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国家自然科学基金(30770105)

作品数：20 被引量：34H指数：4
相关作者：宋旭霞王斌钱冬萌李玲闫志勇更多>>
相关机构：青岛大学解放军第401医院青岛市疾病预防控制中心更多>>
发文基金：国家自然科学基金青岛市科技发展计划项目'泰山学者'建设工程专项更多>>
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文献类型

  • 20篇中文期刊文章

领域

  • 15篇医药卫生
  • 5篇生物学
  • 2篇农业科学

主题

  • 18篇细胞
  • 8篇胶质
  • 7篇巨细胞
  • 6篇人巨细胞病毒
  • 6篇病毒
  • 5篇凋亡
  • 5篇神经干
  • 5篇胶质细胞
  • 5篇HCMV
  • 4篇蛋白
  • 4篇星形
  • 4篇星形胶质
  • 4篇神经干细胞
  • 4篇胶质瘤
  • 4篇分化
  • 4篇干细胞
  • 4篇HCMV感染
  • 3篇星形胶质细胞
  • 3篇神经胶质
  • 3篇神经生长

机构

  • 16篇青岛大学
  • 1篇山东大学
  • 1篇解放军第40...
  • 1篇青岛市疾病预...

作者

  • 16篇宋旭霞
  • 15篇王斌
  • 15篇钱冬萌
  • 12篇李玲
  • 10篇闫志勇
  • 10篇丁守怡
  • 9篇白志强
  • 7篇王海涛
  • 7篇李鹏
  • 4篇徐莉莉
  • 4篇胡明
  • 4篇郑旭
  • 4篇刘海燕
  • 4篇赵巍
  • 4篇姜光域
  • 3篇侯云
  • 2篇于向民
  • 2篇王倩
  • 1篇吴伟风
  • 1篇苏洁

传媒

  • 5篇医学研究生学...
  • 3篇现代生物医学...
  • 3篇Virolo...
  • 2篇公共卫生与临...
  • 1篇生物技术通讯
  • 1篇山东医药
  • 1篇实用医学杂志
  • 1篇病毒学报
  • 1篇Biomed...
  • 1篇世界感染杂志
  • 1篇世界肿瘤杂志

