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国家自然科学基金(21072041): 作品数：11 被引量：21H指数：3; 相关作者：崔建东李连连赵雅敏孙立梅李林波更多>>; 相关机构：河北科技大学中国科学院过程工程研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金河北省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>; 相关领域：轻工技术与工程生物学理学更多>>

以粗孔微球硅胶为核芯的交联酶聚体的制备: 2015年; 采用苯丙氨酸解氨酶(PAL)为模型酶,制备了以粗孔微球硅胶为内核的苯丙氨酸解氨酶交联酶聚体(NH-PAL-CLEAs),优化了制备条件。并研究了NH-PAL-CLEAs的部分催化性能。研究结果表明,当硅胶量为117.75mg,酶液添加量为1mL(2U),戊二醛浓度为0.2%(体积分数)时,所制备的NH-PAL-CLEAs的最大酶活回收率是25%。与传统的PAL-CLEAs相比,NHPAL-CLEAS无需离心或过滤,只用短时间静置就能被回收重复利用。同时,NH-PAL-CLEAs也表现出较好的操作稳定性。这种制备方法不仅克服传统制备交联酶聚体(CLEAs)颗粒小、难回收,离心或过滤回收易结块的问题,而且缩短了生产周期,减少了能源消耗,提高了固定化酶的利用率,是一种非常具有工业应用前景的固定化酶方法。; 崔建东赵雅敏李连连; 关键词：酶工程苯丙氨酸解氨酶固定化酶

以大孔硅胶为载体的苯丙氨酸解氨酶交联酶聚体的制备及性质研究被引量：9: 2014年; 通过交联酶聚体与氨基化硅胶(活化硅胶)的共价交联,制备了以氨基化硅胶、无氨基化硅胶为载体的苯丙氨酸解氨酶交联酶聚体MSG(SG)-PAL-CLEAs、SG-PAL-CLEAs。优化了硅胶的氨基化条件以及MSG-PAL-CLEAs的制备条件,并且对游离酶,苯丙氨酸解氨酶交联酶聚体(PAL-CLEAs),MSG-PAL-CLEAs和SG-PAL-CLEAs的稳定性进行了比较。优化的硅胶氨基化条件:3-氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)/硅胶2∶1(v/w),氨基化温度110℃,氨基化时间10h,在此条件下所得硅胶键合氨基数目是480μmol/g硅胶。优化的MSG-PAL-CLEAs制备条件:0.05g硅胶/mL酶液,吸附时间2.5h,吸附pH8.8,沉淀剂为硫酸铵,饱和度80%,交联剂戊二醛的浓度为1%,交联时间1h。SG-PALCLEAs的制备条件和MSG-PAL-CLEAs的制备条件大体相似,不同的是沉淀剂硫酸铵的饱和度为40%,交联剂戊二醛的终浓度为1.5%。研究结果表明,制备得到的MSG-PAL-CLEAs和SG-PAL-CLEAs的酶活回收率均为45%左右。与传统的PAL-CLEAs相比,MSG-PAL-CLEAs的重复使用性和储藏稳定性均有了显著提高,MSG-PAL-CLEAs转化4个批次后,酶活保留79%,而PAL-CLEAs转化2个批次酶活仅保留49%。25℃,PAL-CLEAs储存29d酶活保留26%,而MSG-PAL-CLEAs的酶活保留仍高达50%。; 李连连崔建东; 关键词：苯丙氨酸解氨酶

苯丙氨酸解氨酶仿生固定化及其稳定性研究: 2015年; 利用仿生硅化技术包埋固定化苯丙氨酸解氨酶(PAL),研究固定化条件对PAL固定化的影响及固定化PAL的稳定性。优化的固定化酶制备条件:0.06 m L浓度为6 mg/m L诱导剂聚乙烯亚胺(PEI),25 mmol/L磷酸盐(p H7.0)作为固定化反应介质体系,2 m L浓度为1 mol/L正硅酸甲酯(TMOS)水解液和1 m L(2 U/m L)酶液添加量,所得固定化酶的酶活最大回收率是70%。与游离酶相比,固定化PAL的温度稳定性、p H和储存稳定性,以及变性剂耐受性都有较大提高,重复使用5次,固定化PAL仍能保持初始酶活的40%。; 崔建东梁龙昊韩丛刘容麟; 关键词：苯丙氨酸解氨酶氧化硅固定化酶聚乙烯亚胺

牛胰脂肪酶交连酶聚体的制备及性能研究被引量：1: 2016年; 以牛胰脂肪酶(cattle pancreatic lipase,CPL)为研究对象,采用交联酶聚体技术,研究交联酶聚体脂肪酶(CPL-CLEAs)的制备条件、催化性能和酶促反应动力学参数。结果表明,交联酶聚体脂肪酶制备的最优制备条件为:硫酸铵饱和度80%,戊二醛终浓度1.5%,交联时间1 h,在此条件下,所得CPL-CLEAs最高酶活回收率为90%。CPL-CLEAs的最适催化温度是60℃,与游离脂肪酶相比,CPL-CLEAs的最适催化温度提高了10℃,且温度稳定性、储存稳定性和操作稳定性均有所提高。重复使用7次后,CPL-CLEAs仍能保持初始酶活的43%。; 崔建东刘容麟; 关键词：脂肪酶固定化酶

