国家自然科学基金(39800131)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
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- 相关机构：上海第二医科大学中国科学院上海市农业科学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 用组合肽库技术分析HLA-B27的抗原提呈模式
- 2007年
- HLA分子抗原表位提呈模式的分析,在自身免疫病和肿瘤的病因与治疗研究方面有重要意义。采用组合肽库的策略合成19组ORX7型肽亚库,通过与荧光素标记肽的竞争结合试验,分析了与强直性脊柱炎有强相关的HLA-B27分子的抗原提呈模式。结果显示HLA-B27与P1为不同氨基酸残基的19种肽亚库有相近的结合率,提示P1为非锚定残基;中国人群最常见的两种HLA-B27亚型B*2704和B*2705,在提呈肽表位的P1模式方面存在一些小差异,P1为D或E的肽亚库与HLA-B*2704的结合能力要强一些,而P1为K的肽亚库则与HLA-B*2705的结合能力强一些。为HLA-B27与强直性脊柱炎关联机制的研究提供了线索,为开展HLA分子的抗原提呈模式分析打下了基础。
- 蒋黎华徐红岩张海静史桂英石学耕李伟毅
- 关键词：HLA-B27
- 用混合氨基酸接肽的方法合成OX型肽亚库被引量：1
- 2004年
- 肽库合成是药物研究组合化学策略的重要技术之一。建立合成OX型肽亚库的固相合成方法 ,接肽反应采用等摩尔的Fmoc氨基酸混合物和DIC HOBt缩合方法 ,以高浓度的缩合剂和不断缩减溶剂的策略促进偶联反应进行完全。产物的氨基酸组成分析结果显示 ,所使用的常见氨基酸都能以相近的摩尔比例接肽至X位置。推测经多次接肽后最终形成的肽亚库中 ,含低活力氨基酸较多的肽其浓度虽然会较低一些 ,但影响不会太大 ,且本合成方法成本相对较低 ,故可为抗原表位分析、多肽药物筛选及构效关系分析提供一种有用的工具.
- 蒋黎华徐红岩金健林张伟萍范丽安
- 关键词：肽库固相多肽合成混合氨基酸
- 用竞争结合法检测HLAⅠ类分子抗原呈递能力被引量：2
- 2003年
- 目的 建立弱酸处理后荧光素标记肽竞争结合法分析MHCⅠ类分子抗原呈递能力的方法 ,并评估其实用性。方法 pH2 .7～ 3.1的柠檬酸缓冲液对B淋巴母细胞进行短时处理后 ,即用IMDM培养液中和pH ,然后加入β2微球蛋白、荧光素标记的 9肽及竞争肽共同孵育 ,FACs检测细胞表面的平均荧光强度 ,以达到 5 0 %抑制所需的竞争肽浓度作为衡量竞争肽与MHC分子结合能力的指标。结果 通过不同pH的柠檬酸缓冲液处理、处理后不同时间加 β2微球蛋白和 /或荧光素标记肽、加入不同稀释度的竞争肽等角度 ,对方法进行评估 ,结果显示本方法操作简便、结果可靠、非特异性吸附小。结论 在排除其它MHCⅠ类分子的干扰后 ,本方法适合在国情条件下广泛开展MHCⅠ类分子抗原呈递能力及T细胞肽表位筛选等研究。
- 蒋黎华史桂英石学耕范丽安
