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吉林省重大科技攻关项目(10ZDGG007)

作品数：4 被引量：5H指数：1
相关作者：王卓越金宁一李霄齐延新吴娜更多>>
相关机构：军事医学科学院吉林大学吉林大学第一医院更多>>
发文基金：吉林省重大科技攻关项目转基因生物新品种培育专项“重大新药创制”科技重大专项更多>>
相关领域：农业科学医药卫生更多>>

文献类型

  • 4篇中文期刊文章

领域

  • 3篇农业科学
  • 1篇医药卫生

主题

  • 3篇重组腺病毒
  • 3篇腺病
  • 3篇腺病毒
  • 2篇双特异性
  • 2篇特异
  • 2篇特异性
  • 2篇NDV
  • 1篇启动子
  • 1篇肿瘤
  • 1篇细胞
  • 1篇抗肿瘤
  • 1篇基因
  • 1篇基因治疗
  • 1篇肝癌
  • 1篇肝癌细胞
  • 1篇癌细胞
  • 1篇APOPTI...
  • 1篇BEL-74...
  • 1篇HN
  • 1篇HN基因

机构

  • 4篇军事医学科学...
  • 3篇吉林大学
  • 1篇吉林大学中日...
  • 1篇吉林大学第一...

作者

  • 4篇吴娜
  • 4篇齐延新
  • 4篇李霄
  • 4篇金宁一
  • 4篇王卓越
  • 3篇王浩然
  • 2篇阚式绂
  • 2篇王宇航
  • 1篇刘燕瑜
  • 1篇孙大辉
  • 1篇刘广臣
  • 1篇胡宁宁
  • 1篇郭欢欢
  • 1篇朴秉国
  • 1篇杜寿文
  • 1篇王金辉

传媒

  • 3篇中国兽医学报
  • 1篇中国免疫学杂...

