国家高技术研究发展计划(2001AA217081)
- 作品数：3 被引量：22H指数：3
- 相关作者：黄文林黄嘉凌刘然义李立曾益新更多>>
- 相关机构：中山大学中山大学附属第一医院广州达博生物制品有限公司更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划广东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重组人内皮抑素腺病毒抑制肝癌裸鼠移植瘤生长被引量：12
- 2003年
- 目的 观察重组人内皮抑素腺病毒(Ad/hEndo)对人肝癌裸鼠移植瘤生长的影响。方法 人脐静脉内皮细胞ECV-304经Ad/hEndo感染后,western印迹检测人内皮抑素的表达。人肝癌BEL-7402细胞移植到裸鼠背脊部后,检测Ad/hEndo对肝癌移植瘤生长的抑制作用。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肿瘤组织中内皮抑素mRNA的表达。分析人内皮抑素在裸鼠体内的表达分布。结果 Western印迹检测到人内皮抑素基因在ECV-304细胞内高效表达。Ad/hEndo明显抑制人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤生长(F=4.061,P<0.05)。Ad/hEndo组血管密度计数为6.88±1.08,DMEM组为13.60±1.71(t=9.216,P<0.01)。瘤内注射Ad/hEndo后3d,RT-PCR在肿瘤组织检测到内皮抑素mRNA的表达,7d后表达不明显。人内皮抑素蛋白主要分布在肿瘤组织。结论 腺病毒介导的人内皮抑素基因在体内、体外获得高效表达,并明显抑制肝癌裸鼠移植瘤的生长与血管生成。
- 李立吴沛宏黄嘉凌刘然义曾益新黄文林
- 关键词：肝癌裸鼠移植瘤抗血管生成
- 腺病毒携带的人内皮抑素基因(Ad/hEnd)抑制人舌鳞状细胞癌生长的研究被引量：7
- 2003年
- 背景与目的:舌癌是口腔常见的恶性肿瘤,目前常规采用以手术为主结合放疗化疗的综合治疗,总体的5年生存率只有50％左右,抗肿瘤血管生成治疗已 成为舌癌治疗的研究方向之一。本实验以5型E1缺陷型腺病毒携带的人内皮抑素基因(Ad/hEnd)感染舌癌细胞(Tca8113)和人脐静脉内皮细胞株(ECV),并对荷瘤裸鼠舌癌的抑瘤效果进行观察,研究其在舌癌细胞中的表达及对舌癌抑制作用。方法:(1)免疫组化法检测内皮抑素蛋白在Tca8113细胞和ECV细胞中的表达及分布。ELISA法检测上清中内皮抑素含量,Western blot检测内皮抑素基因在Tca8113和ECV细胞的表达特征。(2)流式细胞仪检测Ad/hEnd感染ECV后的细胞周期及凋亡,WST-1法检测Ad/hEnd对ECV细胞增殖的抑制。(3)Ad/hEnd对荷瘤裸鼠的舌癌的生长抑制分析。结果:(1)实验结果显示感染Ad/hEnd后Tca8113细胞和ECV细胞胞浆内可有效合成内皮抑素蛋白,细胞培养液上清中的内皮抑素蛋白表达浓度呈时间剂量依赖关系,最高达到597 ng/ml,可持续到第7天,并且表达产物有抑制人体静脉内皮细胞ECV生长特性,呈剂量依赖关系。(2)Ad/hEnd可延长感染后的ECV细胞的S期及G_2期,并出现细胞凋亡现象。(3)应用Ad/hEnd后第3天肿瘤体积增长受到抑制,第6天开始肿瘤抑制明显增强,第3周抑瘤率达45.8％。结论:本实?
- 丁学强陈宇李立刘然义黄嘉凌赖坤吴秀菊柯妙拉黄文林
- 关键词：腺病毒携带人内皮抑素基因人舌鳞状细胞癌
- 重组人血管内皮抑素腺病毒对人癌裸小鼠移植瘤的抑制作用被引量：3
- 2003年
- 目的 观察重组人血管内皮抑素腺病毒 (Ad/hEndo)在体内、体外的表达效率 ,以及对裸鼠移植瘤肿瘤血管生成的影响。方法 携带人血管内皮抑素基因的新型重组腺病毒 (Ad/hEndo)及携带β 半乳糖苷酶基因 (LacZ基因 )的重组腺病毒 (Ad/LacZ)为自行构建。Ad/hEndo组 (7只 )瘤内注射 1× 10 9空斑形成单位 (pfu)的Ad/hEndo 10 0 μl,Ad/LacZ注射组 (6只 )瘤内注射 1× 10 9pfu的Ad/LacZ注射 10 0 μl,DMEM液注射组 (5只 )瘤内注射DMEM液 10 0 μl,共注射 5次。人鼻咽癌 (CNE 2 )和人脐静脉内皮细胞 (ECV30 4细胞 )被Ad/hEndo感染后 ,Western印迹和免疫酶联吸附法 (ELISA)检测人血管内皮抑素蛋白的表达。CNE 2细胞株移植到裸鼠背脊部后 ,检测Ad/hEndo对鼻咽癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用 ,微血管密度计数 (microvesseldensity ,MVD)分析Ad/hEndo对肿瘤血管生成的影响。结果 Western印迹和ELISA法检测到人血管内皮抑素基因在CNE 2和ECV30 4细胞高效表达。当感染复数 (MOI)为 2 0pfu/细胞时 ,感染 72h后细胞培养上清中人血管内皮抑素蛋白浓度达 5 88 34ng/ml。Ad/hEndo可明显抑制鼻咽癌CNE 2裸鼠移植瘤生长 ,抑瘤率为 4 6 4 3% (Ad/hEndo治疗组对腺病毒携带基因LacZ注射组 ,t=2 2 2 6 ,P <0 0 5 )和 4 9 70 % (
- 李立吴沛宏陈宇丁学强黄嘉凌刘然义曾益新黄文林
- 关键词：裸小鼠移植瘤肿瘤血管生成鼻咽癌
