅罗综合污染指数法,对广西桂北的永福县、临桂县和龙胜县罗汉果主产区8个地层进行土壤安全评价。评价结果表明:K地层土壤为清洁区;Z、Pt21、γ2、εb、εq、D1和D2地层上的土壤为尚清洁区,土壤污染综合指数处于污染临界值之内。此外,采用MAPGIS对罗汉果种植区域进行土壤安全预警规划。
- 曾其国彭培好马小军冯世鑫
- TLC法鉴别复方罗汉果止咳颗粒中的枇杷叶被引量：2
- 2016年
- 目的:复方罗汉果止咳颗粒中枇杷叶的鉴别。方法:采用薄层色谱方法,以三氯甲烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶水(19∶45∶26∶10)为展开剂,硅胶G为固定相,喷以10%香草醛硫酸溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,日光下检视薄层斑点。结果:薄层色谱图中,样品溶液在对照品、对照药材相应的位置上,分别显相同颜色的紫红色斑点。阴性样品无相同斑点。结论:本法简便、准确,可用于复方罗汉果止咳颗粒中的枇杷叶的鉴别。
- 龙永诚黎霜韦忠孙罗强覃怀宁马剑霜
- 关键词：枇杷叶
- 罗汉果果肉中糖类物质组成与含量分析被引量：7
- 2015年
- 罗汉果果实中富含糖分,糖类物质的组成及其含量对果实的内在品质有重要影响,然而多年来对其品质的研究多集中在罗汉果苷上,果实中可溶性糖种类与含量迄今尚未见有系统地报道。该研究以干燥的罗汉果果实为材料,采用PMP柱前衍生化一高效液相色谱紫外检测法、高效液相色谱示差折光检测法分别检测果肉中可溶性糖的种类与含量,并进行方法学考察。结果表明:PMP柱前衍生化一高效液相色谱紫外检测法只能检出罗汉果果实中存在的2种还原性醛糖——葡萄糖、甘露糖;而高效液相色谱示差折光检测法则可一次性检出葡萄糖、果糖、蔗糖、棉籽糖、多糖5种糖分。与柱前衍生化法相比,高效液相色谱示差折光检测法更适合用来全面分析罗汉果果实中糖分的种类和含量。不同罗汉果品种果实中糖的组分一致,但含量有显著差别。另外,样品的干燥方式会影响果实中的总糖及各组分的相对含量。冻干果肉中蔗糖和葡萄糖相对含量最高,烘干则导致蔗糖和葡萄糖下降,果糖与多糖相对含量增加。
- 王海英马小军莫长明赵欢涂冬萍白隆华冯世鑫
- 罗汉果甜苷Ⅴ合成生理规律的研究被引量：6
- 2014年
- 【目的】探讨罗汉果甜苷V合成生理规律．【方法】通过不同品种以及遮阴、气调贮藏、低温贮藏比较试验，分析罗汉果苷类和糖类代谢的关系，以及光合作用、呼吸作用、温度对它们代谢的影响．【结果和结论】不同品种罗汉果和遮阴果实均在30d时只含罗汉果苷IIE、苷Ⅲ，蔗糖、葡萄糖含量较低，30～70d时罗汉果苷ⅡE、苷Ⅲ迅速减少、消失，蔗糖、葡萄糖含量持续升高，甜苷V出现并急剧积累接近最高含量，70—90d时仅含甜苷V，蔗糖含量继续升高，葡萄糖含量则明显下降；但是，光合速率高的品种果实葡萄糖和甜苷V含量也高；遮阴使叶片光合速率降低，果实葡萄糖和甜苷V含量却均升高；气调和低温贮藏均促进果实葡萄糖积累，而抑制甜苷V合成．这些结果表明，罗汉果甜苷V由低糖苷与葡萄糖逐渐结合转化而来，通过调控生育后期叶片光合速率与果实呼吸来增加葡萄糖量不能促进其合成积累，其合成积累所需葡萄糖量是充足的，主要限制因子可能是低糖苷量和合成关键酶活性．
- 莫长明王海英马小军唐其万凌云翟勇进
- 关键词：葡萄糖光合速率酶活性
- 罗汉果葡萄糖基转移酶基因SgUGT4的克隆及表达研究被引量：4
- 2015年
- 以授粉后70d的罗汉果为材料,采用RT-PCR和RACE技术克隆到一个葡萄糖基转移酶基因,命名为SgUGT4。该基因cDNA全长1726bp,包含完整的开放阅读框1344bp,编码447个氨基酸。构建pET32a-SgUGT4原核表达载体,转化大肠杆菌Rossetta-gami(DE3),经IPTG诱导获得分子量约65k D的目的基因融合蛋白。系统进化分析表明,SgUGT4与具有罗汉果苷合成活性的拟南芥和甜叶菊葡萄糖基转移酶AtUGT73C3、AtUGT73C5、At UGT73C6、SrUGT73E1聚在一个亚家族。实时荧光定量PCR检测表明,SgUGT4在罗汉果甜苷Ⅴ主要积累部位果肉的表达量高于茎、叶、花和果皮,在根和种子中几乎不表达;果实发育40~50 d,甜苷Ⅴ开始积累,SgUGT4表达量则逐渐升高,50d时急剧上升;甜苷Ⅴ含量越高的品种,SgUGT4表达量也越高。SgUGT4可能在罗汉果甜苷Ⅴ生物合成过程中发挥作用。
- 莫长明马小军唐其白隆华潘丽梅冯世鑫
- 关键词：葡萄糖基转移酶基因克隆原核表达
