山西省回国留学人员科研经费资助项目(2010015)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 相关作者：刘冬梅杨健王兰何永吉张勐更多>>
- 相关机构：山西大学山西医科大学南开大学更多>>
- 发文基金：山西省回国留学人员科研经费资助项目国家自然科学基金山西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：环境科学与工程生物学更多>>
- 镉对河南华溪蟹肝胰腺线粒体的影响被引量：1
- 2013年
- 运用透射电镜技术、电镜细胞化学技术、酶组织化学技术和JC-1荧光染色,观察不同浓度镉对河南华溪蟹(Sinopotamon henanense)肝胰腺线粒体的损伤.实验设对照组和5个染毒组:3.56、7.12、14.25、28.49和56.98mg·L-1,处理时间为72h.透射电镜观察显示,在低浓度组,线粒体轻度肿胀,部分线粒体外膜破裂,随染毒浓度的增加,线粒体水肿增加,嵴缩短甚至消失,直至线粒体破裂.酶组织化学检测显示,琥珀酸脱氢酶(succinic dehydrogenase,SDH)主要在细胞浆中表达,呈蓝紫色颗粒.SDH活性在3.56、7.12和14.25mg·L-1浓度组中比对照组显著增加(p<0.05),而在28.49和56.98mg·L-1浓度组中没有明显变化.SDH的亚细胞定位结果与酶组织化学检测的结果一致.JC-1荧光强度在3.56、7.12和14.25mg·L-1浓度组比对照组显著增加(p<0.05).线粒体膜电位与SDH的活性有正相关性(r=0.736,p<0.05).结果显示,镉引起线粒体结构损伤、功能障碍,并与镉浓度具有剂量-效应关系.线粒体是镉细胞毒性的重要靶位.
- 刘冬梅杨健张勐井维鑫王兰
- 关键词：肝胰腺线粒体SDH线粒体膜电位镉
- 镉对河南华溪蟹卵黄磷蛋白在卵巢中表达含量的影响及ELISA法的建立被引量：3
- 2015年
- 为了探究镉对河南华溪蟹(Sinopotamon henanense)的卵子发生的影响,通过凝胶过滤层析法纯化了成熟卵巢中的卵黄磷蛋白(Vitellin,Vn),采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳确定了Vn亚基数量及分子量,以纯化的Vn为抗原制备了Vn多克隆抗血清并建立了可靠的Vn含量测定的ELISA方法。采用氯化镉体外亚慢性染毒的方法,运用Vn-ELISA方法检测镉暴露对卵巢组织中Vn含量的影响。实验设对照组和5.8 mg/L镉处理组,处理时间分别为10、15和20d。结果显示,(1)SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明该蛋白由分子量为102、84和70 k D的3个亚基组成,同时Western-blotting检测表明,抗血清对该蛋白具有较强的免疫特异性;(2)在Vn-ELISA中,Vn抗体最佳稀释倍数为1︰100000,该方法的工作浓度范围为125—2000 ng/m L,定性检测的灵敏度可达到15.62 ng/m L;卵巢中Vn含量测定的结果中各批次间没有显著差异,且平均变异系数分别仅为7.81%,表示该法具有较高的稳定性和重复性;(3)镉引起卵巢组织中Vn含量的显著降低,与镉处理时间具有时间-效应关系,说明了镉暴露可影响河南华溪蟹卵母细胞的成熟并对卵子发生产生抑制作用,进而影响卵巢的正常发育。
- 杨健刘冬梅何永吉汉斯.达姆斯王兰
- 关键词：卵黄磷蛋白SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳酶联免疫吸附法镉
