国家自然科学基金(81001259)
- 作品数：8 被引量：12H指数：2
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- 相关机构：南方医科大学深圳市疾病预防控制中心广州医学院第一附属医院更多>>
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- 人胚肺成纤维细胞衰老过程中Foxa2启动子区CpG岛的甲基化状态
- 2012年
- 目的探讨人胚肺成纤维细胞复制性衰老及过氧化氢诱导的早衰过程中Foxa2的表达改变及其启动子区CpG岛的甲基化水平变化。方法按传代情况将人胚肺成纤维细胞分为年轻细胞[第22代细胞,即22 PDL(populationdoubling levels,群体倍增水平)]组、中年细胞(35PDL)组、复制性衰老细胞(49PDL)组和氧化应激诱导的早衰细胞(premature senescence,PS)组。用荧光定量PCR方法检测人胚肺成纤维细胞衰老过程中Foxa2的mRNA表达改变,应用甲基化特异性PCR(MSP)检测启动子区-777～-478 bp甲基化的变化情况,并用亚硫酸氢盐修饰基因组结合克隆测序检测启动子区域CpG岛的甲基化水平。结果与年轻细胞组比较,中年细胞组人胚肺成纤维细胞Foxa2 mRNA的表达水平无明显变化;而复制性衰老细胞组和早衰细胞组人胚肺成纤维细胞Foxa2的mRNA表达水平均显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。早衰细胞组的启动子区具有一定的甲基化水平;年轻细胞组、复制性衰老细胞组及早衰细胞组Foxa2启动子区CpG岛的甲基化水平分别为5.7%,17.1%和43.6%。结论人胚肺成纤维细胞衰老过程中Foxa2的mRNA表达水平逐渐降低,其启动子区CpG岛甲基化水平逐渐升高,参与其表达调控。
- 张文娟纪卫东杨淋清许玉玲庄志雄
- 关键词：细胞衰老早衰甲基化
- 长期低剂量甲醛染毒对永生化人支气管上皮细胞16HBE部分癌症相关基因启动子区甲基化的影响
- 目的探讨低剂量甲醛长期染毒对永生化人支气管上皮细胞16HBE癌症相关基因启动子区甲基化水平的影响。方法 16HBE细胞每周染毒甲醛10μmol·L24 h,连续24周,分别于染毒3,6,9,12,15,18,21和24周...
- 杨淋清吴德生刘庆成龚春梅张文娟胡恭华周丽黄新凤刘建军庄志雄
- 关键词：甲醛亚甲基四氢叶酸还原酶基因
- 文献传递
- 人胚肺成纤维细胞衰老过程中P66Shc启动子区CpG岛甲基化状态被引量：1
- 2011年
- 目的探讨人胚肺成纤维细胞复制性衰老及过氧化氢诱导的早衰过程中P66Shc的表达改变及其启动子区域的甲基化水平变化。方法荧光定量PCR方法检测细胞衰老过程中的mRNA表达改变,甲基化特异性PCR(MSP)定性检测甲基化的变化情况,亚硫酸氢盐修饰基因组结合克隆测序定量检测启动子区域CpG岛甲基化水平。结果人胚肺成纤维细胞复制性衰老及过氧化氢诱导的早衰过程中,P66Shc的mRNA表达水平逐渐升高,中年细胞组及复制性衰老细胞组mRNA表达分别升高至1.78和1.73倍,而早衰组却显著增高,至7.16倍;年轻细胞组、复制性衰老细胞组及早衰组P66Shc启动子区域CpG岛呈高甲基化水平,分别为94%、90%和90%。结论人胚肺成纤维细胞复制性衰老过程中P66Shc的mRNA表达水平逐渐升高,其启动子区CpG岛呈高的甲基化水平,不参与该基因表达调控。
- 张文娟纪卫东杨淋清许玉玲庄志雄
- 关键词：细胞衰老早衰P66SHC甲基化
- 青蒿琥酯增强顺铂对人肝癌HepG2细胞的细胞毒作用被引量：2
- 2015年
