山西省自然科学基金(2008011069)
- 作品数：12 被引量：83H指数：7
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- 铅对河南华溪蟹卵巢抗氧化酶活力和脂质过氧化水平的影响被引量：11
- 2012年
- 采用亚急性毒性实验方法,研究了铅(Pb2+)对河南华溪蟹(Sinopotamon henanense)卵巢组织抗氧化酶活性与脂质过氧化产物的影响.实验设置了5个Pb2+浓度组(3.675、7.35、14.70、29.40和58.80mg·L-1)和1个空白对照组,在3个染毒时间(5、10和15d)下对超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活力和丙二醛(MDA)含量进行了测定.结果显示,在不同浓度和不同暴露时间下,铅对河南华溪蟹卵巢SOD、CAT、GPx活力及MDA含量均有明显的影响.SOD、CAT活力表现为低浓度诱导激活,高浓度抑制,即先升后降的变化规律,GPx活力在5d和10d时表现出先升后降的趋势,在15d时活力不断下降,且SOD在10d、14.70mg·L-1Pb2+浓度组,CAT在5d、7.35mg·L-1Pb2+浓度组,GPx在10d、3.675mg·L-1Pb2+浓度组分别升至峰值,而卵巢MDA含量随染毒时间的延长和染毒浓度的升高逐渐增多,且在15d、58.80mg·L-1Pb2+浓度组中较对照组差异极显著。结果表明,Pb2+暴露对河南华溪蟹卵巢产生了明显的氧化胁迫作用,且抗氧化酶和脂质过氧化物水平可以作为重金属对水生生物毒理学研究的生物标志物.
- 马京津徐团轩瑞晶王兰
- 关键词：卵巢铅
- 镉对河南华溪蟹肝胰腺线粒体自由基代谢的影响被引量：9
- 2012年
- 为了探明镉对线粒体自由基代谢的毒性机理,采用急性毒性实验方法,研究了不同浓度镉(Cd2+)对河南华溪蟹(Sinopotamon henanen肝胰腺组织线粒体抗超氧阴离子(O2.-)能力、抑制羟自由基(.OH)产生能力、过氧化氢(H2O2)和一氧化氮(NO)含量及一氧化氮合成(NOS)活力的影响.具体实验设置5个Cd2+浓度组(7.25、14.50、29.00、58.00和116.00mg.L-1),分别在24、48、72和96h时对自由基代的相关指标进行测定.结果显示,Cd2+对线粒体自由基代谢的影响表现出时间和浓度效应关系.随着Cd2+浓度的增加和处理时间的延长O2.-能力、抑制.OH产生能力逐渐降低,但H2O2含量逐渐增高,NO含量和NOS活力的变化基本趋于一致,即随着Cd2+浓度的增加和处理间的延长先上升后下降.因此,线粒体中抗O2.-和抑制.OH产生能力、H2O2和NO含量及NOS活力可以作为重金属污染水生生物毒性效应指示物.
- 金芬芬王兰
- 关键词：肝胰腺线粒体自由基代谢镉
- 镉对长江华溪蟹肝胰腺线粒体抗氧化酶活力和脂质过氧化水平的影响被引量：23
- 2011年
- 近年来，镉对水生生物的污染越来越受到相关部门的高度重视。2003年对福州市等12个贝类养殖区的调查发现，其动物体内的镉含量均超标^[1]。镉在水生动物体内的蓄积，鱼类最多，甲壳类次之^[2]。溶于水的镉离子被动物体的鳃组织吸收后，经由血液运输到身体各个部位^[3]”，从而影响整个代谢过程。
- 金芬芬徐团秦圣娟王兰
- 关键词：长江华溪蟹肝胰腺线粒体镉
- 丹河水系表层沉积物重金属污染及生态风险评价被引量：18
- 2010年
- 采用原子吸收分光光度法和原子荧光光谱法,测定了丹河水系干流及主要支流表层沉积物中重金属(Mn、Zn、Cu、Pb、Cd、Cr、Hg、As)的含量,同时用沉积物质量基准法(SQG)和Hakanson潜在生态风险指数法,对重金属的毒性效应、污染程度及潜在生态风险进行了评价,并分析了重金属的主要来源。结果表明,丹河水系表层沉积物中Mn、Zn、Cu、Pb、Cd、Cr、Hg、As的平均含量分别为115.1、18.78、8.46、6.49、2.85、60.6、0.047、14.22mg·kg-1。Cd、As和Cr的含量介于最低效应水平(LE-L)与严重效应水平(SE-L)之间。根据SQG,丹河表层沉积物中重金属含量处于中度污染水平,可能会对河流生物产生一定的毒性效应,而Pb、Cu、Zn则尚无毒性效应。