年份

  • 1篇2013
  • 1篇2012
  • 3篇2011
  • 5篇2010
  • 9篇2009
  • 1篇2008
共 20 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
紫杉醇诱导的胰腺癌SW1990细胞凋亡过程中转录激活因子5和Bax表达水平的变化被引量：3
2010年
目的转录激活因子5(Activating transcription factor 5,ATF5)是一个新的与肿瘤细胞分化、增殖及凋亡密切相关的因子。文中检测胰腺癌SW1990细胞中ATF5的表达,并进一步研究紫杉醇(Paclitaxel,PTX)诱导的人胰腺癌SW1990细胞凋亡的水平,及其与ATF5、Bax表达水平的相关性。方法 RT-PCR检测未经药物处理的SW1990细胞中ATF5 mRNA表达水平;以不同浓度的紫杉醇(0、6.25、12.5、25、50、100、200 nmol/L)作用SW1990细胞不同时间(0、6、12、24、48 h),噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖情况;用100 nmol/L紫杉醇作用SW1990细胞不同时间(0、12、24、48 h)后,观察形态学变化并用Annexin V/7-AAD双染法,流式细胞仪检测细胞凋亡情况;采用RT-PCR检测紫杉醇作用不同时间后ATF5、Bax的mRNA表达变化。结果胰腺癌SW1990细胞中表达ATF5。紫杉醇抑制胰腺癌SW1990细胞的增殖,并在一定范围内呈剂量、时间相关性。随着紫杉醇作用时间的增加,流式细胞仪检测凋亡率显著提高。半定量RT-PCR检测结果显示:ATF5、Bax mRNA表达均明显增强,且两者之间存在相关性(r=0.916,P<0.05)。结论 ATF5在胰腺癌SW1990细胞中高表达,并且在紫杉醇诱导的细胞凋亡过程中,表达量进一步上升,其变化趋势与Bax基因相似。提示ATF5参与紫杉醇诱导的细胞凋亡,并可能与Bax的凋亡途径存在相关性。
胡明钱冬萌侯云彭凯李玲宋旭霞LIU David X王斌
关键词：紫杉醇胰腺癌细胞SW1990凋亡
人巨细胞病毒感染及其IE86蛋白对ARPE-19细胞周期的影响被引量：2
2010年
目的研究人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染ARPE-19细胞后对其细胞周期的影响,观察这种变化与HCMVIE2基因的关系,探讨HCMV感染的发病机制。方法用HCMV感染同步化的ARPE-19作为感染组,同时设模拟感染组为对照组。于感染后第1、2、3、4、5天收获细胞,RT-PCR方法检测HCMV IE mRNA的表达水平,用免疫荧光法检测细胞核内HCMV IE蛋白的表达,Western blot法检测HCMV早期蛋白IE和晚期蛋白pp65的表达。采用PCR方法从质粒pIEP86AD169扩增出IE2片段,构建真核表达质粒pEGFP-N3-IE2,脂质体介导瞬时转染ARPE-19细胞,RT-PCR、免疫荧光法分析IE2基因的表达。流式细胞术检测细胞周期的变化。结果 HCMV IE72、IE86和pp65可分别在病毒感染ARPE-19细胞后第2、3和5天时检测到表达,流式细胞术示感染组在感染第3、4、5天细胞周期的S期细胞比例显著增高,与对照组比较差异均有显著性统计学意义,P(0.05。瞬时转染质粒pEGFP-N3-IE2后细胞周期表现为S期细胞比例显著增高。结论 ARPE-19是HCMV的允许细胞,HCMV可引起ARPE-19细胞周期的改变,这种变化与IE2基因的表达有一定的关系。
刘海燕王斌李玲白志强姜光域王海涛钱冬萌赵巍闫志勇丁守怡宋旭霞
关键词：人巨细胞病毒ARPE-19细胞周期
HSV-1感染对神经胶质瘤细胞NGF和BDNF表达变化的研究被引量：4
2011年
目的:探讨单纯疱疹病毒1型(HSV-1)感染时神经胶质细胞内源性神经生长因子(NGF)和脑源性神经生长因子(BDNF)的表达变化。方法:采用RT-PCR法检测HSV-1糖蛋白D(gD)基因扩增,RT-PCR法和Westernblotting法检测正常培养和感染HSV-1的神经胶质瘤(U251)细胞的NGF和BDNF。结果:HSV-1可感染U251细胞;正常U251细胞可表达NGF和BDNF;HSV-1感染U251细胞后,NGF和BDNF在感染后第6小时达高峰,之后随感染时间延长逐渐降低。结论:HSV-1可诱导U251细胞中的NGF和BDNF表达异常。
侯云王斌李玲胡明辛晓妮钱冬萌闫志勇赵巍宋旭霞
关键词：神经胶质瘤单纯疱疹病毒1型神经生长因子脑源性神经生长因子
HSV-1感染对人星形胶质瘤细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响被引量：1
2010年
目的:研究单纯疱疹病毒1型(Herpes simplex virus,HSV-1)感染对人星形胶质瘤细胞U251增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法:以感染复数(MOI)为5的HSV-1感染体外培养的U251细胞,在感染后24h、48h、72h和96h用倒置显微镜观察U251细胞的形态改变;用MTT法、流式细胞术观察HSV-1感染对U251细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。结果:U251细胞在感染24h后开始出现细胞融合,48h后开始出现典型的细胞病变效应(Cytopathic effect,CPE),72h后超过80%的细胞出现CPE,。96h后细胞大部分死亡。②MTT法显示HSV-1感染U251细胞24h、48h、72h及96h的U251细胞OD值均低于对照组(P<0.05)。③HSV-1感染U251细胞12h后凋亡率与对照组无显著差异(P>0.05),感染24h和36h后凋亡率比相应对照组有显著差别(p<0.05)。④HSV感染12h、24h和36h后均可引起U251细胞S期细胞增多和G0/G1期细胞减少,24h后G2/M期细胞比例开始增加。结论:HSV-1能感染体外培养的U251细胞,抑制其增殖,促进其凋亡并影响其细胞周期。
