国家自然科学基金(30770081)
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
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- 类泛素修饰蛋白bISG15抗血清在体外修饰系统中的应用(英文)被引量：2
- 2008年
- ISG15由干扰素刺激基因15编码,是最早被发现的类泛素修饰分子.病毒感染以及干扰素刺激可以强烈诱导其表达.与泛素类似,ISG15可以共价连接到其他蛋白分子上进行修饰,但ISG15及其连接修饰的功能作用还有很多尚未知.最近的研究表明,ISG15及其修饰作用在先天免疫中起着重要的作用.将牛类ISG15基因克隆进入pET28a( +)原核表达载体,并且表达了可溶的融合有His-tag标签的bISG15融合蛋白.使用Ni-NTA葡聚糖进行纯化浓缩.纯化蛋白免疫Balb/c小鼠并获得抗血清.Western印迹实验显示,抗血清可以特异地识别在真核细胞中表达的bISG15 .浓缩的bISG15以及制备的抗血清用于建立bISG15的体外修饰系统.实验证明,使用该系统bISG15可以连接到细胞蛋白上进行修饰.
- 刘畅史颖姣宣成昊耿运琪乔文涛
- Structural study of Bovine Immunodeficiency Virus Integrase Catalytic Core Domain
- Since the outbreak of the AIDS pandemic,an intensive search has been under way to develop antiviral therapies ...
- 姚雪耿运琪
- 关键词：INTEGRASE
- 文献传递
- 利用蛋白质组学技术筛选与BIV基质蛋白MA相互作用蛋白
- 2010年
- 牛免疫缺陷病毒BIV的基质蛋白MA是由gag基因编码病毒结构蛋白之一,参与病毒运输包装等多种过程.通过蛋白质组学方法,寻找与MA有相互作用的宿主蛋白.通过原核表达MA-CBP融合蛋白,将其结合在几丁质上,并与细胞裂解物混合,纯化特异结合的细胞蛋白.利用双向电泳以及MALDI-TOF质谱分析,筛选到8个与MA具有相互作用的候选蛋白,功能涉及运输、氧化还原、热激反应等.进而克隆所鉴定蛋白之一的PRDX4,利用体外结合实验进一步证实其与BIV MA蛋白存在相互作用.初步建立利用蛋白质组学技术研究病毒与宿主相互作用实验方法,所得结果为了解慢病毒结构蛋白在病毒生活周期中功能提供了线索,有助于探索过氧化物酶家族蛋白在病毒感染过程中的作用及其分子机制.
- 刘畅常锐李欣陈启民耿运琪乔文涛
- 关键词：牛免疫缺陷病毒基质蛋白蛋白质组学
- 蛋白质组学技术在病毒学研究中的应用被引量：4
- 2008年
- 常锐刘畅乔文涛
- 关键词：蛋白质组学病毒学翻译后修饰病毒复制
