国家自然科学基金(31140078)
- 作品数：10 被引量：27H指数：4
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- A型肉毒杆菌毒素对佐剂关节炎大鼠的镇痛作用被引量：5
- 2012年
- 目的观察关节腔内注射A型肉毒杆菌毒素（BoNT／A）在佐剂关节炎模型中的镇痛效果及疼痛相关物质在脊神经节及脊髓的变化。方法sD大鼠右后足跖部皮下注射完全弗氏佐剂（CFA）0．1ml建立类风湿性关节炎的动物模型（AA）。关节炎形成后随机分为3组：BoNT组（n=10）：关节腔内注射Botox／A0．02IU／5μl；NS组（n=10）：关节腔内注射生理盐水5μl；Sham组（n=10）：非关节炎模型组。5d后检测疼痛行为学、力量评估；免疫组织化学检测脊神经节钠离子通道1．8（Nav1．8）、脊髓N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基（NR2B）的表达。结果肉眼步态分析显示大鼠关节炎引起的严重的步态异常，BoNT治疗组改善了40％（P〈0．05）；治疗组大鼠右足热痛阈升高（P〈0．05）；脊神经节Navl．8高表达；脊髓NR2B表达降低。结论通过关节腔内注射Botox／A可以抑制疼痛信号的传导，减轻关节痛。
- 茹靖涛曹靖秦涛
- 关键词：肉毒杆菌毒素关节炎镇痛
- 微小RNA-92b在大鼠急性胰腺炎中对腺泡细胞凋亡的影响被引量：7
- 2013年
- 目的观察微小RNA-92b（miRNA-92b）在大鼠急性胰腺炎中的表达及其对急性胰腺炎腺泡细胞凋亡的影响。方法以50μg/L肿瘤坏死因子（TNF）-α诱导大鼠胰腺腺泡细胞（AR42J）建立体外急性水肿型胰腺炎模型，未处理的AR42J作为对照，检测干预12h后培养基中淀粉酶含量，实时荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）检测miRNA-92b在1、3、6h时表达量变化。慢病毒携带miRNA-92b的模拟物（miRNAmimic）及反义寡核苷酸链（miRNAAMO）转染AR42J，转染空病毒组作为对照。建立体外急性胰腺炎模型后，使用FQ-PCR检测miRNA-92b表达量；流式细胞术检测AR42J细胞凋亡率，Westernblot法检测活性半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶3（Caspase-3）表达量变化。结果TNF—α.诱导AR42J建立的体外急性胰腺炎模型，miRNA-92b3h表达水平较对照组升高（1．81±0．09）倍（P〈0．05）；转染miRNA-92bmimic组miRNA-92b表达量较空病毒组升高（3．71±0．33）倍（P〈0．05），AR42J凋亡率[（41．20±2．42）％]较空病毒组[（23．50±1．85）％]明显升高（P〈0．05），活性Caspase-3表达量明显升高；转染miRNA-92bAMO组较空病毒组miRNA-92b表达量降低（O．58±0．15）倍（P〈0．05），AR42J凋亡率[（13．80±0．40）％]较空病毒组[（23．50±1．85）％]明显降低（P〈0．05），活性Caspase-3表达量明显降低。转染空病毒组较未转染组miRNA-92b表达量、细胞凋亡率、活性Caspase-3表达量差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论急性水肿性胰腺炎发生时miRNA-92b表达量明显升高；上调miRNA-92b的表达，胰腺腺泡细胞的凋亡率增高，下调其表达胰腺腺泡细胞的凋亡率降低。
- 付强张宏伟秦涛刘传江胡明星唐强王玉柱薛飞张莉
- 关键词：急性胰腺炎脱噬作用微小RNA
- pcDNA3．1（＋）载体携带血管内皮生长因子治疗大鼠缺血皮瓣被引量：1
- 2012年