除了As和Cr之外,其他重金属元素之间均呈现较明显的正相关,表明在沉积物中这些重金属的含量具有共同的变化趋势,且具有一定的同源性。工业排污是造成丹河水质恶化的主要原因之一,也是重金属的主要来源。以山西省土壤背景值为参比进行Hakanson潜在生态风险指数评价发现,丹河水系表层沉积物呈现由强至极强的生态风险,其中Cd生态风险最大,Hg、As次之。对单个重金属的潜在生态风险系数和多个重金属的潜在生态风险指数进行分析显示,生态风险较大的样点是高平市、巴公河和水东。研究结果旨在得到单一污染物的环境影响和多种污染物的综合效应的评价结果,为丹河水系沉积物及水体重金属污染防治和决策管理提供科学依据。
- 马秀平井维鑫王茜李国保王兰李晓敏郭瑞雪
- 关键词：表层沉积物生态风险毒性效应重金属
- 河南华溪蟹金属硫蛋白原核表达载体的构建被引量：1
- 2011年
- [目的]构建河南华溪蟹(Sinopotamon henanense)金属硫蛋白(MT)的原核表达载体。[方法]以大肠杆菌DH-5α中的pGEM-MT质粒为模板,PCR扩增目的片段并连接至pGEM-T载体。然后,亚克隆至pQE31表达载体,转化大肠杆菌DH-5α感受态细胞。[结果]PCR扩增目的片段产物大小约为220 bp,与预期大小一致。重组质粒pQE31-MT双酶切鉴定结果也与预期相符。[结论]成功构建了MT原核表达载体,为今后表达并纯化MT提供了材料。
- 张志明马文丽李涌泉王兰
- 关键词：金属硫蛋白基因重组原核表达
- 镉对河南华溪蟹肝胰腺线粒体的影响被引量：1
- 2013年
- 运用透射电镜技术、电镜细胞化学技术、酶组织化学技术和JC-1荧光染色,观察不同浓度镉对河南华溪蟹(Sinopotamon henanense)肝胰腺线粒体的损伤.实验设对照组和5个染毒组:3.56、7.12、14.25、28.49和56.98mg·L-1,处理时间为72h.透射电镜观察显示,在低浓度组,线粒体轻度肿胀,部分线粒体外膜破裂,随染毒浓度的增加,线粒体水肿增加,嵴缩短甚至消失,直至线粒体破裂.酶组织化学检测显示,琥珀酸脱氢酶(succinic dehydrogenase,SDH)主要在细胞浆中表达,呈蓝紫色颗粒.SDH活性在3.56、7.12和14.25mg·L-1浓度组中比对照组显著增加(p<0.05),而在28.49和56.98mg·L-1浓度组中没有明显变化.SDH的亚细胞定位结果与酶组织化学检测的结果一致.JC-1荧光强度在3.56、7.12和14.25mg·L-1浓度组比对照组显著增加(p<0.05).线粒体膜电位与SDH的活性有正相关性(r=0.736,p<0.05).结果显示,镉引起线粒体结构损伤、功能障碍,并与镉浓度具有剂量-效应关系.线粒体是镉细胞毒性的重要靶位.
- 刘冬梅杨健张勐井维鑫王兰
- 关键词：肝胰腺线粒体SDH线粒体膜电位镉
- 镉诱导长江华溪蟹肝胰腺细胞凋亡研究被引量：7
- 2010年
- 应用显微与亚显微技术和琼脂糖凝胶电泳方法,研究了不同浓度Cd2+(0、7.25、14.50、29.00、58.00和116.00mg·L-1)处理不同时间(24、48、72和96h)对长江华溪蟹(Sinopotamon yangtsekiense)肝胰腺细胞凋亡的影响.结果显示,29.00mg·L-1Cd2+处理48h,光镜下肝胰腺细胞凋亡主要表现为染色质不规则凝聚、固缩和边集;58.00mg·L-1Cd2+处理72h,细胞核碎裂,形成凋亡小体;116mg·L-1Cd2+处理96h,出现坏死细胞;电镜下48h和72h处理组肝胰腺细胞呈现典型的细胞凋亡特征,与光镜检测结果一致,具体表现为核边集、核膜折叠、核裂解形成凋亡小体.琼脂糖凝胶电泳图谱中48和72h处理组出现凋亡细胞所特有的DNA梯状条带,58.00mg·L-1Cd2+处理72h后条带尤为清晰.随着Cd2+浓度的增加和处理时间的延长,肝胰腺中凋亡细胞所占比例呈现先升后降的趋势,凋亡指数的变化表现出显著的剂量和时间效应关系.研究表明,镉能够诱导长江华溪蟹肝胰腺出现细胞凋亡.细胞凋亡的检测及凋亡指数的变化能够灵敏地反映出镉对水生动物的胁迫程度及毒性大小,可作为水生态环境镉污染的生物评估指标.
