国家科技重大专项(2008ZX08010-004)
- 作品数：16 被引量：125H指数：7
- 相关作者：徐惠君叶兴国杜丽璞侯文胜李成伟更多>>
- 相关机构：中国农业科学院作物科学研究所周口师范学院中国农业科学院中国水稻研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金农业部大豆产业技术体系资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 河南商丘地区棉花黄萎病菌分离鉴定和致病力分析被引量：4
- 2010年
- 为探讨河南商丘地区棉花黄萎病菌的致病型群体变异,对该地区棉花上分离的8株单孢菌株的菌落形态、显微结构、致病力、ITS序列、系统进化及菌体蛋白等方面进行了研究。结果表明:这些菌株均属于棉花黄萎病菌Verticilliumdahliae;系统进化树显示8株菌株并没有聚在同一进化枝上;8株黄萎菌菌株存在致病力差异,SQ4菌株致病力最强,属于落叶型,而其它致病力较弱的7个菌株属于非落叶型;不同致病力的菌株间蛋白谱带存在差异。
- 丁锦平刘冬梅周瑞阳李付广李成伟
- 关键词：棉花黄萎病菌ITS序列系统进化树菌体蛋白致病力
- 过表达GmNHX1基因提高大豆根系的耐盐性被引量：8
- 2011年
- Na+/H+反向转运蛋白可调控细胞质pH值、钠离子浓度和细胞体积,从而减轻盐胁迫对植物的伤害。利用发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)介导法,向大豆根系导入由CaMV35S启动子调控的Na+/H+反向转运蛋白编码基因GmNHX1的cDNA序列,通过该基因的过量表达,提高大豆的耐盐性。通过潮霉素筛选、GUS染色及RT-PCR检测,确认获得了转GmNHX1基因的大豆发状根。对转基因发状根耐盐性分析表明:在100、150和200 mmol.L-1的NaCl胁迫下,置于MS固体培养基中的转基因离体发状根的长度和重量增加值均显著大于对照。带有转基因发状根的子叶及复合体植株在盐胁迫条件下也具有较强的生存能力。试验证明,过表达GmNHX1基因能够显著提高转基因发状根的耐盐性,该结果为利用GmNHX1基因进行大豆耐盐性的改良提供了依据。
- 王敏娟侯文胜王庆钰林汉明韩天富
- 关键词：大豆发根农杆菌根系耐盐性
- 影响农杆菌介导的植物转基因的因素被引量：2
- 2011年
- 农杆菌介导法是植物转基因研究中应用最多的方法,具有转化成本低、效率高、可转移较长基因片段等特点.多种因素影响此遗传转化过程中的转化率,包括外植体类型、植物基因型、外植体的处理、菌株和质粒载体类型、预培养以及培养基成份等方面.
- 张福丽李季平高丹张慧芳李成伟
- 关键词：农杆菌植物转基因转化率
- 拟南芥胱硫醚-γ-合成酶(D-AtCGS)抗血清制备及对D-AtCGS转基因大豆的检测被引量：1
- 2011年
- 构建了N端缺失拟南芥CGS基因(D-AtCGS)的原核表达载体,对其进行了原核表达、蛋白纯化和抗血清制备,并利用获得的抗血清对国家大豆改良中心北京分心中心获得的组成型表达、种子特异性表达的D-AtCGS转基因大豆及转全长AtCGS(F-AtCGS)和D-ATCGS的豆科模式植物百脉根进行了Western blot检测,结果表明:各供试转基因材料的检测信号明显高于野生型对照,最终成功建立了AtCGS转基因大豆的Western blot检测方法,该研究可为AtCGS的表达分析和转基因植物检测提供良好的技术支持。
- 王义鹏于洋孙石许艳丽侯文胜
- 关键词：原核表达抗血清制备
- 十二个小麦新品种成熟胚再生性能与农杆菌侵染敏感性评价被引量：5
- 2012年
- 小麦成熟胚培养再生率比较低,尤其对优良小麦品种成熟胚再生性和农杆菌侵染敏感性还缺乏研究,一定程度阻碍了转基因小麦有效开展和产业化进程。以扬麦18、扬麦15、扬麦16、新冬18、小偃166和周麦22等12个优良小麦新品种为材料,研究了其成熟胚再生率及其对农杆菌侵染的敏感性。结果表明,12个小麦新品种成熟胚再生率0～35.3%,周麦27最高,扬麦19次之(27.9%),新冬18、石麦B07-4056分别为21.1%和20.0%,其余品种再生率均低于20.0%;12个小麦品种成熟胚愈伤组织农杆菌侵染后GUS基因瞬间表达率0～33.3%,周麦18最高,扬麦15次之(23.8%),扬麦18、周麦22、周麦27和石麦B07-4056虽有表达但频率较低(6.7%～9.1%),其余品种没有观察到GUS基因瞬间表达。认为周麦27、扬麦19等品种适合进行成熟胚培养,周麦18、扬麦15等品种成熟胚适合进行农杆菌转化。优良小麦品种成熟胚再生性能和农杆菌敏感性评价为进一步利用细胞工程和基因工程途径改良小麦奠定了基础。