- 目的观察注射真核表达载体pcDNA3．1（＋）携带血管内皮生长因子（VEGF）基因后对大鼠缺血皮瓣存活的影响。方法构建重组质粒pcDNA3．1（＋）一VEGF，将sD大鼠随机分成3组，每组10只。pcDNA3．1（＋）-VEGF组：于背部皮肤皮下多点注射pcDNA3．1（＋）-VEGF30μg／100μl；VEGF组：多点注射VEGF蛋白100ng／100μl；生理盐水（Ns）组：注射生理盐水100μl，注射2d后在其背部形成7cm×3cm的全厚随意型皮瓣，48h后按原设计掀起皮瓣并原位缝合。术后10d测量皮瓣的成活面积，计算成活面积百分比，并行免疫组织化学检测。结果皮瓣成活面积百分比：pcDNA3．1（＋）-VEGF组为（79．1±3．5）％，VEGF组为（62．2±2．7）％，NS组为（59．9±3．1）％，pcDNA3．1（＋）-VEGF组皮瓣成活面积明显高于其他两组（P〈0．05）。结论皮下注射pcDNA3．1（＋）-VEGF可促进新生血管的形成，比单纯注射VEGF蛋白更能提高皮瓣的成活率。
- 茹靖涛曹靖秦涛
- 关键词：血管内皮生长因子皮瓣基因治疗
- BAY11-7082对5-氟尿嘧啶的抑制胰腺癌细胞增殖及诱导凋亡的影响
- 2014年
- 目的 观察核转录因子-κB（NF-κB）抑制剂BAY11-7082对胰腺癌细胞增殖及对不同浓度5-氟尿嘧啶（5-Fu）诱导胰腺癌细胞凋亡的影响.方法 人胰腺癌细胞SW1990经5μmoL/LNF-κB抑制剂BAY11-7082预处理1h后,Western blot法检测磷酸化NF-κB p65蛋白表达量.加入含有50、200 μg/L、1.0 mg/L 5-Fu的培养基,未经处理组作为对照,噻唑蓝（MTT）法检测各组胰腺癌细胞的抑制率,实时定量逆转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测抗凋亡基因B细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2） mRNA表达量,Western blot法检测抗凋亡基因bcl-2基因蛋白表达量,流式细胞术检测24 h胰腺癌细胞的凋亡率.结果 经BAY11-7082预处理1h后磷酸化NF-κB p65蛋白表达量较对照组明显降低.不同浓度的5-Fu作用下,经BAY11-7082预处理的各组胰腺癌细胞抑制率较对照组均明显升高（P＜0.05）.bcl-2基因mRNA表达量（0.75±0.09、0.52 ±0.01、0.41±0.06）较对照组（0.92 ±±0.01、0.81±0.05、0.72±0.01）均明显降低（P＜0.05）,bcl-2蛋白表达量较对照组明显降低,胰腺癌细胞的凋亡率[（16.79±1.23）％、（26.82±1.26）％、（38.20±5.89）％]较对照组[（8.64±0.30）％、（14.02±0.32）％、（24.13±1.60）％]明显增高（P＜0.05）.结论 BAY11-7082能通过抑制NF-κB的活化,增加5-Fu抑制胰腺癌细胞SW1990的增殖及诱导胰腺癌SW1990细胞的凋亡.
- 胡明星付强刘传江王玉柱秦涛
- 关键词：胰腺癌5-氟尿嘧啶凋亡
- 骨髓间充质干细胞对慢性胰腺炎大鼠血清指标及行为学的影响被引量：1
- 2013年
- 目的 观察骨髓间充质干细胞（BMSCs）对慢性胰腺炎大鼠血清指标及行为学的影响.方法 SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、假治疗组和治疗组,检测大鼠血清指标表达水平,观察大鼠饮食体质量及活动的变化.结果 输入BMSCs后,治疗组的血清淀粉酶、脂肪酶、透明质酸酶表达水平明显降低（P＜0.05）.治疗组的进食量与模型组和假治疗组比较差异无统计学意义（P＞0.05）,但体质量增加[（24±10）g]比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 BMSCs能够降低慢性胰腺炎的血清淀粉酶、脂肪酶、透明质酸酶的表达水平,改善慢性胰腺炎个体的生活质量.