王倩李玲于向民王斌白志强钱冬萌宋旭霞赵巍丁守怡
关键词：HSV-1U251凋亡细胞周期
人巨细胞病毒感染对人神经干细胞定向星形胶质细胞分化过程中Notch相关信号分子表达的影响被引量：6
2010年
目的人巨细胞病毒（human cytomegalovirus,HCMV）感染可抑制神经干细胞（neural stem cell,NSC）的增殖和分化,Notch信号对NSC的增殖和分化具有重要的调控功能。文中研究HCMV感染对人NSC向星形胶质细胞分化过程中Notch信号相关分子Notch1~3、Jagged（JAG）1、delta-like（DLL）1及早老素（presenilin,PS）1表达的影响。方法体外分离培养海马NSC,并诱导其向星形胶质细胞分化。同时以感染复数（multiplicity of infection,MOI）为5的HCMV AD169株感染NSC,分别在感染后0、1、3、5、7 d收获细胞,用实时RT-PCR法检测细胞内Notch1-3及其受体JAG1、DLL1的转录水平,Westernblot法检测Notch1细胞内段（Notch 1 intracellular domain,NICD）含量的变化。结果未分化状态的NSC含有大量Notch1NICD,Notch1-3、JAG1、DLL1mRNA呈高表达。诱导分化1d后,Notch各受体、配体mRNA表达均显著下降,3 d后表达回升,至第7天显著升高且可检出大量激活的NICD。HCMV感染组细胞在诱导分化1 d后Notch相关受体、配体mRNA水平亦明显下降,与对照组相比Notch1、Notch2和DLL1的表达更少。在以后各个时间点Notch相关受体、配体mRNA水平均低于对照组。PS1的表达仅在1 d时低于对照组。病毒感染7 d后,细胞内NICD含量明显低于对照组。结论HCMV感染可抑制Notch相关受体、配体的表达与活化,Notch信号异常表达参与HCMV感染所致NSC分化和增殖异常。
李玲白志强李鹏刘志军王海涛刘海燕姜光域宋旭霞钱冬萌闫志勇丁守怡王斌
关键词：神经干细胞人巨细胞病毒
沙蚕消化道D2菌株胞外蛋白酶对EMT6细胞增殖的影响被引量：1
2008年
目的研究沙蚕消化道产蛋白酶菌D2株胞外蛋白酶对鼠乳腺癌细胞EMT6增殖的影响。方法选用鼠乳腺癌细胞EMT6作为靶细胞，用0．0043-43μmol／L浓度的沙蚕消化道产蛋白酶菌D2株胞外蛋白酶（D2蛋白酶），通过体外细胞培养法进行细胞增殖抑制检测，测其吸光度（OD）值，计算细胞增殖抑制率，与阳性对照组（紫杉醇组）比较。结果实验组OD值低于空白对照组，且存在时间和剂量依赖关系。结论沙蚕消化道产蛋白酶菌D2株胞外蛋白酶对鼠乳腺癌细胞EMT6的增殖存在抑制作用，显示出一定的抗肿瘤活性。
徐莉莉王斌闫志勇钱冬萌丁守怡宋旭霞李鹏郑旭
关键词：海洋药物蛋白酶
肾移植术后HCMV感染与淋巴细胞亚群及肾功能的相关性被引量：3
2013年
目的:肾移植患者由于术前透析及术后服用免疫抑制剂,显著增加了人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)原发感染和潜伏感染被激活的机会。观察HCMV感染情况与血T淋巴细胞亚群及肾功能的变化,以探讨其相关性及临床意义。方法:跟踪收集40例肾移植患者术前、术后血标本,应用RT-PCR技术检测HCMV,流式细胞术检测淋巴细胞亚群,结合肾功能判断是否发生急性排斥或移植肾功能恢复延迟。结果:肾移植术后HCMV感染率为52.5%,10例出现症状性感染(25%),出现阳性时间35.7±15.3天。症状性感染组CD3+、CD4+的水平和CD4+/CD8+的比值较无活动性感染组和正常对照组均降低,CD8+水平较其他组升高,差异有显著性意义(P<0.05)。无症状性活动感染者与无活动性感染者各指标比较差异无显著性。活动性感染组急性排斥或移植肾功能恢复延迟发生8例(38.1%),无活动性感染组发生1例(5.2%),差异具有统计学意义(x2=6.15,P<0.05)。结论:肾移植术后HCMV感染能显著引起T淋巴细胞亚群变化,尤其是CD4+/CD8+。并与急性排斥或移植肾功能恢复延迟密切相关联,在其发生发展中可能起着重要的作用。三者相互联系、相互作用、互为因果,对进一步机制的研究及临床诊断治疗、预后方面有一定意义。
刘鹏钱冬萌王桐梅宋旭霞王斌
关键词：HCMV肾移植淋巴细胞亚群
人NSCs分化的Astrocyte系中HCMV感染的建立
2009年
目的研究HCMV能否感染体外培养的由人海马神经干细胞（NSCs）分化成的星形胶质细胞（astrocyte）。方法体外分离、培养人NSCs，诱导其定向分化为星形胶质细胞，观察细胞的形态学特点并分别进行免疫荧光鉴定。然后用HCMVAD169株感染分化细胞，观察细胞形态变化，检测胞内病毒蛋白表达，并收集感染细胞的培养液，添加到正常人胚肺细胞中，观察有无典型细胞病变出现。结果体外原代培养的人NSCs绝大多数都表达巢蛋白（nestin），诱导其分化为星形胶质细胞后，细胞高表达神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）。HCMVAD169感染细胞7d后，细胞出现肿胀、变大变圆等典型病变，胞核内检测到HCMV即刻早期基因表达产物-IE蛋白，添加感染细胞的培养液到人胚肺细胞中，细胞也出现典型病变。结论上述结果说明：在体外培养的由人NSCs分化成的星形胶质细胞中，HCMVAD169能够建立增殖性感染，这可能与先天性感染导致脑发育异常有关。
李鹏王斌李玲白志强王海涛徐莉莉郑旭丁守怡闫志勇宋旭霞钱冬萌
关键词：HCMV神经干细胞星形胶质细胞
Human Cytomegalovirus Infection Inhibits the Differentiation of Human Hippocampus Neural Precursor Cells into Astrocytes被引量：2
2009年
