国家科技重大专项(2011ZX09102-001-18) 作品数:8 被引量:34 H指数:4 相关作者: 肖洪彬 邹淑君 吕邵娃 许树军 张秀萍 更多>> 相关机构: 黑龙江中医药大学 牡丹江医学院 广东药科大学 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 中国博士后科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
辽东楤木叶总皂苷抗肿瘤作用研究进展 被引量:16 2015年 对辽东楤木叶总皂苷抗肿瘤的作用的研究已取得一定的进展,主要涉及人肺腺癌、人乳腺癌、小鼠腹水瘤相关细胞的体外移植瘤模型研究及人肝癌、人结肠癌、人胃癌、人卵巢癌、人红白血病细胞水平的研究。为了进一步了解辽东楤木叶总皂苷在抗肿瘤方面的研究现状并了解其抗肿瘤作用的效果,通过对比前人及课题组在肿瘤体外移植瘤模型制备时细胞密度、辽东楤木叶总皂苷使用剂量、使用时间及在细胞水平中辽东楤木叶总皂苷剂量使用情况,最终发现,辽楤木叶总皂苷达50 mg·kg-1时,即达到一定肿瘤抑制率;100 mg·kg-1时,可以有效抑制肿瘤组织中相关蛋白的表达;并通过抑制肿瘤大小及影响其形态学变化而有效抑制肿瘤的生长。其给药间隔时间及持续时间不同,对不同类型肿瘤模型的作用也有一定的差别。细胞研究时发现,不同浓度对不同细胞的增殖、凋亡有一定的作用,并对其蛋白表达有一定的影响。这些都为辽东楤木叶总皂苷抗肿瘤的药理作用及临床应用提供更可靠的实验依据。 张秀萍 孙达辰 肖洪彬关键词:抗肿瘤作用 12种大孔树脂对辽东楤木皂苷吸附特性的比较研究 被引量:4 2011年 目的研究不同型号的大孔树脂分离纯化辽东楤木叶总皂苷的工艺条件和参数,优选纯化辽东楤木叶总皂苷的大孔吸附树脂。方法比较了12种大孔树脂对辽东楤木叶中总皂苷的吸附性能,以辽东楤木叶中的代表成分辽东楤木叶总皂苷量为考察指标,对大孔树脂纯化辽东楤木叶总皂苷工艺进行筛选。结果 AB-8树脂对辽东楤木叶干粉中总皂苷吸附性能最好,达到静态交换容量为30.4 mg.ml-1树脂,吸附率为93.2%,动态吸附量为23.8mg.ml-1干树脂,吸附率为94.0%,解吸率为81.0%。结论筛选树脂应综合考虑目标化合物的性质和树脂的孔径、比表面积、极性等参数。 吕邵娃 刘栋 胡畔盼 王秋红 肖洪斌 匡海学关键词:大孔吸附树脂 总皂苷 辽东楤木叶红外光谱指纹图谱分析 被引量:1 2018年 目的:对辽东楤木叶药材50%乙醇提取物进行红外光谱分析,建立红外光谱指纹图谱,并分析不同地区不同采收期辽东楤木叶的差别。方法:采用傅里叶红外光谱法对辽东楤木叶提取物干燥品进行红外光谱测试,生成红外指纹图谱共有模式,进行二阶导数分析,并采用SPSS19.0软件对不同批次红外光谱进行相似度分析和聚类分析。结果:建立了东北地区辽东楤木叶指纹图谱,得到18个共有特征峰。确定5、6月份辽东楤木叶成分少、且某些成分含量低,7~9月份的辽东楤木叶相似度大。结论:简单、快捷的辽东楤木叶红外指纹图谱可辅助用于辽东楤木叶质量评价。从红外光谱指纹图谱来看,7、8、9月采收的辽东楤木叶符合药用标准。 许树军 邹淑君 孙永慧 肖洪彬关键词:聚类分析 辽东楤木叶总皂苷的HPLC及抗肿瘤作用谱效关系分析 被引量:4 2017年 目的:对辽东楤木叶总皂苷进行HPLC分析并确定不同的极性部位,利用C18反相硅胶(ODS)柱分离获得不同极性部位,比较不同部位的体外抗肿瘤作用效果。方法:辽东楤木叶经70%乙醇提取后通过AB-8型大孔树脂柱,获得总皂苷,用不同体积分数甲醇经ODS柱洗脱分离获得经HPLC确定的不同部位。利用噻唑蓝(MTT)比色法测试不同部位对人肺腺癌细胞株(A549),人宫颈癌细胞株(He La)和人结肠癌细胞株(HT-29)的体外生长抑制作用。