- 秦涛刘传江付强胡明星唐强王玉柱张宏伟
- 关键词：骨髓间充质干细胞慢性胰腺炎饮食体质量
- 长链非编码RNARGD1566401在大鼠急性胰腺炎中对外分泌细胞凋亡的作用被引量：5
- 2018年
- 目的观察长链非编码RNA（lncRNA）-RGD1566401（lncR-RGD1566401）在大鼠胰腺腺泡细胞（AR42J）中表达及对AR42J凋亡的影响。方法分别用携带有lncR-RGD1566401目的基因的慢病毒（Lenti-lncRNA）和特异性lncR-RGD1566401抑制剂（lncRNA Smart Silencer）转染AR42J细胞株24 h，转染空病毒（Lenti-NC）和特异性lncR-RGD1566401阴性抑制剂作为对照；以100 nmol/L雨蛙肽（Caerulin）体外诱导正常培养AR42J及转染后AR42J的凋亡，药物诱导24 h后运用流式细胞技术（FCM）检测各组AR42J细胞凋亡率，使用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT-qPCR）法检测各组lncR-RGD1566401的表达，采用Western blot检测各组凋亡蛋白活性半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3和p53表达量变化。结果雨蛙肽体外诱导AR42J凋亡的凋亡率[（19.34±0.54）%]较对照组[（7.23±0.33）%]明显升高，lncR-RGD1566401表达量较对照组升高（5.43±0.31）倍，活性Caspase-3和p53表达量明显升高；转染携带有lncR-RGD1566401目的基因的慢病毒组lncR-RGD1566401表达量较空病毒组升高（8.24±0.22）倍，差异有统计学意义（P＝0.006）；AR42J凋亡率[（38.20±0.37）%]较空病毒组[（22.60±0.96）%]明显升高，差异有统计学意义（P＝0.016）；活性Caspase-3和p53表达量明显升高；应用特异性lncR-RGD1566401抑制剂组较阴性对照组lncR-RGD1566401表达量降低（0.54±0.14）倍，差异有统计学意义（P＝0.003），AR42J凋亡率[（13.60±0.33）%]较阴性对照组[（19.60±0.46）%]明显降低，差异有统计学意义（P＝0.012），活性Caspase-3和p53表达量明显降低。结论lncR-RGD1566401与大鼠AR42J细胞凋亡相关，上调lncR-RGD1566401的表达能够促进大鼠AR42J细胞凋亡。
- 张旭付强秦涛刘传江胡明星张宏伟
- 关键词：长链非编码RNA脱噬作用胰腺腺泡细胞
- 葛根素对人胆管癌RBE细胞凋亡的影响被引量：1
- 2018年
- 目的观察葛根素对人胆管癌（RBE）细胞增殖和凋亡的影响，及其相关基因表达量变化。方法RBE细胞培养后，使用不同浓度（0、100、250、500、1 000、1 500 μg/ml）的葛根素处理细胞，噻唑蓝（MTT）法检测细胞活力；（500、1 000 μg/ml）葛根素处理RBE细胞，流式细胞学技术（FCM）检测细胞凋亡；实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测B细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2）、bcl-2相关X蛋白（bax）基因的表达；Western blot检测凋亡相关蛋白的表达。