广西壮族自治区科学研究与技术开发计划(1298001-3-1)
- 作品数：13 被引量：63H指数：5
- 相关作者：王爱勤何龙飞肖冬杨旭东张静更多>>
- 相关机构：广西大学玉林师范学院广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区科学研究与技术开发计划国家现代农业产业技术体系建设项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 铁皮石斛中性/碱性转化酶(DoNI2)基因的克隆和表达分析被引量：10
- 2018年
- 目的克隆珍稀濒危兰科药用植物铁皮石斛中性/碱性转化酶(alkaline/neutral invertase,NI)家族基因成员,并对其进行定量表达以及生物信息学分析。方法采用转录组测序和RACE技术相结合克隆NI基因的cDNA序列,利用生物信息学工具对其进行分析,并采用实时荧光定量PCR方法检测NI基因在铁皮石斛根、茎和叶中的表达情况。结果克隆获得1个新的铁皮石斛NI基因,命名为DoNI2(Gen Bank登录号KY794404),全长2 397 bp,开放阅读框(ORF)为1 836 bp,编码611个氨基酸。DoNI2蛋白预测的理论相对分子质量和等电点分别为69 050和6.38,不稳定系数为42.95,疏水性系数为-0.232。DoNI2基因在铁皮石斛根、茎和叶中均有表达,其中在茎中表达量最高,根中最低。不同生长年限茎中DoNI2基因表达量与NI酶活性呈显著正相关。结论克隆了线粒体型的DoNI2基因的全长c DNA序列,为进一步阐明该基因在铁皮石斛蔗糖代谢途径中的重要作用奠定基础。
- 苗小荣牛俊奇莫昭展何龙飞王爱勤
- 关键词：铁皮石斛基因克隆基因表达实时荧光定量PCR
- 粉葛查尔酮合成酶基因PtCHS的克隆与植物表达载体构建被引量：2
- 2021年
- 查尔酮是植物体形成的一类次级代谢产物,在植物花色形成、育性及抵抗胁迫中发挥重要作用。前期研究发现粉葛与野葛中总黄酮的含量和葛根素的含量差异较大,而查尔酮合成酶是黄酮类化合物合成中的首个关键酶。为了研究野葛与粉葛中的查尔酮合成酶(CHS)基因是否存在差异性,利用同源克隆的方法,根据已报道的野葛CHS基因序列设计引物,从粉葛中克隆CHS基因,对其进行蛋白相对分子质量、二级结构及亚细胞定位预测等生物信息学分析并构建植物表达载体。结果显示,成功克隆到粉葛CHS基因,将其命名为PtCHS,该基因cDNA序列长1187 bp,包含一个长1179 bp完整的ORF框,推导编码389个氨基酸,预测蛋白相对分子质量为42.8 kD,理论等电点为5.96,无跨膜结构域,为稳定的亲水性蛋白,二级结构主要由α-螺旋、延伸链、β-转角和无规则卷曲组成,同时亚细胞定位预测结果显示蛋白位于细胞质;氨基酸序列多重比对发现,粉葛的查尔酮合成酶基因(PtCHS)所编码的氨基酸与已报道的野葛CHS基因编码的氨基酸同源性为100%,与大豆、赤豆、菜豆及木豆的氨基酸同源性均在95%以上;蛋白互作预测分析得出,CHS与CHI、C4H及REDUCTASE发生互作的可能性较大;用PtCHS与植物表达载体pBI121构建重组子pBI121-PtCHS,为葛根查尔酮合成酶基因的功能验证提供重要的参考依据。
- 羽健宾李钰婷张静肖冬詹洁何龙飞王爱勤
- 关键词：查尔酮合成酶
- 葛根淀粉合成关键酶活性动态及其与块根产量和淀粉积累的相关性研究被引量：2
- 2022年
- 为探讨葛根发育过程中淀粉合成关键酶活性与块根产量和淀粉积累的关系,以初步揭示其内在的生理机制。该研究以‘桂葛1号’粉葛和‘桂葛8号’野葛为材料,采取生理测定法对农艺性状、直链和支链淀粉的含量、淀粉合成关键酶活性等进行测定,并对葛根发育过程中淀粉合成关键酶活性、农艺性状和淀粉含量动态变化的关系进行相关性分析。结果表明:(1)块根发育过程中,两品种葛根腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase)、可溶性淀粉合成酶(SSS)、束缚性结合淀粉合成酶(GBSS)和淀粉分支酶(SBE)的活性呈现先增大后降低的单峰曲线变化,与直链淀粉、支链淀粉和总淀粉含量由缓慢增长到快速增长后趋于稳定的变化趋势基本一致,即在块根形成期至膨大期逐渐增长,至膨大后期达到最大,之后迅速下降,至成熟期缓慢下降,并维持在较高水平。