- 目的研究青蒿琥酯（Art）及其联合顺铂（DDP）对人肝癌Hep G2细胞增殖和凋亡的影响。方法分别采用不同浓度的Art（0.16、0.8、4、20、100μmol/L）、DDP（0.16、0.8、4、20、100 mg/L）及Art（4μmol/L）和DDP（4 mg/L）联合处理Hep G2细胞24 h、48 h和72 h,MTT实验检测细胞增殖情况,流式细胞术检测Art（4μmol/L）组、DDP（4mg/L）组和Art（4μmol/L）＋DDP（4 mg/L）联合处理组细胞48 h的凋亡状况。结果随着处理时间延长（24~72h）,Art和DDP对Hep G2细胞生长的抑制/杀伤作用明显增强;它们在暴露72 h的条件下分别在0.16μmol/L和0.8 mg/L以上浓度具有浓度依赖性细胞毒作用。Art联合DDP处理细胞组对人肝癌Hep G2细胞的增殖抑制作用比单用Art或DDP组更强（P〈0.05）;人肝癌Hep G2细胞48 h的早期凋亡率分别为：Art组23.5%,DDP组27.8%,Art＋DDP联合用药组49.7%,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论青蒿琥酯可抑制人肝癌Hep G2细胞增殖并诱导其凋亡;它与顺铂联合应用可能增强后者对人肝癌Hep G2细胞的细胞毒作用。
- 陈淑怡姚朗姜浩张文娟刘云岗李荣
- 关键词：青蒿琥酯顺铂肝癌细胞凋亡
- 低剂量BPA对人胚胎干细胞向乳腺上皮细胞定向分化的影响(英文)
- it has been previously reported that Bisphenol A(BPA) can disturb the development of mammary structure and inc...
- 杨淋清Lingfeng LuoWeidong JiChunmei GongDesheng WuHaiyan HuangQingcheng LiuBo XiaGonghua HuWenjuan ZhangQian ZhangJianjun LiuWenchang ZhangZhixiong Zhuang
- 文献传递
- 人胚肺成纤维细胞复制性衰老过程中差异甲基化基因谱分析
- 目的 筛检人胚肺成纤维细胞复制性衰老过程中年轻及复制性衰老阶段差异的甲基化基因,为细胞衰老相关基因的表观遗传调控机制提供理论依据.方法 以人胚肺成纤维细胞为研究对象,利用免疫共沉淀(MeDIP)方法捕获并富集甲基化基因组...
- 张文娟纪卫东杨淋清胡大林杨建平袁建辉庄志雄
- 关键词：肺成纤维细胞衰老甲基化
- 人胚肺成纤维细胞衰老过程中P66Shc启动子区组蛋白修饰变化
- 2012年
- 目的检测体外培养的人胚肺成纤维细胞复制性衰老过程中及过氧化氢诱导细胞早衰阶段P66Shc启动子区的组蛋白修饰变化。方法按传代情况将人胚肺成纤维细胞分为年轻细胞(22 population doubling levels,22PDL)组、中年细胞(35PDL)组、复制性衰老细胞(49PDL)组和氧化应激诱导的早衰细胞(premature senescence,PS)组。检测P66Shc的mRNA表达及其启动子区IP1、IP2组蛋白修饰,包括组蛋白H3、H4乙酰化和H3(Lys4)甲基化修饰。结果与年轻细胞组比较,中年细胞组、复制性衰老细胞组和早衰组人胚肺成纤维细胞P66Shc mRNA表达水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。在P66Shc IP1启动子区(-1 641～-1 392 bp),中年细胞组和复制性衰老细胞组以H4乙酰化修饰为主,而早衰细胞组受H3、H4乙酰化和H3(Lys4)甲基化的联合修饰;在P66Shc IP2启动子区(-129～45 bp),中年细胞组和复制性衰老细胞组受H3(Lys4)甲基化修饰,而早衰细胞组受H4乙酰化和H4(Lys4)甲基化联合修饰。结论在细胞衰老过程中,P66Shc启动子区的组蛋白修饰参与其mRNA表达调控,复制性衰老与早衰的调控机制存在差异。