HCMV is a major cause of congenital brain disease in humans, and its neuropathogenesis is not yet fully understood. The objective of the present study is to investigate the effect of human cytomegalovirus (HCMV) infection on human hippocampus neural precursor cell (NPCs) differentiation in vitro. Fetal hippocampus tissue was dissociated mechanically and then cultured in proliferation medium with EGF and bFGF. The identification and purity of the NPCs were confirmed by using immunofluorescence to detect the expression of the NPCs marker-Nestin. To drive NPCs differentiation, bFGF and EGF were withdrawn from the medium and replaced with FBS (10%). HCMV AD169 (MOI=5) was added into the differentiation medium at the onset of the differentiation. After 7 days of differentiation, in order to confirm whether NPCs are permissive for HCMV infection, immunofluorescence was used to stain for the presence of immediate early (IE) and late (pp65) HCMV proteins in the infected cells. The effects of HCMV infection on NPCs’ differentiation was observed by detecting the ratio of nestin and GFAP positive cells with confocal microscopy and immunofluorescence. The data showed that 95%±8% of the cells (passage 4-8) cultured were Nestin positive which suggested that majority of the cells were NPCs. On day 7 postinfection, most of the infected cells were IE and PP65 positive. The percentage of Nestin-positive cells were 93%±10% and 50%±19% (t=6.03, p<0.01) and those of GFAP-positive cells were 55±17% and 81%±11% (t=3.77, p<0.01) in HCMV treated and control groups respectively. These findings indicate that NPCs are HCMV permissive cells and HCMV (AD 169) infection suppresses the differentiation of Hippocampus-genetic human NPCs into astrocytes. These effects may provide part of the explanation for the abnormalities in brain development associated with congenital HCMV infection.
Ling LIBin WANGPeng LIZhi-qiang BAIHai-tao WANGHai-yan LIUDong-meng QIANXiu-xia SONGShou-yi DINGZhi-yong YANGuang-yu JIANG
关键词：星形胶质细胞细胞分化巨细胞
人巨细胞病毒诱导分化中的神经干细胞分泌神经生长因子前体被引量：4
2010年
目的研究人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染对人神经干细胞(neural stem cells,NSC)向星形胶质细胞分化过程中神经生长因子(nerve growth factor,NGF)及其受体p75NTR、trkA表达的影响,为阐明HCMV感染致NSC损伤的分子机制提供理论依据。方法体外培养人海马NSC,感染组以感染复数(multiplicity of infectin,MOI)为5的HCMVAD169株感染NSC,对照组只加入与病毒悬液等体积的培养液,在感染病毒的同时,诱导感染组和对照组NSC向星形胶质细胞分化,分别在感染后0、1、3、5、7、9 d收获细胞,用RT-PCR、免疫荧光和Western blot方法检测细胞内NGF及其受体p75NTR、trkA的转录水平和蛋白表达水平。结果对照组NSC不表达NGF及其受体P75NTR和trkA。感染组细胞在第3天开始出现NGFmRNA的表达,第5天出现P75NTRmRNA的表达,且其表达强度随时间增强;第5天出现相对分子质量为40000和100000NGF前体蛋白(ProNGF)和P75NTR蛋白,随时间延长,表达强度升高。免疫荧光检测显示,NGF前体蛋白位于细胞的细胞质;整个感染过程中未检测到trkA的表达。结论 HCMV感染可诱导向星形胶质细胞分化的海马NSC分泌NGF前体蛋白及其受体p75NTR。
李玲王斌白志强李鹏王海涛刘海燕姜光域宋旭霞钱冬萌闫志勇丁守怡
关键词：人巨细胞病毒神经生长因子P75NTR
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