(2)‘桂葛8号’的淀粉含量和产量显著高于‘桂葛1号’,其酶活性也均显著高于‘桂葛1号’。(3)葛块根的根长、根粗、单株重、干物质含量、产量表现为“缓慢-快速-稳定”的变化趋势,淀粉含量表现出类似变化。(4)相关性分析结果显示,4个淀粉合成关键酶活性与块根直链淀粉、支链淀粉及总淀粉含量、根长均呈显著或极显著正相关,与单株重、产量、干物质含量及根粗呈正相关,但差异不显著。综上认为,淀粉含量增加是葛根生长膨大增粗的结果,提高AGPase、SSS、GBSS和SBE的酶活性和竞争底物的能力,可提高葛根淀粉及其组分的积累,从而提高产量和品质。
- 郭丽君羽健宾肖冬何龙飞王爱勤
- 关键词：关键酶酶活性淀粉积累
- 除芽通对葛根、粉葛侧芽的抑制效应及产量和品质的安全性评价被引量：1
- 2021年
- 目的:为安全有效控制葛根、粉葛侧枝疯长,减少生产成本,提高葛根、粉葛产量和品质。方法:以课题组选育的粉葛“桂葛1号”和野葛“桂葛8号”为材料,在块根膨大初期,用不同浓度(0、7.25、11.0、16.5 g/L)除芽通处理,分析其对侧芽生长的抑制效应及对块根产量和品质的影响,并根据其在块根与枝条上的残留量和扦插枝条发芽率对其安全性进行评价。结果:除芽通显著抑制葛根、粉葛侧芽萌发和生长,抑芽效果以16.5 g/L浓度较好,处理后40 d桂葛1号和桂葛8号抑芽率分别为89.9%和84.9%,侧芽生长的平均长度分别为对照的34.0%和9.0%。桂葛1号块根产量和总黄酮含量以16.5 g/L浓度处理增幅最大,分别为68%和36.75%;淀粉含量以11.0 g/L浓度处理增幅最大,为1.49%;可溶性糖含量以7.25 g/L浓度处理增幅最大,为49.42%。收获期桂葛1号和桂葛8号块根中二甲戊灵含量分别为0.053 mg/kg和0.045 mg/kg,枝条二甲戊灵含量分别为1.060 mg/kg和0.915 mg/kg;桂葛1号处理枝条扦插发芽率达到91%以上,与对照无显著差异。结论:16.5 g/L浓度除芽通在葛根、粉葛块根膨大初期处理可显著抑制侧芽生长,促进产量和品质的提高,农残检测安全有效。
- 李发活李金妮黄鑫芦龙琨肖冬何龙飞王爱勤
- 关键词：粉葛除芽通农药残留
- 植物香味影响因素及其副产品研究进展被引量：1
- 2020年
- 国内外对植物香味的文献研究资料很多,特别是对其品质特点进行了针对性的分析与运用。顾客对购买植物香味有自己的要求,这就关系到重要指标的分析与运用。随着技术与人民生活水平的提升,对植物香味的选择与要求上是有了一个选择性的参照。特别是对葛根的品质上在国内外对其成份与其他的影响因素变量进行了综合的分析与研究运用,以及葛根产业及其风味的发展研究现状,为今后葛根农户及栽培工作者提供理论依据。
- 石方刚蒋顺红何龙飞王爱勤
- 关键词：影响因素
- 利用隶属函数法分析葛根种质资源品质的研究被引量：14
- 2017年
- 目的:利用模糊数学的隶属函数法对搜集的10个葛品种块根的6项产量及品质指标进行综合评价。方法:采收一年生种植在同一块试验地的10个品种的新鲜葛块根,每个品种3个重复,烘干,粉碎,过100目筛,得到干样,测定其可溶性糖、淀粉、纤维素、总黄酮及葛根素含量,采用隶属函数法进行综合评价。结果:广西主栽品种1号加权隶属函数值介于各品种中间,来自广西的8号、16号、6号3个品种以及山西的3号加权隶属函数值均高于1号,可作为高产优质葛资源推广和开发;最差的是来自云南的14号,其次是广西2号、云南4号和7号、湖北9号,其产量和品质指标贡献率均较低,不适宜在广西推广。结论:来自广西的8号、16号和6号葛为广西高产优质葛资源,具有较大的食用和药用开发利用价值。隶属函数评判法能够较全面、准确的对葛种质资源进行综合评价。
- 张静杨旭东郭丽君曾东强肖冬何龙飞何龙飞
- 关键词：种质资源综合评价隶属函数法
- 铁皮石斛转化酶抑制子家族基因的克隆和表达分析被引量：8
- 2018年
