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国家自然科学基金(31072230)

作品数：12 被引量：52H指数：5
相关作者：常亚青丁君刘伟王晓燕宋坚更多>>
相关机构：大连海洋大学大连理工大学中国水产科学研究院黄海水产研究所更多>>
发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家海洋公益性行业科研专项更多>>
相关领域：农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 12篇中文期刊文章

领域

  • 12篇农业科学
  • 4篇生物学

主题

  • 10篇刺参
  • 3篇养殖
  • 3篇免疫
  • 3篇基因
  • 3篇仿刺参
  • 2篇地理群体
  • 2篇遗传分化
  • 2篇系统发生分析
  • 2篇消减杂交
  • 2篇免疫酶
  • 1篇蛋白
  • 1篇对刺
  • 1篇盐度
  • 1篇养殖池
  • 1篇养殖池塘
  • 1篇养殖刺参
  • 1篇养殖群体
  • 1篇抑制消减杂交
  • 1篇抑制性
  • 1篇抑制性消减杂...

机构

  • 11篇大连海洋大学
  • 1篇大连理工大学
  • 1篇中国科学院
  • 1篇中国水产科学...
  • 1篇中国科学院研...

作者

  • 11篇常亚青
  • 6篇丁君
  • 3篇刘伟
  • 2篇姬南京
  • 2篇王晓燕
  • 2篇田燚
  • 2篇赵冲
  • 2篇宋坚
  • 2篇李成泽
  • 1篇程龙
  • 1篇李润玲
  • 1篇庞振国
  • 1篇白雪秋
  • 1篇孙慧玲
  • 1篇马增艳
  • 1篇张宇鹏
  • 1篇于海龙
  • 1篇于佳平

传媒

  • 3篇水产学报
  • 3篇大连海洋大学...
  • 2篇渔业科学进展
  • 2篇农学学报
  • 1篇河北渔业
  • 1篇Chines...

