福建省自然科学基金(2010J0111)
- 作品数：12 被引量：139H指数：7
- 相关作者：温庆放朱海生陈敏氡林珲李永平更多>>
- 相关机构：福建省农业科学院福建农林大学福州市蔬菜科学研究所更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金国家自然科学基金福建省属公益类科研院所基本科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 草莓NCED基因正反义表达载体和RNAi载体的构建被引量：1
- 2012年
- 根据草莓(Fragaria ananassa Duch)NCED基因序列(GenBank:HQ399498),克隆NCED基因开放阅读框,将该片段插入植物表达载体pBI 121的CaMV 35S启动子和NOS终止子之间,构建了正义表达载体pBI 121NCED。克隆NCED基因正义、反义片段和作为内含子的gusA基因片段,以植物表达载体pBI 121为基础,以pCAMBIA2301作为中间载体,通过多次酶切和连接,成功构建了草莓NCED基因RNAi表达载体pBI121NCEDRNAi和反义表达载体pBI 121NCEDF。经PCR、限制性内切酶酶切和测序鉴定后,成功将pBI121NCED、pBI 121NCEDF和pBI 121NCEDRNA 3个重组表达质粒导入农杆菌EHA105中。研究结果为进一步研究草莓NCED基因的功能奠定了基础。
- 朱海生陈敏氡李严曼温庆放
- 关键词：草莓RNA干扰
- 草莓八氢番茄红素合成酶基因的克隆及其表达特性被引量：21
- 2011年
- 【目的】分离和克隆草莓果实八氢番茄红素合成酶基因psy,分析其序列特征,了解其在不同组织部位的表达情况。【方法】采用RT-PCR和RACE技术从草莓果实中克隆草莓类胡萝卜素合成途径中关键基因psy,用生物信息学方法对获得的cDNA序列及推定氨基酸序列进行分析,并用半定量PCR法研究psy基因在不同组织中的表达。【结果】分离到psy基因,GenBank登录号为FJ784889。该cDNA全长1 458 bp,具有1个1 194 bp的完整开放阅读框(ORF),编码398个氨基酸。序列分析表明,psy编码的氨基酸序列与其它植物的PSY蛋白有很高的相似性。系统进化树分析显示,草莓PSY与胡萝卜和玉米的PSY蛋白亲缘关系比较近。原核表达结果表明psy基因在大肠杆菌中获得高效表达。利用半定量RT-PCR技术进行组织表达模式分析发现,psy基因在草莓的花、叶片和果实中均有表达。表达量为花>红果>粉红果>白果>青果>老叶>新叶。【结论】从草莓中克隆到类胡萝卜素生物合成的关键酶基因psy,该基因可能参与调控类胡萝卜素的合成。
- 朱海生李永平温庆放
- 关键词：草莓八氢番茄红素合成酶基因克隆
- 草莓半胱氨酸蛋白酶基因FaCP的克隆及表达分析
- 草莓果实成熟调控和采后保鲜一直是生产、运输及销售过程中的一个难题。叶片早衰则严重影响了草莓产量和品质。半胱氨酸蛋白酶(cysteine protease,CP)是一类重要的蛋白酶家族,在植物叶、花、根瘤等器官的衰老以及果...
- 朱海生温庆放
- 关键词：草莓半胱氨酸蛋白酶基因表达
- 文献传递
- 草莓果实中类胡萝卜素含量UPLC法测定
- 建立一种快速、准确的草莓类胡萝卜素测定方法对合理开发和利用草莓资源具有重要的理论价值和应用前景。超高效液相色谱(Ultra performance 1iquid chromatography,UPLC)技术具有明显的超高...
