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广东省科技计划工业攻关项目(20088030301121)
作品数:
2
被引量:4
H指数:2
相关作者:
付强
李友瑞
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张艺平
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2009
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细胞骨架完整性对流体剪切力诱导成骨细胞c-fos基因mRNA和蛋白表达的影响
被引量:2
2009年
目的研究细胞骨架完整性在流体剪切力诱导成骨细胞c-fos基因mRNA和蛋白表达中的作用,为进一步探索骨组织力传导机制提供依据。方法原代培养BALB/c小鼠成骨细胞,将原代培养的成骨细胞分为对照组和细胞松弛素D组,细胞松弛素D组使用细胞松弛素D破坏细胞骨架。每组一半细胞加载1.2Pa的流体剪切力,另一半不加载。分别用实时荧光定量聚合酶链反应(real-timePCR)和免疫荧光检测c—fos基因mRNA和蛋白、细胞骨架蛋白的表达水平,并对结果进行双因素方差分析和成组t检验。结果无论是对照组还是细胞松弛素D组,流体剪切力加载均可使成骨细胞c-fos基因mRNA相对水平(分别为0.1637±0.0303和0.0104±0.0070)和蛋白荧光强度(分别为177.14±9.37和150.95±6.17)升高,与未加载流体剪切力的对照组和细胞松弛素D组细胞(mRNA相对水平分别为0.0057±0.0021和0.0032±0.0014,蛋白荧光强度分别为117.96±4.11和119.77±5.19)相比,差异均有统计学意义(P〈0.05)。流体剪切力加载下,细胞松弛素D组细胞c—fos基因mRNA和蛋白的表达均低于对照组,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论细胞松弛素D对流体剪切力诱导成骨细胞c—fos基因mRNA和蛋白的表达起拮抗作用。保持细胞骨架的完整性是流体剪切力诱导成骨细胞c—fos基因表达过程中的重要条件。
徐亚娟
张艺平
覃峰
吴昌敬
李友瑞
付强
关键词:
细胞骨架
成骨细胞
基因
FOS
流体剪切力
沉默LIMK2基因对成骨细胞c—fos基因力学敏感性的影响
被引量:2
2009年
目的采用RNA干扰沉默LIMK2基因来抑制细胞骨架的改建,观察流体剪切力作用下其对成骨细胞c—fos基因力学敏感性的影响。方法对小鼠颅骨分离的成骨细胞分别给予RNA干扰、阴性RNA干扰2种处理后,进行流体剪切力加载或不加载。分别应用逆转录(RT)一PCR和免疫荧光检测c—fosm RNA和蛋白的表达,并进行统计学分析。结果在无流体剪切力加载条件下,单纯应用RNA干扰方法抑制细胞骨架改建,并不能使成骨细胞c-fos mRNA(0.0108±0.0074与0.0042±0.0018,t=-1.86,P〉0.05)和蛋白(121±7与1194-6,t=-1.272,P〉0.05)的表达升高;流体剪切力能使成骨细胞c-fosmRNA(0.22034-0.1532比0.0042±0.0018,t=-707.35,P〈0.05)和蛋白(1784-12比119±6,t=-30.761,P〈0.05)的表达水平显著升高;RNA干扰处理可显著提高流体剪切力诱导成骨细胞c-fosmRNA(0.52804-0.0879比0.22034-0.1532,t=-1007.00,P〈0.05)和蛋白(224±46比1784-12,t=-6.853,P〈0.05)的表达水平;采用RNA干扰的方法抑制细胞骨架的改建,可以对流体剪切力诱导成骨细胞c—fosmRNA(F=84.388,P〈0.05)和蛋白(F=42.409,P〈0.05)的表达起协同作用。结论采用RNA干扰沉默LIMK2基因抑制细胞骨架的改建,可以促进成骨细胞在流体剪切力作用下的c-fos基因表达。
张艺平
覃峰
吴昌敬
李友瑞
陈睿
邵敏峰
付强
关键词:
成骨细胞
基因
FOS
流体剪切力
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