- 李欣刘凌云杜丽璞殷桂香徐惠君叶兴国
- 关键词：小麦成熟胚愈伤组织植株再生农杆菌转化
- 昆虫杆状病毒的增效蛋白被引量：2
- 2010年
- 张小霞陈晓慧梁振普曹素梅许锋乔冠华尹新明
- 关键词：昆虫杆状病毒增效蛋白微生物杀虫剂害虫防治防治害虫生防因子
- 棉花八氢番茄红素脱氢酶GhPDS1基因的克隆与表达谱分析被引量：7
- 2011年
- 八氢番茄红素脱氢酶(PDS)在胡萝卜素生理代谢和病毒诱导外源基因沉默中起着非常重要的作用。本研究通过同源克隆方法,分析已报道植物八氢番茄红素脱氢酶氨基酸保守区,设计简并引物,扩增出编码棉花PDS基因cDNA中间片段。通过RACE技术成功地克隆了棉花PDS基因的全长cDNA,命名为GhPDS1(GenBank No.HQ441184)。利用半定量RT-PCR技术进行组织表达模式分析发现,该基因在花中表达量最高,其次为叶片。棉花PDS基因的成功克隆使得该基因可在病毒诱导的基因沉默研究中作为一个检测显示基因,它的沉默直接导致棉花叶片表现出斑驳、褪色等生物学特征,便于棉花中重要功能基因的深入研究。
- 徐大伟张雨良檀根甲
- 关键词：棉花八氢番茄红素脱氢酶RACE技术表达谱
- 培养基中CuSO_4和Fe盐浓度对小麦胚培养再生效果的影响被引量：7
- 2011年
- 以小麦基因型CB037、新春9号和Bobwhite为材料进行成熟胚和幼胚培养,研究了CuSO4和Fe2-EDTA对小麦组织培养再生效果的影响。结果发现,培养基中添加0.1～4.1μmol/L CuSO4对小麦成熟胚组织培养无显著效果,超过6.1μmol/L对愈伤组织有毒害作用;培养基中添加40μmol/L Fe盐对小麦成熟胚组织培养和植株再生具有促进作用;不同小麦基因型其幼胚培养对Fe盐的反应不同,40μmol/L～50μmol/L Fe盐处理对CB037幼胚再生效果最好,20μmol/L Fe盐浓度对新春9号和Bobwhite幼胚再生效果较好,高浓度铁盐抑制作用显著;在相同培养条件下,CB037幼胚再生率最高,新春9号次之,Bob-white最低。
- 别晓敏杜丽璞徐惠君叶兴国
- 关键词：小麦CUSO4
- 大豆长链脂酰辅酶A合成酶基因GmLACS在酵母中的表达被引量：8
- 2011年
- 在LACS缺陷型酵母YB525中对已经克隆的大豆长链脂酰辅酶A合成酶基因(GmLACS)进行表达,并对其功能进行了预测。进化树比对分析显示大豆长链脂酰辅酶A合成酶(GmLACS)与其它植物的LACSs具有高度的同源性;酵母互补测试显示GmLACS蛋白能够互补LACS缺陷型酵母YB525,具有长链脂酰辅酶A合成酶活性;底物偏好性分析显示GmLACS偏好活化大豆中的重要的长链脂肪酸。以上研究结果表明:大豆长链脂酰辅酶A合成酶基因GmLACS编码的蛋白属于LACS家族,能够活化外源脂肪酸并参与了脂肪酸相关的脂类代谢。
- 于莉莉谭小力侯文胜
- 关键词：大豆
- 抗生素对根癌农杆菌抑制作用及对大豆子叶节再生的影响分析被引量：4
- 2011年
- 以周豆12大豆子叶节为材料,研究了头孢呋辛钠、头孢曲松钠、头孢噻肟钠和头孢唑林钠4种抑菌抗生素对农杆菌的抑制作用和对大豆子叶节再生的影响,以及卡那霉素对大豆子叶节再生的影响。结果表明:随着卡那霉素浓度的增加,子叶节分化率逐渐降低,当浓度达到45 mg/L时,分化芽的生长几乎完全受到抑制,植株出现白化现象;4种抑菌抗生素中,头孢曲松钠对农杆菌的抑制作用最好,头孢呋辛钠和噻肟钠抑菌效果次之,结合抑菌抗生素对子叶节再生的影响作用,确定在大豆子叶节的遗传转化中,使用头孢曲松钠或头孢噻肟钠作为抑菌抗生素,临界浓度分别为200 mg/L和300 mg/L。而卡那霉素使用的临界浓度为45 mg/L。
- 张福丽王贤李季平纪瑞杰黄云云李成伟
- 关键词：抗生素抑菌作用大豆