- 朱海生陈敏氡温庆放马宏棋林义章
- 关键词：草莓类胡萝卜素
- 草莓9-顺式-环氧类胡萝卜素双加氧酶基因(FaNCED)的克隆及表达分析
- 从草莓果实中克隆了一个NCED基因(FaNCED)。研究FaNCED基因表达与ABA信号积累及果实成熟的相关性,为继续开展草莓ABA合成代谢的调控机制研究提供实践基础,为在草莓上应用ABA调控果实成熟提供理论依据。
- 朱海生李永平温庆放
- 关键词：草莓基因克隆
- 文献传递
- 草莓ζ-胡萝卜素脱氢酶基因ZDS的克隆及特征分析被引量：16
- 2010年
- 用RT-PCR和RACE技术从草莓(Fragaria ananassa Duchesne)果实中克隆到ζ-胡萝卜素脱氢酶基因ZDS,命名为FaZDS,其cDNA全长2148 bp,具有1个1710 bp的完整开放阅读框(ORF),编码569个氨基酸。序列分析表明,FaZDS编码的氨基酸序列与其它植物的ZDS蛋白有很高的相似性。系统进化树分析表明,草莓与苹果的ZDS蛋白亲缘关系较近。原核表达结果表明FaZDS基因在大肠杆菌中能高效表达。用半定量RT-PCR技术进行组织表达模式分析表明,FaZDS基因在草莓的花、叶片和果实中均有表达,表达量为花>红果>粉红果>白果>青果>叶。
- 李永平朱海生温庆放花秀凤林珲
- 关键词：草莓基因克隆
- 草莓psy、pds和zds基因融合植物表达载体的构建被引量：3
- 2013年
- 根据草莓psy、pds和zds基因序列,设计含有酶切位点的特异引物,以草莓总RNA为模板,通过RT-PCR法分别克隆psy、pds和zds基因.以植物表达载体pBI121为基础,利用口蹄疫病毒2A序列将psy、pds和zds基因融合在同一个开放阅读框下,构建成三价融合植物双元表达载体pBI2A2Apsy-pds-zds.同时构建了psy和zds基因二价融合植物表达载体pBI2A2Apsy-zds.经PCR、限制性内切酶酶切和测序鉴定后,成功将2个重组表达质粒pBI2A2Apsy-pds-zds和pBI2A2Apsy-zds导入农杆菌EHA105中.
- 朱海生陈敏氡温庆放
- 关键词：草莓PDS
- 草莓离体再生和种苗繁育体系的建立被引量：3
- 2013年
- 以‘福莓一号’和‘红实美’草莓为材料,建立了草莓叶片高效离体再生系统,以茎尖为外植体,建立了茎尖脱毒体系。结果表明,‘福莓一号’叶片最佳芽诱导培养基为MS+2.0mg.L-1 6-BA+0.1mg.L-12,4-D,诱导率可达85.7%,‘红实美’叶片最佳芽诱导培养基为MS+2.0mg.L-1 6-BA+0.1mg.L-1IBA,诱导率可达81.9%;2个品种茎尖最佳诱导和增殖培养基为MS+0.5mg.L-1 6-BA+0.1mg.L-1NAA,芽增殖系数为8.78,同时建立一个草莓茎尖培养、组培苗快繁及种苗繁育体系。
- 朱海生花秀凤林珲陈敏氡温庆放
- 关键词：草莓茎尖培养脱毒苗
- ABA对草莓果实成熟和软化的调节被引量：13
- 2012年
- 以‘法兰地’草莓为试材,研究草莓果实生长发育过程中内源脱落酸(ABA)含量、FaNCED基因表达量的变化以及外源ABA、去甲二氢愈创木酸(NDGA)和乙烯利处理对果实成熟软化的影响。结果表明:在草莓果实成熟过程中ABA含量和FaNCED表达量出现2次高峰,分别是花后35d(转色期)和花后45d(果实完熟期)。外源ABA促进FaNCED基因的表达及ABA的积累,促进草莓果实的成熟和后熟软化,NDGA处理表现出相反效果,喷施乙烯利表现不明显,推测ABA在草莓果实成熟和后熟软化中可能起着重要作用。
- 朱海生温庆放李永平林珲陈敏氡李严曼
- 关键词：草莓脱落酸
- UPLC测定草莓果实中类胡萝卜素含量被引量：21
- 2013年
- 【目的】为了获得适宜进行草莓果实类胡萝卜素各组分定性定量分析的方法,【方法】以成熟草莓果实为材料,通过对不同提取剂、提取方法的筛选,优化草莓果实类胡萝卜素的提取条件;通过确定色谱条件以及重复性、精密度、回收率试验,建立类胡萝卜素超高效液相色谱法标准分析体系。【结果】以丙酮∶石油醚=1∶2作为提取剂,皂化提取草莓果实中类胡萝卜素,同时采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱,以乙腈∶甲醇=9∶1为流动相,在450 nm下测定是进行草莓果实类胡萝卜素定性定量分析的最佳方法。成熟草莓中能检测到叶黄素、β-隐黄质、β-胡萝卜素,含量依次为:118.5、12.6、99.8μg.kg-1;检测不到番茄红素;检测可以在5 min内完成,比常规方法节约时间70%左右;方法平均回收率达到93.2%,变异系数为1.32%～1.86%。【结论】提取方法和超高效液相色谱法标准分析体系适合草莓果实类胡萝卜素各组分的定性定量分析。
- 陈敏氡朱海生温庆放马宏棋林义章
- 关键词：草莓类胡萝卜素
