北京市自然科学基金(7101007)
- 作品数:3 被引量:12H指数:2
- 相关作者:付汉江郑晓飞朱捷铁轶王瑞国更多>>
- 相关机构:军事医学科学院安徽医科大学大连大学附属中山医院更多>>
- 发文基金:北京市自然科学基金国家自然科学基金国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- poly(U)加尾microRNA检测方法建立及其检测被引量:2
- 2013年
- 目的建立一种poly(U)加尾RT-PCR检测微RNA(microRNA,miRNA)分子的新方法。方法提取细胞总RNA,用poly(U)聚合酶在miRNA 3'端添加U尾,逆转录为cDNA,实时定量PCR检测miRNA分子。结果经poly(U)聚合酶加尾RT-PCR方法可以成功地检测miRNA分子。结论本研究建立的poly(U)加尾RT-PCR方法可有效地检测并分析miRNA分子,具有特异性强,灵敏度高的特点,为miRNA的检测分析及功能机制研究提供了一种新方法。
- 李珊珊付汉江铁轶朱捷邢瑞云郑晓飞
- 关键词:微RNAPCR
- DNA损伤诱导的长链非编码RNA-UCA1促进HeLa细胞增殖被引量:8
- 2015年
- 尿路上皮癌抗原1(UCA1)是一种长链非编码RNA,在多种肿瘤内高表达.然而,其在宫颈癌细胞和组织中的表达报告颇不一致,且功能尚未确定.本文探索UCA1在宫颈癌He La细胞中的生物学功能.实时定量PCR(qRT-PCR)结果显示,UCA1、p21和p53 mRNA在阿霉素(doxorubicin,DOX)或γ射线照射的He La细胞中表达上调;相反,敲减p53表达则可抑制DOX诱导的UCA1上调.表明DNA损伤诱导的UCA1可能与p53有关.转染结合CCK8检测He La细胞增殖活力结果显示,与对照比较,过表达UCA1促进He La细胞增殖,干扰UCA1表达则减缓细胞增殖.此外,流式细胞术结果显示,过表达UCA1导致阿霉素诱导的凋亡率下降;siRNA抑制UCA1表达后引起细胞G2/M期比例上升,S期下降,且阿霉素诱导的细胞凋亡率上升.上述结果说明,DNA损伤诱导的UCA1可促进He La细胞增殖,减少细胞凋亡.然而,是否DNA损伤诱导的UCA1上调依赖p53尚需进一步实验证明.
- 王瑞国沈远李清宋宜朱捷郑晓飞杜彩素付汉江
- 关键词:长链非编码RNA宫颈癌DNA损伤
- 肝硬化患者血浆中AFP、PKM2和ALB mRNA的检测与分析被引量:2
- 2011年
- 目的探讨乙肝肝硬化患者外周血血浆中甲胎蛋白(AFP)、丙酮酸激酶M2(PKM2)和白蛋白(ALB)mRNA的表达水平及其临床意义。方法采用实时定量PCR方法检测了38例健康人血浆及38例乙肝肝硬化患者血浆中AFP mRNA、PKM2 mRNA和ALB mRNA的表达水平,并分析其表达与临床检测指标间的相关性。结果 AFPmRNA、PKM2 mRNA及ALB mRNA的表达在肝硬化患者血浆和健康人血浆中存在明显差异,结果具有统计学意义(P<0.01)。AFP mRNA和PKM2 mRNA的表达与临床检测指标没有显著相关性,ALB mRNA与γ-谷氨酰基转移酶及血清白蛋白具有相关性。与甲胎蛋白相比,检测的3种血浆mRNA在乙肝肝硬化患者中的高表达更明显。结论检测外周血血浆中AFP mRNA、PKM2 mRNA和ALB mRNA的表达对肝病的临床诊断及治疗具有指导意义。
- 曲秋月于源滋李杰付汉江铁轶郭明洲郑晓飞
- 关键词:MRNA乙肝肝硬化实时定量PCR甲胎蛋白类白蛋白类