年份

  • 1篇2016
  • 2篇2015
  • 4篇2014
  • 2篇2013
  • 1篇2012
  • 1篇2011
  • 1篇2010
共 12 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
黄、渤海沿岸海水养殖池塘冰期环境因子变化的研究被引量：10
2014年
于2012年1—2月从结冰期到盛冰期,监测了渤海湾沿岸的盘锦大洼(1#池塘)、瓦房店北海(2#池塘)、瓦房店沙山(3#池塘)和黄海北部的丹东东港(4#池塘)4处养殖池塘的冰层厚度及冰下不同深度水体的水温、盐度、pH和溶解氧(DO)饱和度。结果表明:结冰期和盛冰期,1#池塘的冰层均较厚,分别为33.6、53.0 cm,3#池塘的冰层均较薄,分别为12.8、17.6 cm;结冰期,1#、2#、4#池塘的水温变化较小,分别为-1.6^-1.8、-1.6^-1.7、-0.8^-1.2℃,3#池塘底层的水温变化较大,为-0.8^-1.4℃,而盛冰期,各养殖池塘均出现温跃层,但温跃层出现的位置和幅度不同;4#池塘水体的盐度在结冰期和盛冰期均较低,为26.4~30.0,而1#池塘水体的盐度在盛冰期较高,为33.5~34.9,从结冰期到盛冰期,1#池塘水体的盐度变化幅度较大,为29.7~34.9,平均变幅达4.5;各养殖池塘水体的pH变化相差较大,结冰期和盛冰期,1#池塘水体的pH均较高(8.6、8.5),4#池塘水体的pH均较低(7.2、7.5);结冰期和盛冰期,各养殖池塘水体的溶氧水平都出现了近饱和或过饱和状态,不存在养殖动物缺氧的现象。研究表明,温度变化可能对池塘中刺参的生理和存活产生一定影响,盐度变化可能对池塘中的菲律宾蛤仔产生影响,冬季如有大面积海冰发生时,可降低水体交换的频率,养殖池塘的深度以350~400 cm为宜。
刘伟丁君李润玲常亚青
关键词：养殖池塘冰层厚度水温盐度溶解氧
降温对刺参免疫酶、可溶性蛋白及可溶性糖影响的初步研究被引量：11
2012年
为初步探讨降温对刺参免疫酶、可溶性蛋白和可溶性糖的影响,采用2种降温模式,对刺参进行室内水温缓降实验和骤降实验。结果表明：（1）2种降温模式下刺参体壁可溶性蛋白有显著的差异（P〈0.05）;骤降过程中,不同的降温幅度（9.5、5.5、3.5℃）对可溶性糖、可溶性蛋白有显著的影响（P〈0.05）;缓降过程中,可溶性糖和可溶性蛋白在2℃点上变化较明显。（2）2种降温模式下刺参体腔液中过氧化氢酶（CAT）和超氧化物歧化酶（SOD）活性有显著的差异（P〈0.05）;骤降过程中,不同的降温幅度对CAT、SOD和碱性磷酸酶AKP活性有显著的影响（P〈0.05）;缓降过程中,几种免疫酶的活性随着温度的降低都产生了较为明显的变化。温度低于2~4℃以及降温幅度为9.5℃都会对刺参的免疫和生理指标产生显著的影响;缓降对刺参免疫指标的影响比骤降要小。
王晓燕常亚青丁君刘伟
关键词：刺参免疫酶可溶性蛋白可溶性糖
二硫苏糖醇对刺参卵母细胞体外成熟的影响被引量：1
2010年
用海星鞘神经提取液和二硫苏糖醇对刺参卵母细胞进行了体外人工促熟研究。结果显示,二硫苏糖醇对刺参卵母细胞具有明显的促熟作用。刺参卵母细胞包被在滤泡中发育,卵母细胞通过动物极的卵突起连接到单层细胞构成滤泡膜上,充分发育的卵母细胞处于生发泡期,染色质凝集在核仁周围,处于生发泡期的卵母细胞在海水中不会自发成熟。用二硫苏糖醇处理充分发育的卵母细胞20min,卵母细胞的生发泡开始移动,并锚定在卵母细胞的动物极,继而出现生发泡破裂。此后,减数分裂重新启动,第一、二极体分别排出。但海星鞘神经提取液对刺参卵母细胞没有促熟作用。实验表明,二硫苏糖醇浓度在10-5～10-1mol/L范围内,均可促使刺参卵母细胞发生生发泡破裂,10-2mol/L时诱导卵母细胞成熟率可达90%以上。
庞振国孙慧玲常亚青于佳平
关键词：刺参卵母细胞二硫苏糖醇
刺参体内RNA干扰方法的初步研究
2016年
以刺参溶菌酶基因(lysozyme gene,LYZ)为靶基因探索构建刺参体内RNA干扰体系。构建了3个刺参溶菌酶基因特异性的RNA干扰重组质粒,以刺参体腔液原代培养细胞为靶细胞进行筛选;分别以口腔注射和腹腔注射的方式以及不同的注射剂量对刺参LYZ进行体内RNA干扰,并运用qPCR技术测定刺参LYZ的表达量;最后,对刺参LYZ进行体内RNA干扰,并分别运用qPCR技术和比浊法测定刺参LYZ的表达量及其酶活性。结果显示:3种RNA干扰重组质粒的沉默效率分别为40%、45%、0%;体腔注射RNA干扰重组质粒时,各组织中LYZ的表达量均出现了显著的上升(P<0.05),而从口腔注射时,体腔液和肌肉中LYZ的表达量均出现极为显著的下降(P<0.01),而在管足中未出现明显变化;当其注射剂量为0.5μg和5μg时未对LYZ的表达产生有效的抑制作用;当注射剂量为10μg和25μg时,刺参体内LYZ的表达受到了明显抑制,但是注射剂量为25μg时,部分刺参个体出现吐肠现象;在转染12h后,刺参体腔液、肌肉、体壁、疣足和管足组织中LYZ的表达量开始下降,到第四天后开始回升。表明:只有从口腔注射RNA干扰重组质粒且注射剂量达到10μg时才能有效地抑制靶基因的表达;刺参体内RNA干扰具有系统性,可以在各个组织间相互传导。
张宇鹏田燚庚宸帆于海龙常亚青
关键词：刺参溶菌酶基因RNA干扰
升温对‘水院1号’和大连养殖刺参非特异性免疫影响的研究被引量：5
2015年