结果:由总皂苷HPLC的保留时间确定了5个极性部位,分别为A(保留时间20 min以前的部位,ODS柱上0~25%甲醇洗脱组分),B(保留时间20~45 min,ODS柱上30%~45%甲醇洗脱组分),C(保留时间50~75 min,ODS柱上50%~65%甲醇洗脱组分),D(保留时间80~110 min,ODS柱上70%~75%甲醇洗脱组分)和E(保留时间>110 min,ODS柱上80%~100%甲醇洗脱组分)。5个部位给药48 h后对3种细胞的抑制作用明显不同,A部位对3种癌细胞均无抑制作用;B部位对3种癌细胞抑制作用微弱;C,D,E部位对3种癌细胞表现出较强的抑制作用,且明显强于总皂苷,最佳的D部位对A549,Hella和HT-29抑制作用的半抑制浓度分别为4.06,4.29,3.60 mg·L^(-1)。结论:辽东楤木叶总皂苷经HPLC分析后,利用ODS柱进行分离,可获得其抗肿瘤作用的有效部位及最佳部位。 邹淑君 李靖 许树军 吕邵娃 王秋红 肖洪彬关键词:总皂苷 抗肿瘤 噻唑蓝比色法 谱效关系 辽东楤木叶总皂苷高效薄层色谱指纹图谱分析 被引量:3 2019年 目的:建立辽东楤木叶总皂苷高效薄层色谱指纹图谱,并分析不同产地不同采收期的辽东楤木叶成分的差别。方法:采用高效硅胶G薄层板(20 cm×20 cm)载样,以三氯甲烷-甲醇-乙酸乙酯-甲酸-水(9. 5∶10∶20∶0. 5∶5)为展开剂,以10%浓硫酸乙醇溶液为显色剂,于恒温鼓风干燥箱里100℃条件下加热至斑点清晰,置于365 nm紫外光下照射获得其显色后的荧光高效薄层色谱图,经软件组合处理生成斑点灰度峰曲线,建立共有模式,并进行相似度分析及聚类分析。结果:获得分离度良好、斑点清晰的高效薄层色谱指纹图谱,建立了辽东楤木叶总皂苷薄层色谱指纹图谱共有模式,由10个共有斑点峰组成,并指认了其中的4个斑点峰代表的具体成分。分析表明不同地区8月初至9月中旬的辽东楤木叶相似度较高;聚类分析将11个不同批次的样品聚为一大类。结论:建立的薄层色谱指纹图谱方法简单、快速、可靠,可用于辽东楤木叶药材的鉴定和质量控制评价。确定东北地区8月采收的辽东楤木叶药材均符合质量要求,可作为以总皂苷为主要药效部位的药材使用。 邹淑君 许树军 孙楠 肖洪彬关键词:薄层色谱 指纹图谱 聚类分析 不同产地和不同采收期辽东楤木叶中两种皂苷的含量测定 被引量:4 2017年 目的:测定并比较不同产地和不同采收期辽东楤木叶中3-O-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→3)-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→3)-β-D-葡萄吡喃糖基-齐墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(楤木皂苷TTP)和3-O-[β-D-葡萄吡喃糖基(1→2)]-[β-D-葡萄吡喃糖基(1→3)]-β-D-葡萄吡喃糖基-齐墩果酸-28-O-β-D-葡萄吡喃糖酯(楤木皂苷V)的含量。方法:采用高效液相色谱蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)法,使用Diamonsil C_(18)(2)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-水(31∶69),流速1.0 m L·min^(-1),柱温30℃,蒸发光散射检测器漂移管温度110℃,载气(N2),流速3.2 m L·min^(-1)。结果:楤木皂苷TTP和楤木皂苷V分别在进样量0.51~2.55μg和0.50~4.00μg线性关系良好,相关系数分别为0.999 8和0.999 2。