国际科技合作与交流专项项目(2011ZR0003)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：蔚丹丹姚敏姚登福邱历伟陈洁更多>>
- 相关机构：南通大学更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目南通市科技局社会发展科技计划项目江苏省博士后科研资助计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 沉默GPC-3基因质粒构建及对HepG2细胞增殖的抑制作用被引量：1
- 2012年
- 目的:构建磷脂酰肌醇蛋白多糖(glypican,GPC)-3 shRNA质粒,观察GPC-3活化干扰对肝癌(HepG2)细胞的抑制作用。方法:设计与合成多条针对GPC-3序列的shRNA,插入pGPU6/GFP/Neo载体,构建、转染HepG2细胞、筛选高效质粒,观察沉默GPC-3表达对肝癌细胞增殖的抑制作用与机制。结果:经BamHⅠ或PstⅠ酶切鉴定,证实插入pGPU6/GFP/Neo载体GPC-3 shRNA序列正确,成功构建GPC-3 shRNA干扰质粒。以脂质体介导,将GPC-3shRNA1～4分别转染HepG2细胞,shRNA1沉默GPC-3 mRNA最高效率达89.3%,可有效抑制HepG2细胞增殖,在72 h达71.1%;shRNA1干扰使HepG2细胞周期阻滞在G1期,促进癌细胞发生凋亡(65.6%)。结论:shRNA可有效干预肝癌细胞GPC-3基因转录,促进凋亡并抑制增殖,GPC-3可望成为肝癌基因治疗的靶目标。
- 蔚丹丹姚敏陈洁严晓娣邱历伟姚登福
- 关键词：肝细胞性肝癌磷脂酰肌醇蛋白多糖-3
- GPC-3特异性短发夹型RNA干预基因转录对肝癌细胞增殖与凋亡的影响被引量：1
- 2013年
- 目的观察磷脂酰肌醇蛋白多糖(GPC)-3基因特异性短发夹型RNA(shRNA)对HepG2细胞增殖的抑制作用。方法设计、合成和筛选GPC-3特异的高抑制率shRNA并构建质粒;观察shRNA沉默GPC-3基因对肝癌细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响。结果成功构建了4种GPC-3 shRNA干扰质粒,以脂质体介导分别转染HepG2细胞后,筛选出的shRNA干扰质粒抑制率最高达89.3%;以该高效GPC-3 shRNA质粒转染HepG2细胞24h、48h和72h后,细胞增殖较对照组分别下降了33.2%、56.0%和71.1%(P<0.05),细胞多被阻滞在G1期;HepG2细胞凋亡率达65.6%,显著高于对照组(约为5%,P<0.05)。结论 GPC-3特异性的shRNA可有效降低HepG2细胞中GPC-3基因转录水平,抑制增殖并促进其凋亡。因此,GPC-3可望成为肝癌基因治疗的靶目标。
- 邰伯军姚敏蔚丹丹陈洁时运顾星张洁邱历伟姚登福
- 关键词：HEPG2细胞磷脂酰肌醇蛋白多糖-3基因沉默