为获知升温对‘水院1号’和大连养殖刺参相关免疫酶活性及MDA含量的影响，实验设置不同温度梯度（16、20、24、28℃），分别对‘水院1号’和大连养殖刺参体腔液中过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）、溶菌酶（LSZ）的活性及丙二醛（MDA）含量进行测定。结果显示：（1）在升温过程中，‘水院1号’和大连养殖刺参体腔液中CAT、SOD、POD活性均呈先升高后降低的趋势。CAT活性范围分别为77.160~151.76、24.617~51.740 U/mL；SOD活性范围分别为0.070~0.154、0.056~0.100 U/mL；POD活性范围分别为2.360~3.470、1.407~2.407 U/mL。‘水院1号’和大连养殖刺参体腔液中LSZ活性均呈先升高再降低又升高的趋势，活性范围分别为9.741~30.898、8.554~28.006 U/mL。‘水院1号’刺参体腔液中MDA含量随着水温升高逐渐降低，其含量范围为42.331~46.563 nmol/mL，大连养殖群体刺参体腔液中MDA含量呈先降低后升高的趋势，变化范围为46.079~47.329 nmol/mL。（2）在升温过程中，‘水院1号’刺参体腔液中CAT、SOD、POD和LSZ活性变化较大连养殖群体刺参的变化差异大，其中CAT和POD活性变化差异显著（P〈0.05）。在28℃水温下，‘水院1号’刺参MDA含量显著小于大连养殖群体刺参MDA含量（P〈0.05）。研究表明，刺参能够对水温升高及时地做出生理免疫反应，通过调节非特异性免疫酶活性来清除机体内多余的活性氧，保护机体免受环境改变造成的损害。研究发现，‘水院1号’刺参较大连养殖群体刺参反应更为灵敏，对高温的适应性更强。本研究为探讨刺参对高温适应性和对‘水院1号’品种推广具有一定意义。
曹学顺丁君白雪秋常亚青
关键词：刺参免疫酶丙二醛
刺参耐寒基因筛选cDNA文库的构建与分析被引量：1
2013年
利用抑制性消减杂交(Suppression subtractive hybridization,SSH)技术,对刺参Apostichopus japonicus耐低温性状相关的基因进行研究。通过对刺参进行低温骤降试验,利用SSH技术构建刺参低温骤降双向消减cDNA文库,共获得6 800个阳性克隆,从文库中随机挑取1 000个阳性克隆测序,共获得680条有效EST序列。利用Blastx软件将测序结果与GenBank数据库进行比对,结果显示:72个克隆与已知基因高度同源,其中有6个基因与应激和免疫反应相关,存在于正向文库的有4个,分别为铁蛋白、溶菌酶、类似紫海胆冷诱导β-RNA结合蛋白和huadl3021索转铁蛋白,存在于反向文库的有2个,分别为热休克同源蛋白70和热休克蛋白gp96;有3个基因与营养代谢和运输相关,且都存在于反向文库,分别为主要卵黄蛋白1、主要卵黄蛋白2和胰淀粉酶。研究表明,刺参低温骤降文库的成功构建对阐述其耐低温分子机制有非常重要的意义,为刺参育种和生物学研究提供了新的资料。
李成泽王晓燕丁君常亚青
关键词：刺参抑制消减杂交
刺参主要卵黄蛋白MYP1、MYP2在不同幼体发育阶段、成体组织及温度胁迫条件下的相对定量表达被引量：2
2014年
为探讨温度胁迫对刺参基因表达的影响,从已构建的刺参耐寒基因筛选cDNA文库中选取差异基因主要卵黄蛋白(major yolk protein,MYP):MYP1和MYP2,利用实时荧光定量PCR研究了其在刺参胚胎发生和个体发育9个阶段(受精卵、囊胚期、原肠期、小耳状幼体、中耳幼体、大耳幼体、樽形幼体、五触手幼体和稚参)、成体7种组织(呼吸树、体腔液、肠、纵肌、体壁、雄性性腺和雌性性腺)、长时温度胁迫(20℃、4℃,30 d)和低温短时胁迫(7℃、4℃、1℃、-2℃,12 h)成体肠组织中的表达量。结果发现,MYP1和MYP2表达模式基本相同:(1)在胚胎发育阶段樽形幼体时期开始表达,随后的阶段持续表达,到稚参阶段表达量最高;(2)在7种组织中,肠中的表达量最高,在体腔液中基本不表达,其余组织中均有表达;(3)在长时(30 d)温度胁迫下,肠组织中MYP表达量由高到低依次为4℃、12℃、20℃,且在4℃的表达量为20℃的6倍左右;(4)在低温短时胁迫(1℃、-2℃,12 h)条件下,肠组织中MYP表达量受到显著抑制,约为常温条件下的一半。研究表明,MYP在刺参胚胎发育的樽形幼体阶段开始合成,成体合成部位主要为肠,水温过低会抑制其表达。
李成泽常亚青丁君高银雪程龙左然涛曹学顺
关键词：刺参幼体发育温度胁迫
仿刺参超氧化物歧化酶基因cDNA全序列的克隆及其特征分析被引量：3
2011年
以仿刺参Apostichopus japonicus为材料,利用cDNA末端快速扩增(RACE)方法首次得到仿刺参MnSOD的全长cDNA。该全长cDNA大小为955bp,其中5′端非编码区67bp,3′端非编码区216bp,开放阅读框(ORF)672bp,在3′端有多聚腺苷酸信号序列ATTTA,并有polyA加尾,符合有效翻译的基因全长cDNA的特征。MnSOD全长cDNA可编码223个氨基酸的前体蛋白,预测蛋白分子质量为24.64kD,理论等电点是6.66,为亲水性蛋白。该蛋白序列没有信号肽和跨膜结构,仅有一段线粒体导肽。其二级结构主要以α-螺旋为主,无规则卷曲和延伸链构成了蛋白中量最大的结构元件,不含β-折叠。仿刺参SOD的氨基酸序列与目前已报道的其他物种如人、牛、斑马鱼、原鸡、非洲爪蟾、中国对虾、皱纹盘鲍、海湾扇贝、果蝇等的MnSOD氨基酸序列进行序列比对的结果表明,相似性均在61%～69%之间,说明该基因在各物种间具有一定的保守性。该段氨基酸序列无N-糖基化位点,含有3个蛋白激酶C磷酸化位点,1个酪氨酸蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点,5个肉豆蔻酰基化位点,还发现了1个SOD家族的特征肽段DVWEHAYY。对磷酸化位点分析发现,有1个丝氨酸Ser,3个苏氨酸Tyr可能成为蛋白激酶磷酸化位点。二硫键分析表明,SOD含有3个半胱氨酸Cys,形成1个二硫键,连接着第17位和第107位的Cys。仿刺参MnSOD全长cDNA的克隆为更好地理解生物体内防御系统的催化O2-发生歧化反应、消除活性氧、维持机体活性氧代谢的平衡提供了理论基础。