- 转化酶抑制子(Invertase Inhibitor,Inv Inh)能调控转化酶的活性,在植物的蔗糖代谢过程中具有重要作用。本研究旨在从珍稀濒危兰科药用植物铁皮石斛中克隆Inv Inh家族基因,并对其进行定量表达以及生物信息学分析。结果显示:从铁皮石斛叶中克隆到3个Inv Inh基因,分别命名为Do Inv Inh1、Do Inv Inh2和Do Inv Inh3,分别编码176、177和188个氨基酸。生物信息学分析表明,Do Inv Inh蛋白都具有1个信号肽、2个跨膜结构以及PMEI蛋白的保守结构域。Do Inv Inh蛋白的氨基酸序列同源性较低,但都具有4个保守的Cys位点和SP位点。荧光定量PCR分析发现,在根、茎、叶和花中都能检测到3个Do Inv Inh基因表达。Do Inv Inh2和Do Inv Inh3基因在根中表达量最低,而在花中表达量最高。Do Inv Inh1和Do Inv Inh3基因在铁皮石斛不同生长年限茎中的表达模式相似,都是在1年生茎中表达量最高,2年生茎中次之,在3年生茎中表达量最低。Do Inv Inh2基因在2年生茎中基因表达量最高。Do Inv Inh1和Do Inv Inh3基因表达量与CIN酶活性都呈显著负相关,推测这2个基因可能在调节茎中CIN酶活性中起作用。
- 苗小荣牛俊奇莫昭展王爱勤何龙飞
- 关键词：铁皮石斛基因克隆基因表达
- 2007～2012年我国葛根研究现状的文献分析被引量：2
- 2014年
- 为了解我国葛根研究现状，采用文献计量法，对我国2007～2012年发表的学术论文和学位论文资料进行统计分析。经资料收集，剔除无关数据，得到有关葛根的研究文献资料共1011篇，发表在医药类刊物最多，占47.97%，其中《中国中药杂志》最多，有30篇；涉及学科广泛，以医学和药学最多，占52.13%，其中又以葛根用于临床治疗研究最多。品种选育、深加工、有效成分提取、能源化利用和综合利用等为研究的薄弱环节，需要加强。
- 容林李创珍王爱勤何龙飞
- 关键词：文献计量法统计分析
- 桂葛系列品种拟锈病病害调查被引量：1
- 2019年
- 【目的】由葛藤集壶菌(Sychytrium puerariae Miy)侵染引起的葛拟锈病危害植株叶片、叶柄和茎蔓,导致这些部位生长发育畸形,茎生长缓慢,块根发育受阻,严重影响葛根产量。了解广西葛根产区葛拟锈病的发生情况,以便寻找有效防控措施。【方法】于2018—2019年对课题组选育的4个葛根品种在广西各地推广区域的拟锈病发生情况进行调查。【结果】不同品种葛根在产区的病情指数在0~50.31之间,品种间差别较大,大叶药用型桂葛18号为高抗品种,病情指数在0~0.16之间,平均病情指数为0.04;大叶加工型桂葛8号为中感品种,病情指数在18.00~50.31之间,平均病情指数为31.98;大叶加工型桂葛17号和小叶菜用型桂葛1号为中抗品种,病情指数分别在0.10~30.79和6.20~30.83之间,平均病情指数分别为16.48和16.77。【结论】桂葛18号发病严重度明显低于桂葛8号,同一品种葛根组培脱毒种苗发病严重度明显低于扦插苗。
- 潘睿扬袁高庆何龙飞肖冬王爱勤
- 关键词：病情调查抗性
- 氯吡脲对葛根Ptexp1基因表达的影响及其与产量品质形成的关系被引量：3
- 2021年
- 为研究氯吡脲对葛根Ptexp1基因表达影响及其与产量和品质的相互关系,揭示氯吡脲对葛根产量和品质影响的分子机制,本研究以‘桂葛1号’粉葛幼叶为材料,采用PCR同源克隆和RACE技术,克隆得到葛根expansin基因,命名为Ptexp1(GenBank登录号:MK169414)。该基因cDNA全长1063 bp,开放阅读框为91~846 bp,编码251个氨基酸,预测其分子量和等电点分别为26.78 kD和8.37,在64~149 aa和160~237 aa有DPBB_1和Pollen_allerg_1两个保守的蛋白质结构域。该基因与其他植物的expansin-A8基因核苷酸序列和氨基酸序列高度同源,其中与大豆、绿豆和豇豆expansin-A8基因的核苷酸序列同源性分别高达94%、92%和91%,与鸡血藤、大豆、豇豆和相思子expansin-A8基因的氨基酸序列同源性分别高达97%、95%、94%和93%。以葛根18S作为内参基因,Ptexp1基因在葛根膨大期不同组织中的表达规律为块根>根蔸>叶>茎,与不同部位发育表型吻合。1 mg/L氯吡脲处理显著提高该基因在块根、根蔸和茎的表达,但对叶片表达的影响不显著,与其处理显著提高块根、根蔸和茎的形态指标相吻合。本研究为氯吡脲调控葛根膨大的作用机理、产量和品质形成的分子机制及其新品种选育提供参考。
- 郭丽君羽健宾李钰婷杨旭东肖冬肖冬何龙飞
- 关键词：氯吡脲