年份

  • 2篇2012
  • 2篇2011
共 4 条 记 录，以下是 1-4
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排序方式：
缺失E3L基因减毒天坛株痘苗病毒的构建及筛选被引量：4
2011年
通过在E3L同源重组臂中插入含有增强型痘苗病毒早晚期启动子(pE/L)、增强型绿色荧光蛋白基因和同向Loxp(Locus of X-over P1)序列的表达盒构建穿梭质粒pTE-EGFP。利用pTE-EGFP和野生型天坛株痘苗病毒共转染仓鼠肾细胞(BHK-21),通过对绿色荧光蚀斑的10次筛选,构建缺失E3L基因并含有EGFP基因的重组痘苗病毒rTTVV-TE--EGFP+。利用rTTVV-TE--EGFP+和含有Cre(Cyclization recombination)重组酶基因的重组质粒pVAX1-Cre共转染BHK-21细胞,通过对无荧光蚀斑的10次筛选,构建无筛选标记的天坛株痘苗病毒减毒株rTTVV-TE--,并利用聚合酶链式反应(PCR)对其进行鉴定。鉴定结果显示,rTTVV-TE--中无E3L基因转录和EGFP基因表达。以上结果说明,所构建的痘苗病毒减毒株rTTVV-TE--完全缺失了E3L基因和外源筛选标记EGFP基因,且具有良好的遗传稳定性。
王宇航李霄王浩然阚式绂王卓越齐延新吴娜杜寿文金宁一
关键词：病毒载体
重组腺病毒Ad－HP对肝癌细胞及肝癌肺转移模型的抑制效应
2012年
为探讨重组腺病毒Ad-HP对人肝癌细胞BEL-7402的影响及其对鼠肝癌肺转移模型的抑制作用,本研究利用MTT染色法进行了Ad-HP的体外抑瘤研究,并应用Annexin V检测、Caspase活性检测、AO/EB染色和DAPI染色等方法分析了Ad-HP的抑瘤方式。另外,本研究利用鼠肝癌细胞H22,建立了肝癌肺转移动物模型,并检测了Ad-HP对肝癌肺转移的抑制作用及其对模型动物免疫的影响。结果表明,Ad-HP能够有效抑制BEL-7402细胞的生长,且其作用具有一定时效和剂效关系趋势;Ad-HP感染导致BEL-7402细胞呈现磷脂膜外翻、细胞核皱缩、细胞膜通透性增加和Caspase酶活性增强等典型凋亡特征;应用Ad-HP治疗肿瘤模型能够有效延长模型动物平均生存期,控制转移灶形成,增强NK和CTL活性,上调Th1类细胞因子水平。总之,Ad-HT能够通过诱导细胞凋亡抑制BEL-7402肿瘤细胞增殖,并且能够有效控制肝癌肺转移灶形成,延长模型动物平均生存期。
齐延新王浩然李霄王卓越胡宁宁郭欢欢吴娜金宁一
关键词：NDVHN基因重组腺病毒肝癌
双特异性重组腺病毒Ad-HT对肝癌细胞的体内、外抑制效应被引量：1
2012年
目的:探讨双特异性抗肿瘤重组腺病毒Ad-HT对肝癌细胞的体内、外抑制作用和作用方式。方法:运用噻唑兰法检测重组腺病毒Ad-HT对BEL-7402细胞的抑制作用;应用AO/EB染色法、DAPI染色法、Annexin V检测、Caspase检测、线粒体膜电位检测和活性氧检测等多种方法分析Ad-HT对BEL-7402细胞抑制作用的方式和途径;构建C57BL/6小鼠荷H22肿瘤模型,瘤内注射重组腺病毒,通过非放射性乳酸脱氢酶细胞毒性检测方法,检测NK活性、CTL活性,利用酶联免疫吸附方法检测IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ等细胞因子水平,探讨Ad-HT对体内实体肿瘤的抑制作用和对免疫系统的影响。结果:Ad-HT能够抑制BEL-7402细胞生长,且其作用具有一定时效和剂效关系趋势;Ad-HT感染导致BEL-7402细胞磷脂膜外翻、细胞核皱缩、细胞膜通透性增加、Caspase酶活性增强、线粒体膜电位下降和活性氧水平升高;Ad-HT实验组模型动物平均期在30天以上,显著高于对照组;另外,Ad-HT具有增强NK和CTL活性,上调IL-2和IFN-γ等细胞因子水平的功能。结论:Ad-HT能够通过诱导细胞凋亡,抑制BEL-7402肿瘤细胞增殖,而这种抑制作用可能通过线粒体途径实现。另外,Ad-HT能够有效延长模型动物平均生存期,活化免疫功能细胞,并使免疫趋向Th1优势。
刘广臣孙大辉齐延新王金辉王卓越吴娜朴秉国金宁一李霄
关键词：NDVHN重组腺病毒BEL-7402
表达Apoptin基因抗肿瘤双特异性重组腺病毒的构建及鉴定被引量：1
2011年
为研发一种安全、特异、高效的抗肿瘤基因治疗候选药物,本试验基于人端粒酶启动子(hTERTp)、人5型腺病毒复制必需基因(E1a)和特异性抑癌基因(Apoption),利用RAPAd.Ⅰ腺病毒载体系统,构建了一种具有肿瘤特异性杀伤和特异性复制能力的双特异性抗肿瘤重组腺病毒Ad-VT。并利用人肝癌细胞(HepG-2)、人肺癌细胞(A549)、人宫颈癌细胞(Hela)、人胚胎肺细胞(WI-38)和非洲绿猿肾细胞(Vero)对hTERTp的肿瘤特异性进行鉴定。结果显示,hTERTp可在HepG-2、A549和Hela等肿瘤细胞内特异性启动外源基因的表达,而在WI-38、Vero等正常细胞内不能启动相关基因表达。用RT-PCR及Western-blot等方法对Apoptin基因和E1a基因的转录和表达进行了鉴定。结果表明,Ad-VT能够有效表达Apoptin和E1a等外源基因。
王卓越李霄王浩然阚式绂王宇航齐延新吴娜刘燕瑜金宁一
关键词：APOPTINHTERT启动子基因治疗
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