结果表明,不同产地和不同采收期辽东楤木叶中楤木皂苷TTP和楤木皂苷V的含量有所差异,可能与辽东楤木分布区域、生长季节及叶片生理状态有关,由实验结果可以看出,两种皂苷类成分大多在7,8月的含量相对较高,部分地区9月含量较高。结论:该方法简单、快捷、准确,可以同时测定辽东楤木叶中楤木皂苷TTP和楤木皂苷V的含量,为辽东楤木叶质量控制提供实验依据。 李百美 孙宜春 王秋红 王知斌 匡海学黑龙江凤凰山不同海拔及不同采收期辽东楤木叶中2种皂苷类成分含量的比较 2017年 目的:比较黑龙江凤凰山地带不同海拔及不同采收期辽东楤木叶中三萜皂苷3-O-[β-D-吡喃葡萄糖基(1→2)][β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)]-β-D-吡喃葡萄糖基-刺囊酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖酯(简写为ECA)和3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖基-齐墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖酯(以下简称为OLA)的含量,了解这一区域采收辽东楤木叶的最佳时间和海拔高度。方法:用反相高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)法测试,色谱柱为Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温30℃;流动相为乙腈、水二元梯度系统;进样量10μL,流速1.0 m L·min^(-1);载气流速3.2 L·min^(-1);漂移管温度110℃。结果:两种三萜皂苷在各自测定的范围内均呈良好线性关系(r均为0.999 8),平均加样回收率分别为97.71%,98.06%。各批次供试品中OLA的含量都远高于ECA。从6月初至9月初,两种皂苷含量几乎都呈递增趋势,6月至8月增幅很大,差别显著,8月至9月增幅较小,甚至略减;不同海拔高度条件下同时期的叶中两种皂苷含量没有显著性差异。结论:所用测试方法简单、快捷、重复性好,可为凤凰山地带辽东楤木叶的质量控制提供依据。 邹淑君 许树军 李靖 吕邵娃 肖洪彬关键词:三萜皂苷 不同海拔高度 不同采收期 辽东楤木叶总皂苷体外抗肿瘤作用的研究 被引量:10 2012年 目的探讨辽东楤木叶总皂苷(ETS)的体外抗肿瘤作用,为进一步将其开发成新靶点的抗肿瘤药物提供可靠的科学依据,为研发具有自主知识产权的抗肿瘤新药奠定坚实的基础。方法利用磺酰罗丹明B(SRB)染色法,观察辽东楤木叶总皂苷不同浓度对A549、BGC、BEL-7402和HCT-8肿瘤细胞的抑制作用。结果 ETS浓度达到31.25μg.ml-1时即可对人肺腺癌A549细胞、人胃癌BGC细胞和人肝癌BEL-7402细胞有50%生长抑制作用,达到62.5μg.ml-1时即可对人结肠癌HCT-8细胞有50%生长抑制作用。其浓度达到125μg.ml-1时即可对人胃癌BGC细胞和人肝癌BEL-7402细胞有50%杀死的作用。浓度达到500μg.ml-1时即可对人结肠癌HCT-8细胞有50%杀死的作用,而对人肺腺癌A549细胞未测出其50%杀死作用。各组均未测出完全抑制细胞生长所需的ETS浓度。对于体外加药48 h后对A549、BGC、BEL和HCT-8细胞OD值的影响,ETS组500,250,125μg.ml-1均有极显著性统计学差异(P<0.01),62.5μg.ml-1对A549、BEL和HCT-8均有显著性意义;31.25μg.ml-1均无统计学意义。结论 ETS体外对人肺癌A549、人胃癌BGC、人肝癌BEL-2、人结肠癌HCT-8肿瘤细胞有一定的抑制作用。 张秀萍 尹丽颖 牛雯颖 刘佳维 肖洪彬关键词:SRB法 抗肿瘤作用