苯丙氨酸解氨酶印迹交联酶聚体的制备及部分催化性能研究被引量：2: 2015年; 苯丙氨酸解氨酶(PAL)是酶法生产L-苯丙氨酸的关键酶,目前主要利用红酵母PAL进行转化,但红酵母PAL稳定性较差,妨碍了其工业化的应用。该研究将交联酶聚体和印迹酶的制备方法相结合,制备出新型固定化酶-苯丙氨酸解氨酶印迹交联酶聚体,筛选出最优的底物印迹分子,并考察了该固定化酶的部分特性。结果表明,反式肉桂酸是制备印迹PAL交联酶聚体的最适底物,所制备印迹交联酶聚体的最适催化温度和pH值分别是50℃和10.5,并表现出较好的重复使用性,连续催化9个批次后,仍保持了32%的酶活保留率。; 崔建东刘容麟; 关键词：酶工程苯丙氨酸解氨酶固定化酶

磁性F3O4-苯丙氨酸解氨酶仿生固定化及其催化性能研究: 2015年; 利用仿生硅化技术将苯丙氨酸解氨酶(PAL)和F3O4磁性纳米颗粒共包埋在仿生硅胶中,制备出磁性的仿生硅化的固定化酶。研究固定化条件对PAL固定化的影响及固定化PAL的催化性能。获得的固定化酶优化制备条件:2 m L浓度为0.8 mol/m L正硅酸甲酯水解液,1 m L质量浓度为20 mg/m L磁性纳米颗粒和酶添加量5m L(0.86 U/m L)时,所得固定化酶的最大酶活回收率是52%。与游离酶相比,固定化PAL的温度稳定性、p H和储存稳定性,以及变性剂耐受性都有较大提高,重复使用6次,固定化PAL仍能保持初始酶活的20%。; 岳姝刘容麟冯玉晓端冲赵雅敏李林波崔建东; 关键词：苯丙氨酸解氨酶共固定化固定化酶磁性纳米颗粒

牛血清白蛋白对牛胰脂肪酶交联酶聚体制备及催化性能的影响: 2015年; 研究了牛血清白蛋白(albumin from bovine serum,BSA)对牛胰脂肪酶交联酶聚体(Lipase-CLEAs)制备及其催化性能的影响。获得的优化制备条件为:BSA的添加质量浓度为0.05 g/L,用1%戊二醛交联2 h。在此条件下制备的固定化酶最大酶活回收率为70%,比不添加BSA制备的Lipase-CLEAs提高了15%。与游离酶相比,固定化酶的最适反应温度被提高了10℃,同时,添加BSA制备的Lipase-CLEAs的温度稳定性、p H和储存稳定性比游离酶和Lipase-CLEAs都有较大提高。在重复使用8次后,添加BSA制备的Lipase-CLEAs仍能保持初始酶活的80%,但未添加BSA制备的CLEAs只保留了30%的初始酶活。; 崔建东刘容麟; 关键词：固定化酶牛血清白蛋白

粘红酵母苯丙氨酸解氨酶合成条件优化被引量：3: 2012年; 首先利用Plackett-Burman设计及最陡爬坡试验对在摇瓶中对粘红酵母合成苯丙氨酸解氨酶的培养基和培养条件进行优化筛选,然后通过单因子试验确定最适诱导物。在此基础上,进行发酵罐葡萄糖浓度、产酶pH值以及诱导物添加时间的优化。结果显示优化的发酵培养条件为葡萄糖1g/L,蛋白胨35g/L,NaCl 5g/L,KH2PO4 0.25g/L,(NH4)2HPO4 1.5g/L;接种量4%;初始pH值为5;控制产酶pH值为7;诱导物为L-苯丙氨酸,分别在发酵8h和26h时添加;在上述优化条件下,最高比酶活为40.85U/g,比未优化前提高了7.3倍。; 张思孙立梅崔建东; 关键词：苯丙氨酸解氨酶粘红酵母培养条件优化

静电纺丝制备中空纤维原位固定化碳酸酐酶用于二氧化碳的吸收被引量：4: 2014年; 考察了游离碳酸酐酶吸收CO2水合体系反应条件,并通过同轴共纺静电纺丝技术制备出中空结构纤维,实现了碳酸酐酶在中空纤维中的原位包埋,提高了酶的稳定性并便于回收和重复利用.实验结果表明,固定化碳酸酐酶的热稳定性显著增强,受Cu2+和Fe3+等金属离子的抑制作用大幅度降低.连续使用11次后所生成的CaCO3沉淀量仍能达到首次使用的81.9%.固定化酶体系生成的CaCO3沉淀包括方解石型和球文石型2种晶形,而无酶和加入游离碳酸酐酶的反应体系则主要生成方解石型CaCO3沉淀.; 崔建东李莹姬晓元边红杰张羽飞苏志国马光辉张松平; 关键词：碳酸酐酶中空纤维静电纺丝碳酸钙

牛血清白蛋白辅助交联对苯丙氨酸解氨酶交联酶聚体影响的研究被引量：4: 2013年; 通过牛血清白蛋白(BSA)辅助交联,制备了牛血清白蛋白苯丙氨酸解氨酶交联酶聚体(BSA-PAL-CLEAs)。优化了BSA-PAL-CLEAs的制备条件,并比较研究了游离酶、苯丙氨酸解氨酶交联酶聚体(PAL-CLEAs)和BSA-PAL-CLEAs的稳定性差异。研究发现,BSA-PAL-CLEAs的最佳制备条件:BSA浓度为5mg/mL,硫酸铵饱和度80%,戊二醛(10%v/v)10μL,交联时间2h,所得BSA-PAL-CLEAs的酶活回收率(25%)是不加BSA时(13%)的1.92倍。稳定性研究表明,BSA-PAL-CLEAs的温度稳定性、储藏稳定性比PAL-CLEAs都有所提高;但是,游离酶、PAL-CLEAs、BSA-PAL-CLEAs的pH稳定性相差不大;BSA-PAL-CLEAs在有机溶剂中的稳定性比PAL-CLEAs有所下降。; 孙立梅李连连崔建东; 关键词：牛血清白蛋白苯丙氨酸解氨酶

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