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毒蕈碱受体3抗原表位多肽诱导干燥综合征动物模型的研究被引量：7: 2009年; 利用毒蕈碱受体3(M3R)抗原表位多肽N49免疫BALB/c小鼠,以生理盐水注射小鼠作为对照组,检测各组小鼠血清抗N49多肽抗体和颌下腺淋巴细胞浸润情况。结果显示,多肽免疫组小鼠血清抗N49多肽抗体阳性率达100%(13/13),抗体滴度普遍从免疫后第21天开始显著上升,其中有5只(5/13)小鼠出现颌下腺淋巴细胞浸润;对照组小鼠血清抗N49多肽抗体均为阴性,仅有1只(1/14)出现轻度颌下腺淋巴细胞浸润。进一步以M3R分子不同抗原表位多肽N251和N412为包被抗原,检测以上实验小鼠血清中的抗体情况,显示N49多肽免疫组小鼠血清中抗N251和N412多肽抗体阳性率分别为100%(13/13)和85%(11/13),且两者抗体滴度变化趋势与抗N49多肽抗体一致,而对照组小鼠血清中抗N251和N412多肽抗体均为阴性。表明N49多肽较成功地建立了BALB/c小鼠的干燥综合征(SS)模型,诱导出了典型的自身抗体、颌下腺淋巴细胞浸润和自身抗原M3R分子内表位扩展等特征,为进一步研究M3R等自身抗原在SS发生中的作用机制奠定了基础。; 邹新乐李想徐凯彪陈巧林曾令文; 关键词：干燥综合征动物模型

α-胞衬蛋白抗原多肽的筛选及其在干燥综合征临床诊断中的意义被引量：1: 2007年; 目的:筛选鉴定干燥综合征特异性α-胞衬蛋白抗原多肽,进一步研究该抗原多肽在干燥综合征(SS)疾病临床诊断中的意义。方法:采用固相法合成α-胞衬蛋白第1～59位氨基酸区域的5条多肽,利用酶联免疫吸附法(ELISA)比较合成多肽与干燥综合征患者血清IgG的反应强弱,确定最佳α-胞衬蛋白抗原多肽;以筛选出的最佳α-胞衬蛋白抗原多肽作为包被抗原,检测原发性SS患者135例,继发性SS患者25例,系统性红斑狼疮(SLE)患者48例,类风湿关节炎(RA)患者88例和正常人83例血清中的抗α-胞衬蛋白抗原多肽IgG抗体。结果:合成的5条多肽中有一条(F5)与SS血清IgG反应最强,抗F5多肽抗体(α-F5-PA)在原发性SS患者中的阳性率(78.5%)明显高于SLE(10.4%)、RA(21.6%)患者及正常人(6%)(P<0.01)。抗F5多肽抗体在原发性SS诊断中的敏感性为78.5%,特异性为86.8%,而且该抗体的检测对于SSA抗体、SSB抗体或ANA阴性的原发性SS患者的诊断具有补充作用。结论:F5多肽作为最佳α-胞衬蛋白抗原多肽。; 陈巧林李想何文智雷静邹新乐曾令文; 关键词：干燥综合征酶联免疫吸附法

人内质网分子伴侣BiP的克隆、表达及其在RA患者血清抗体检测中的作用被引量：4: 2007年; 以类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）患者滑膜组织文库cDNA为模板，用PCR方法扩增得到1965bp人内质网分子伴侣BiP的全长cDNA，将其克隆入OmiesLink^TM表达载体pReceiver—B01a，构建重组表达质粒pReceiver—B01a—BiP。重组表达质粒导人大肠杆菌BL-21（DE3）菌株中诱导表达目的蛋白，表达产物以Ni^＋-NTA agarose层析柱纯化。SDS-PAGE和免疫印迹法（Western blot）分析发现，表达产物以可溶性蛋白和包涵体形式共同存在，表达量约占菌体蛋白总量的20％～30％。相对分子质量约为80000，纯度达到电泳级。经免疫印迹法鉴定，获得的BiP重组蛋白可以与RA患者血清反应，检测的抗BiP抗体在RA患者血清中的阳性率为75．4％（49／65），明显高于系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）患者14．6％（7／48）、原发性干燥综合征（primary Sjoegren’s syndrome，pSS）患者7．3％（4／55）及正常人0％（0／71）（P〈0．01）。表明，经原核表达获得的BiP全长蛋白，RA患者血清抗体可以很好结合，有望应用于临床血清学诊断。; 陈巧林何文智李想雷静张惠勇曾令文; 关键词：类风湿关节炎内质网分子伴侣表达纯化抗体检测

毒蕈碱受体3抗原表位筛选及其在原发性干燥综合征诊断中的作用被引量：2: 2008年; 运用计算机软件分析毒蕈碱受体3(M3R)蛋白的结构特点及抗原决定簇分布,根据结果设计合成3条多肽。比较合成多肽与抗M3受体抗体阳性干燥综合征(SS)患者血清IgG的反应强弱,获得一条抗原抗体反应最强的抗原表位多肽(N49)。进一步以多肽N49作为包被抗原,检测原发性SS(pSS)患者41例,继发SS(sSS)患者25例,系统性红斑狼疮(SLE)患者34例,类风湿关节炎(RA)患者80例和正常人174例血清中抗M3多肽IgG抗体,结果显示该多肽抗体在原发性SS患者血清中的阳性率为53.7%,明显高于sSS患者28%、SLE患者8.8%、RA患者25%和正常人12.1%(P<0.05)。抗N49多肽抗体在pSS诊断中的敏感性为53.7%,特异性为83.7%,而且该抗体的检测对于抗SSA抗体、抗SSB抗体或抗α-胞衬蛋白(-αfodrin)抗体阴性的pSS患者的诊断具有补充作用。表明,筛选获得的M3抗原表位多肽N49,其检测抗体在pSS临床血清诊断中具有很好的应用价值。; 李想邹新乐陈巧林曾令文; 关键词：抗原表位原发性干燥综合征多肽抗体

人内质网分子伴侣BiP抗原表位筛选及其在RA血清学诊断中的作用研究: 2009年; 目的:筛选鉴定人内质网分子伴侣BiP抗原表位多肽,探讨其在类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)血清学诊断中的价值。方法:运用计算机软件分析BiP蛋白的结构特点及抗原决定簇分布,根据结果设计合成系列多肽。比较合成多肽与RA患者血清(BiP抗体阳性)IgG的反应强弱,鉴定抗原抗体反应最强的抗原表位多肽。进一步以获得的BiP抗原表位多肽作为包被抗原,检测79例RA患者、34例系统性红斑狼疮(SLE)患者、66例干燥综合征(SS)患者和173例正常人血清中抗BiP抗原表位多肽IgG抗体水平。结果:筛选到一条与RA患者血清反应最强的多肽(N403),抗N403多肽IgG抗体在RA患者中的阳性率(67%),明显高于SS患者(29%)、SLE患者(0%)、和正常人(0%)(P<0.01)。抗N403多肽IgG抗体在RA血清学诊断中的敏感性为67%,特异性为93%。而且该抗体的检测对于RF、CCP、HRF、RA33、AKA、APF等抗体阴性的RA患者的诊断具有重要意义。结论:筛选获得的BiP抗原表位多肽N403,其检测抗体在RA临床血清诊断中具有很好的应用价值。; 邹新乐李想陈巧林曾令文; 关键词：抗原表位多肽抗体

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广州市科技攻关项目(2006Z3-E0071)