结果MTT法细胞活力检测显示高浓度葛根素（500、1 000、1 500 μg/ml）以时间-剂量依赖的方式抑制RBE细胞的增殖，12 h抑制率[（8.14±1.85）%、（12.57±3.10）%、（18.26±2.74）%，P＝0.000、0.005、0.003]，24 h抑制率[（22.38±2.77）%、（29.14±3.85）%、（37.43±2.11）%，P＝0.005、0.007、0.002]，48 h抑制率[（35.47±3.75）%、（40.81±2.52）%、（52.29±3.98）%，P＝0.007、0.000、0.002]差异均有统计学意义；（500、1 000 μg/ml）葛根素处理RBE细胞24 h后，RBE细胞凋亡率[（14.21±2.53）%、（22.87±2.74）%]较对照组[（3.246±2.25）%]明显升高，差异有统计学意义（P＝0.013、0.008）；凋亡基因bax表达量与对照组（0.98±0.04）比较升高[（2.37±0.17）、（3.78±0.41）倍，P＝0.005、0.003]，bcl-2表达量与对照组（0.99±0.03）比较下降（1.57±0.14、2.86±0.55）倍（P＝0.002、0.008），差异均有统计学意义；活化半胱酰胺天冬氨酸特异性蛋白酶（Cleaved-caspase）-8、Cleaved-Caspase-9蛋白及bax蛋白表达水平升高（P＝0.015、0.003、0.008），bcl-2蛋白表达水平降低（P＝0.021），差异均有统计学意义。结论葛根素具有抑制RBE细胞增殖，促进其凋亡的作用。
- 李彬彬付强王玉柱胡明星刘传江秦涛
- 关键词：葛根素胆管癌增殖脱噬作用
- 微小RNA-135a通过抑制其靶基因Sp3的表达促进大鼠胰腺腺泡细胞凋亡被引量：8
- 2016年
- 目的探讨微小RNA135a（miR-135a）是否通过抑制其靶基因Sp3基因的表达促进大鼠急性水肿性胰腺炎中胰腺腺泡细胞（AR42J）凋亡。方法设计miR-135a模拟物及反义寡核苷酸链，并通过慢病毒转染AR42J细胞，72h后于荧光显微镜下观察AR42J细胞荧光表达量，实时荧光定量聚合酶链反应（FQ．PCR）法检测转染后miR-135a的表达量。使用50陆∥L重组大鼠肿瘤坏死因子-α（TNF—α）诱导AR42J细胞建立体外急性水肿性胰腺炎模型（AEP），淀粉酶试剂盒检测培养基上清淀粉酶含量，Westernblot法检测活性半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3表达量，流式细胞术检测AR42J细胞的凋亡率。构建Sp3野生型（WT）和突变型（Mut）3’非编码区（3’UTR）-荧光素酶报告载体，通过荧光素酶报告系统检测miR-135a对Sp3基因野生型及突变型3’UTR荧光素酶活性的影响，并通过FQ—PCR和Westernblot法检测转染miR-135a模拟物及反义寡核昔酸链后Sp3基因mRNA及蛋白表达量变化。结果转染miR-135a模拟物组较转染空病毒组miR-135a表达量升高（5．84±0．16）倍，转染miR-135a反义寡核苷酸链组miR-135a表达量是转染空病毒组的（0．54±0．01）倍，差异均有统计学意义（P〈0．05）。建立急性水肿性胰腺炎模型后，转染miR-135a模拟物组AR42J细胞凋亡率[（40．63±3．24）％]较转染空病毒组[（25．40±0．79）％]明显升高，转染miR-135a反义寡核苷酸链组AR42J细胞凋亡率[（15．10±0．10）％]较空病毒组明显降低，差异均有统计学意义（P〈0．05）。生物信息学软件及荧光素酶定量实验结果表明Sp3是mill-135a的靶基因，转染miR-135a模拟物组s03mRNA及蛋白质表达量较转染空病毒组明显降低，转染miR-135a反义寡核苷酸链组Sp3mRNA及蛋白质表达量较空病毒组明显升高，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论miR-135a可能能够通过抑制其靶�
- 付强秦涛刘传江陈琳楚皓源胡明星王玉柱张宏伟
- 关键词：急性水肿性胰腺炎胰腺腺泡细胞
- 微小RNA-135a对人胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响被引量：3
- 2014年
- 目的 观察微小RNA-135a（miRNA-135a）对人胰腺癌细胞株Bxpc-3增殖及凋亡的影响.方法 噻唑蓝（MTT）实验检测5-氟尿嘧啶（5-Fu）对Bxpc-3细胞的抑制率,选择合适的5-Fu浓度进行后续实验；流式细胞术检测5-Fu作用后Bxpc-3细胞的凋亡率；实时定量荧光逆转录聚合酶链反应（FQ-PCR）检测5 Fu作用后Bxpc-3细胞miRNA-135a的含量变化.设计miRNA-135a模拟物及反义寡核苷酸链,分别转染Bxpc-3细胞,并转染空病毒组作为对照,RT-qPCR检测各转染组miRNA-135a表达量；MTT法实验检测转染后各组Bxpc-3细胞的增殖率；流式细胞术检测5-Fu作用后各转染组Bxpc-3细胞的凋亡率.结果 5-Fu对胰腺癌细胞Bxpc-3的抑制有浓度和时间依赖性,随着药物浓度增大及作用时间延长,5-Fu对Bxpc-3抑制率增高.经5-Fu处理3、6、12h后miRNA-135a表达量是对照组的（0.45±0.02）、（0.60±0.03）、（0.73±0.02）倍,差异均有统计学意义（P＜0.05）.转染miRNA-135a模拟物组较空病毒miRNA-135a表达量升高（9.73±0.83）倍,差异有统计学意义（P＜0.05）；转染miRNA-135a反义寡核苷酸链组是空病毒组miRNA-135a表达量的（0.26±0.01）倍,差异有统计学意义（P＜0.05）.转染miRNA-135a模拟物组较转染空病毒组细胞增殖率明显升高,相反转染miRNA135反义寡核苷酸链组较转染空病毒组细胞增殖率明显降低.24h后,转染miRNA-135a模拟物组Bxpc-3细胞凋亡率[（12.03±1.07）％]较空病毒组[（20.61±1.53）％]明显降低,差异有统计学意义（P＜0.05）；转染miRNA-135a反义寡核苷酸链组Bxpc-3细胞凋亡率[（38.20±2.64）％]较空病毒组的（20.61±1.53）％明显升高,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 5-Fu作用于Bxpc-3细胞后miRNA-135a表达量降低；上调miRNA-135a表达,Bxpc-3细胞的增殖速率升高,Bxpc-3细胞的凋亡率降低；下调miRNA-135a的表达,Bxpc-3细胞增殖率降低,Bxpc-3细胞的凋亡率增高.
- 秦涛付强刘传江胡明星唐强王玉柱薛飞张莉张宏伟
- 关键词：胰腺癌微小RNA脱噬作用
- 单层连续胰肠端端吻合联合大网膜环形包裹在胰十二指肠切除术中的应用
- 2014年
- 目的 探讨在胰十二指肠切除术（PD）中采用单层连续胰肠端端吻合联合大网膜环形包绕对预防胰瘘的作用.方法 本治疗组61例PD中,应用传统胰空肠套入式32例,单层连续胰肠端端吻合29例,分析两组胰肠吻合时间、胰瘘等情况.结果 患者均顺利完成手术,胰肠吻合时间传统法为（26.0±5.0）min,单层连续法为（12.8±1.3） min;胰瘘发生率传统法为12.50％,单层连续法为6.89％;传统法出现消化道出血2例,两组均无胆瘘及围手术期死亡病例,术后住院时间：传统法为（17.3±4.1）d,单层连续法为（15.6±3.8）d.结论 单层连续胰肠端端吻合联合大网膜环形包裹术,操作简单,吻合时间短,能降低胰瘘发生率.
- 王玉柱秦涛刘传江胡明星张宏伟
- 关键词：胰肠吻合术胰十二指肠切除术