- 张文娟纪卫东杨淋清许玉玲庄志雄
- 关键词：细胞衰老P66SHC乙酰化
- 人胚肺成纤维细胞衰老过程中Foxa2启动子区组蛋白修饰变化被引量：1
- 2013年
- 目的检测体外培养的人胚肺成纤维细胞复制性衰老过程中及过氧化氢诱导细胞早衰阶段Foxa2启动子区的组蛋白修饰变化。方法按传代情况将人胚肺成纤维细胞分为年轻细胞(22 population doubling levels,22PDL)组、中年细胞(35PDL)组、复制性衰老细胞(49PDL)组和氧化应激诱导的早衰细胞(premature senescence,PS)组。采用荧光定量PCR检测Foxa2的mRNA表达水平,染色质免疫沉淀方法检测其启动子区IP1(-740 bp^-596 bp)、IP2(-187 bp^+84 bp)的组蛋白修饰,包括组蛋白H3、H4乙酰化及H3(Lys4)、H4(Lys20)甲基化修饰。结果与年轻细胞组比较,复制性衰老细胞组和早衰组人胚肺成纤维细胞Foxa2 mRNA表达水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05),中年细胞组无明显变化。在Foxa2 IP1启动子区,衰老的细胞具有降低的H3组蛋白乙酰化和增加的H4(Lys20)甲基化修饰;在IP2启动子区,衰老的细胞具有降低的H3(Lys4)甲基化修饰特征。结论在细胞衰老过程中,Foxa2启动子区特异的组蛋白修饰参与调控其mRNA表达水平。
- 张文娟纪卫东杨淋清许玉玲欧艺庄志雄
- 关键词：细胞衰老乙酰化甲基化
- 长期低剂量甲醛染毒对永生化人支气管上皮细胞16HBE部分癌症相关基因启动子区甲基化的影响被引量：4
- 2013年
- 目的探讨低剂量甲醛长期染毒对永生化人支气管上皮细胞16HBE癌症相关基因启动子区甲基化水平的影响。方法 16HBE细胞每周染毒甲醛10μmol·L-1 24h,连续24周,分别于染毒3,6,9,12,15,18,21和24周提取RNA或DNA,应用DNA甲基化相关酶消化结合荧光定量PCR的方法观察24个癌症相关基因启动子区甲基化水平的变化;应用荧光定量PCR的方法观察染毒对亚甲基四氢叶酸还原酶基因(MTHFR)和成对盒基因(PAX5)基因表达的时间-效应关系。结果与正常对照组16HBE细胞相比,甲醛染毒细胞4个基因甲基化水平显著改变,2个基因甲基化程度升高,2个基因甲基化程度降低;而在阳性对照人非小细胞癌上皮细胞A549细胞中有9个基因甲基化水平发生显著变化,其中3个基因甲基化水平升高,6个基因甲基化水平降低;甲醛染毒16HBE细胞和A549细胞MTHFR基因均发生高甲基化改变,PAX5基因均出现低甲基化改变。与正常对照组相比,甲醛染毒24周的细胞中,MTHFR基因启动子区甲基化水平升高,非甲基化DNA含量降低58.2%,而PAX5基因启动子区甲基化水平降低,非甲基化DNA含量升高27.1%;随着甲醛染毒时间延长,MTHFR基因表达逐渐降低,而PAX5基因表达逐渐升高。结论低剂量甲醛长期染毒可以使MTHFR基因和PAX5基因启动子区甲基化水平异常,进而引起基因表达水平改变。
- 杨淋清吴德生刘庆成龚春梅张文娟胡恭华周丽黄新凤刘建军庄志雄
- 关键词：甲醛亚甲基四氢叶酸还原酶基因
- 双酚A对胚胎干细胞及其向乳腺上皮细胞早期分化的影响
- 目的 探讨双酚A(BPA)尤其在其低剂量条件下对胚胎干细胞及其定向分化为乳腺上皮细胞过程的影响，为全面评价BPA安全性提供实验基础。方法 本研究应用小鼠胚胎干细胞(mESC)和人类胚胎干细胞为研究对象，体外实验观察BPA...
- 杨淋清罗凌凤龚春梅吴德生黄海燕刘建军张文昌庄志雄
- 关键词：双酚A胚胎干细胞乳腺上皮细胞乳腺癌