- 李静闫博刘娜王茜王兰
- 关键词：长江华溪蟹肝胰腺细胞凋亡镉
- 镉对长江华溪蟹金属硫蛋白mRNA表达的诱导及低分子量壳聚糖的联合作用被引量：7
- 2011年
- 采用实时荧光定量PCR法,研究了不同浓度镉(Cd2+)对长江华溪蟹(Sinopotamon yangtsekiense)金属硫蛋白(metallothionein,简称MT)在肝胰腺、鳃、肌肉和心脏中mRNA表达的诱导作用及低分子量壳聚糖(lowmolecular weight chitosan,简称LMWC)的联合作用.镉浓度分别为29、58和87mg.L-1,镉与LMWC的联合作用组分别为58mg.L-1Cd2++20mg.L-1LMWC、58mg.L-1Cd2++40mg.L-1LMWC和58mg.L-1Cd2++80mg.L-1LMWC;处理时间均是4d.结果显示,与对照组相比,在镉胁迫下,长江华溪蟹肝胰腺、鳃和肌肉组织中MTmRNA表达显著增加,而心脏中的变化不显著.在LMWC和镉共同作用下,MTmRNA的表达在肝胰腺和鳃组织中比镉单独作用(58mg.L-1Cd2+)显著下降,而肌肉和心脏中的变化没有统计学意义.镉能诱导长江华溪蟹4种组织中MTmRNA的表达,且具有组织差异性;在LMWC与镉联合作用下,MTmRNA的表达有一定程度的下降.
- 周妍英李瑞金任国锐王兰
- 关键词：长江华溪蟹镉
- 镉对长江华溪蟹免疫相关酶活性的影响被引量：1
- 2011年
- 采用浸浴法研究了镉(Cd2+)对长江华溪蟹Sinopotamon yangtsekiense免疫系统相关酶的影响。Cd2+处理组浓度分别为7.25mg/L、14.5mg/L、29mg/L、58mg/L和116mg/L,同时设对照组。分别在Cd2+处理24h、48h、72h和96h取血清进行酚氧化酶(PO)、超氧化物歧化酶(SOD)、酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)活力测定。结果显示,在相同处理时间,随着Cd2+浓度增加,PO和SOD活力均呈现先升后降的趋势,且分别于24h、7.25mg/L和96h、14.5mg/L时达到最大值。当处理浓度相同、作用时间延长时,ACP活力先升后降,且在48h、58mg/L时升至最高,AKP活力则持续上升。表明Cd2+对长江华溪蟹免疫相关酶活力具有不同程度的影响,且其作用和效果具有浓度及时间效应。PO和SOD活力变化能够灵敏反映Cd2+对水生动物的胁迫程度,可作为指示镉污染的生物学指标。
- 秦圣娟秦琴金芬芬王兰
- 关键词：长江华溪蟹血清镉
- 长江华溪蟹β-actin基因cDNA扩增及分子系统发育初步分析
- 2011年
- 利用RT-PCR技术,扩增了长江华溪蟹(Sinopotamon yangtsekiense)β-actin基因片段,测序并结合GenBank数据库中蓝蟹(Callinectes sapidus)、中华绒螯蟹(E.sinensis)、黑背地蟹(Gecarcinus lateralis)、张口蟹(Neohelice granulata)、远海梭子蟹(Portunus pelagicus)、锯缘青蟹(Scylla serrata)6种蟹的同源序列进行比较。结果显示:在长为338 bp的β-actin同源序列中有115个变异位点,57个单碱基变化位点。7种蟹的种间核苷酸变异值从1.6%到25.3%,碱基替换比值从0.740到4.050,其中锯缘青蟹和远海梭子蟹亲缘关系很近,长江华溪蟹和地蟹、张口蟹亲缘关系较远,而中华绒螯蟹和远海梭子蟹关系较远。用NJ法和ML法构建了分子系统树,得到了相同的拓扑结构。系统发育分析表明长江华溪蟹单独形成一支,与其它海洋蟹的亲缘关系远,支持溪蟹单独划分总科。锯缘青蟹和远海梭子蟹先聚在一起,然后和黑背地蟹聚在一起,再和弓蟹科的张口蟹聚在一起,与传统形态学分类系统稍有不同。
- 高爱保王兰袁慧
- 关键词：长江华溪蟹Β-肌动蛋白反转录PCR分子系统发育