田燚马增艳常亚青
关键词：仿刺参MNSOD基因克隆
3个地理群体仿刺参D-loop序列的变异及系统发生分析被引量：10
2014年
为研究中国大连（CD）、朝鲜罗津（KN）和俄罗斯海参崴（RV）3个仿刺参群体的遗传结构，实验采用PCR扩增和测序技术，对3个群体共计71头仿刺参的线粒体D．100p序列进行了分析。结果显示，D—loop序列长度为447～465bp，平均A＋T含量（59．2％）显著高于G＋C含量；共检测到119个变异位点，多态位点比例为24．24％，其中简约信息位点为53个，共有40种基因型，群体共享基因型7个。遗传多样性参数分析显示，3个群体均显示出较丰富的遗传多样性；分子方差（AMOVA）分析表明，3个群体间遗传分化较弱或只有中度分化，且93．04％的变异来自群体内。CD群体与RV群体之间遗传距离最远，为0．042，KN群体与RV群体之间遗传距离最近，为0．0374。将本研究所得序列结合GenBank中青岛（QD）和威海（WH）仿刺参的D-loop序列构建系统发育树，QD与WH仿刺参首先聚为一小支，然后与CD群体聚为一大支，KN群体与RV群体聚为独立一支，这一聚类方式符合地理隔离模式。
姬南京常亚青赵冲宋坚高银雪
关键词：仿刺参遗传分化
Expression responses of five cold tolerant related genes to two temperature dropping treatments in sea cucumber Apostichopus japonicus
2015年
Environmental conditions,including ambient temperature,play important roles in survival,growth development,and reproduction of the Japanese sea cucumber,A postichopus japonicus. Low temperatures result in slowed growth and skin ulceration disease. In a previous study,we investigated the effect of low temperature on gene expression profiles in A. japonicus by suppression subtractive hybridization(SSH). Genes encoding Ferritin,Lysozyme,Hsp70,gp96,and AjToll were selected from a subtracted cDNA library of A. japonicus under acute cold stress. The transcriptional expression profiles of these genes were investigated in different tissues(coelomocyte,respiratory tree,intestine,longitudinal muscle) after exposure to acute and mild temperature dropping treatments. The results show that(1) the five cold-tolerance-related genes were found in all four tissues and the highest mRNA levels were observed in coelomocyte and respiratory tree;(2) under the temperature dropping treatments,three types of transcriptional regulation patterns were observed: primary suppression followed by up-regulation at-2°C,suppressed expression throughout the two treatments,and more rarely an initial stimulation followed by suppression; and(3) gene expression suppression was more severe under acute temperature dropping than under mild temperature dropping treatment. The five cold-tolerance-related genes that were distributed mainly in coelomocyte and respiratory tissues were generally down-regulated by low temperature stress but an inverse up-regulation event was found at the extreme temperature(-2°C).
李成泽常亚青庞震国丁君姬南京
关键词：抑制性消减杂交热休克蛋白70
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